Project/Area Number |
10770894
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Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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Allocation Type | Single-year Grants |
Research Field |
Otorhinolaryngology
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Research Institution | 大分医科大学 |
Principal Investigator |
植山 朋代 大分医科大学, 医学部, 助手 (40295184)
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Project Period (FY) |
1998 – 1999
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 1999)
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Budget Amount *help |
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 1999: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 1998: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
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Keywords | 滲出性中耳炎 / サイトカイン / マウス |
Research Abstract |
滲出性中耳炎の成因とその遷延化については様々な知見が報告されており、中耳貯留液中のサイトカインの関与についても解明されつつある。中でも、TFN-αは滲出性中耳炎を惹起する重要な因子として知られている。ところが、近年、元来マクロファージを刺激してTNF-αの分泌を促していると考えられているエンドトキシンにマクロファージのTNF-α産生を耐性化させる作用があることがin vitroで証明されているが、実際グラム陰性菌感染時に生体内で同様の耐性が成立しているかは不明である。 そこで、今回、マウスの中耳炎モデルを用いて、中耳炎経過中に於けるTNF-α産生とその耐性化について検討を行った。マウス中耳骨胞にインフルエンザ生菌あるいはザイモザンを注入して滲出性中耳炎を作製し、得られた中耳貯留液により細胞を遠心分離し、エンドトキシン、ザイモザン、或いは培養液のみで培養し、培養液中及び細胞中のTNF-α についてELISA,Flow-cytometry,RT-PCRを行った。その結果、ELISAにおいて、インフルエンザ生菌による中耳炎では、中耳貯留液中の細胞をエンドトキシンを用いて刺激してもTNF-αの産生が抑制されていることが分かった。ザイモザンによる中耳炎ではTNF-αの産生は認められた。さらにこの抑制現象はFlow-cytometryによる細胞内サイトカインの測定、及びRT-PCRによるmRNAの定量においても確認された。 以上より、蛋白レベル、細胞レベル、及びmRNAレベルにおいてグラム陰性菌感染という形でのエンドトキシン一次刺激により、生体内でマクロファージのTNF-α産生耐性化が成立していることが明らかとなった。 今後この耐性機構が明らかになれば、TNF-α産生を抑制する事により感染の発症や遷延化を予防する手段の開発につながると予測される。
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Report
(2 results)
Research Products
(2 results)