Project/Area Number |
10770947
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Research Category |
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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Allocation Type | Single-year Grants |
Research Field |
Ophthalmology
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Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
Principal Investigator |
澤 浩 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (20264773)
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Project Period (FY) |
1998 – 1999
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 1999)
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Budget Amount *help |
¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Fiscal Year 1999: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 1998: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
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Keywords | AGE / 糖尿病網膜症 / 網膜組織 / 硝子体 / トルイジンブルー染色 / tight junction / マイクロシリンジ |
Research Abstract |
本研究の目的は、明らかにされつつある種々のAGEsの作用を、網膜組織レベルで調べることにある。昨年度実験系をもとに。糖尿病を自然発症し、100%に糖尿病白内障を呈するGKラットを用い、bovine serum albumin(BSA)とAGEをインキュベートして作成した50mg/mlAGEs-BSAを直接硝子体腔内に注入し、その後の網膜血管の変化を観察した。注入には試行錯誤の結果さらに細いマイクロシリンジを用いることにした。実験を繰り返したところ、normalラットと同様に一回の投与では糖尿病性の変化は検眼鏡的、蛍光眼底造影でも観察されなかった。持続的な高濃度のAGEsが硝子体中に必要と判断し、3日毎に硝子体注入を施行した。各ラットにつき約3週間程度注入を続けた。注入毎に観察したが糖尿病性の変化は検眼鏡的には網膜出血などの糖尿病網膜症と考えられる所見は認めなかったが、蛍光眼底造影では網膜血管からの漏出が観察された。繰り返し投与は組織侵襲も大きく、投与方法の変更の必要性を痛感した。今後は硝子体内にAGEsを含んだマイクロスフェアーを強膜創から注入し持続的にAGEsを放出する方法も試みようと考えている。組織学的検討として眼球摘出を行い2.5%グルタールアルデヒド含有0.1Mリン酸緩衝液にて眼球を浸漬固定した網膜部位を切り出し、一部はプラスチック包理(JB-4)後、約1μmの切片とし、トルイジンブルー染色を施した。組織的に明らかな糖尿病性変化は観察できなかったが網膜浮腫などの以上を示す所見が認められた。また一部はエポキシン樹脂に包埋後超薄切し透過電子顕微鏡を用いて観察では血管内皮細胞、壁細胞などのtight junctionの異常が観察された。
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