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毒化ホタテガイ中腸腺における麻痺性貝毒結合タンパク

Research Project

Project/Area Number 12876049
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Fisheries chemistry
Research InstitutionKitasato University

Principal Investigator

児玉 正昭  北里大学, 水産学部, 教授 (40050588)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 酒井 隆一  北里大学, 水産学部, 助教授 (20265721)
佐藤 繁  北里大学, 水産学部, 助教授 (20170748)
Project Period (FY) 2000 – 2001
Project Status Completed (Fiscal Year 2001)
Budget Amount *help
¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2001: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2000: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Keywords麻ひ性貝毒 / ホタテガイ / 結合タンパク / チオール化合物 / メタロチオネイン
Research Abstract

毒化したホタテガイ中腸腺より水溶性タンパクおよび膜結合タンパク画分を得、両タンパク画分をサキシトキシン(STX)に対する抗体を用いたwestem blot分析にかけたところ、両者共に抗体と反応する複数のタンパクバンドを観察した。抗体と反応するバンドは膜結合タンパク画分に強く認められた。westem blotにおける抗体との反応を指標にこれらタンパクの精製を試みたが、精製過程でタンパクのバンドが変化し、タンパクの分解が起こっていることが考えられた。この原因は現在のところ不明で、ホタテガイ試料からは毒が結合したタンパクの精製が困難であった。そこで市販のメタロチオネインに毒を結合させた標品を用い、タンパクと毒との結合様式を検討した。まず毒を結合させたメタロチオネインをゲルろ過および抗STX抗体をリガンドとするアフィニティクロマトグラフィーで精製し、これをproteaseで分解した。分解物をGSHと毒の複合体(GS-STXs)分析用に開発したHPLCに付したところ、GS-STXsとは異なる位置に1本のピークを与えた。用いたproteaseは非特異的なものであるので、peptideは完全に加水分解されたと考えられ、HPLCで検出された分解物はシステインと毒の複合体であることが考えられた。これに対し、PSPの代謝研究においてシステインと結合した毒は速やかに分解されることが明らかにされている。したがって本研究で認められた分解物中のピークは毒とシステインの複合体とは考えにくく、その性状を明らかにする必要がある。今回は試料の量的制約からこれ以上の検討は出来なかったが、今後毒化ホタテガイ中の毒結合タンパクについても同様のprotease処理を行い、毒と結合している分解物の性状を明らかにしていく予定である。

Report

(2 results)
  • 2001 Annual Research Report
  • 2000 Annual Research Report

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

  • [Publications] K.Sekiguchi,Masaaki Kodama et al.: "Accumulation and depuration kinetics of paralytic shellfish toxins in the scallop Patinopecten yessoensis fed Alexandrium tamarense"Marine Ecology-Pregress Series. (in press).

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] K.Sekiguchi,M.Kodama et al.: "Accumulation of paralytic shellfish toxins in the scallop Patinopecten yessoensis caused by the dinoflagellate Alexandrium catenella in Otsuchi Bay, lwate Prefecture, northem Pacific coast of Japan"Fisheries Science. (in press).

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Sigeru Sato,Masaaki Kodama et al.: "Frequent occurrence of paralytic shellfish poisoning toxins as dominant toxins in marine puffer from tropical water"Toxicon. 38巻. 1101-1109 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] S.Sato,R.Sakai.,M.Kodama: "Identification of thioether intermediates in the reductive transformation of gonyautoxins into saxitoxins by thiols."Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters. 10巻. 1787-1789 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Setsuko Sakamoto,Masaaki Kodama et al.: "Formation of intermediate conjugates in the reductive transformation of gonyautoxins to saxitoxins by thiol compounds"Fisheries Science. 66巻. 136-141 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] R.Groben,M.Kodama et al.: "16S rRNA Targeted Probes for the ldentification of Bacterial Strains lsolated from Cultures of the Toxic Dinoflagellate Alexandrium tamarense"Microb.Ecol.. 39巻. 186-196 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Masaaki Kodama: "Seafood and Freshwater Toxins : Pharmacology, Physiology, and Detection (Botana,L.M.,Ed.) Part 6.Paralytic Shellfish Poisoning"Marcel Dekker,Inc. : New York, Basel. 798 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report

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Published: 2000-03-31   Modified: 2016-04-21  

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