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ゲノム編集法を用いたミツバチの社会性行動制御におけるmKastの機能解明

Research Project

Project/Area Number 17J03716
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Animal physiology/Animal behavior
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

河野 大輝  東京大学, 理学系研究科, 特別研究員(DC1)

Project Period (FY) 2017-04-26 – 2020-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2018)
Budget Amount *help
¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000)
Fiscal Year 2018: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2017: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Keywordsミツバチ / ゲノム編集 / キノコ体 / 社会性行動 / セイヨウミツバチ / ケニヨン細胞 / mKast
Outline of Annual Research Achievements

ミツバチはモデル社会性動物としてその分子神経基盤が研究されてきた。中でも、昆虫脳の高次中枢であるキノコ体と社会性行動との関連が着目されている。キノコ体を構成するケニヨン細胞には、遺伝子発現プロファイルが異なるサブタイプが存在しており、その一部は採餌飛行時に活性化される。また、サブタイプの数は、ハチ目昆虫の行動の複雑化に伴い増加した可能性が指摘されている。これまでにサブタイプ選択的に発現する遺伝子群が見つかっているが、近年までミツバチでは有効な遺伝子操作法が存在せず、その社会性行動制御における機能は不明である。
そこで本研究では、申請者が確立したミツバチにおけるゲノム編集法を用い、キノコ体において中間型ケニヨン細胞選択的に発現するmKastの機能を調べることを目的とした。これまでに、受精卵にゲノム編集を施し、孵化した幼虫を女王蜂へと分化させることでモザイク女王蜂(F0)を作出し、更にこれら女王蜂から変異雄蜂(F1)を作出した。さらに、変異雄蜂から採取した精子を用いて野生型女王蜂に人工授精を施し、ヘテロ変異体働き蜂(F2)の作出に成功した。また、変異雄蜂を用いた解析から、頭部におけるmKastタンパク質の発現は完全に欠失していること、それにも関わらず変異雄蜂には野生型と同数のケニヨン細胞サブタイプが存在していたことから、mKastは当初予想されていた中間型ケニヨン細胞の分化には機能していないことを示唆した。本研究成果の一部は、ミツバチにおける遺伝学の実証と、遺伝子機能解析を試みた初めての報告として、論文発表した。
一方、これまでは受精卵への変異導入効率が低く、その後の継代が困難であった。そこでインジェクション法を改良したところ、F0世代で高効率にゲノム編集された個体を作出できたため、今後はこの手法を用いることで、ミツバチにおける遺伝子機能解析が簡便化されることが期待される。

Research Progress Status

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2018 Annual Research Report
  • 2017 Annual Research Report
  • Research Products

    (13 results)

All 2018 2017

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 4 results,  Open Access: 4 results) Presentation (8 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Invited: 1 results)

  • [Journal Article] mKast is dispensable for normal development and sexual maturation of the male European honeybee2018

    • Author(s)
      Kohno Hiroki、Kubo Takeo
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 8 Issue: 1 Pages: 11877-11877

    • DOI

      10.1038/s41598-018-30380-2

    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Kenyon Cell Subtypes/Populations in the Honeybee Mushroom Bodies: Possible Function Based on Their Gene Expression Profiles, Differentiation, Possible Evolution, and Application of Genome Editing2018

    • Author(s)
      Suenami Shota†、Oya Satoyo†、Kohno Hiroki†、Kubo Takeo (†: equal contribution.)
    • Journal Title

      Frontiers in Psychology

      Volume: 9 Pages: 1717-1717

    • DOI

      10.3389/fpsyg.2018.01717

    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Gene expression and immunohistochemical analyses of mKast suggest its late pupal and adult-specific functions in the honeybee brain2017

    • Author(s)
      Yamane Atsuhiro、Kohno Hiroki、Ikeda Tsubomi、Kaneko Kumi、Ugajin Atsushi、Fujita Toshiyuki、Kunieda Takekazu、Kubo Takeo
    • Journal Title

      PLOS ONE

      Volume: 12(5) Issue: 5 Pages: e0176809-e0176809

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0176809

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Increased complexity of mushroom body Kenyon cell subtypes in the brain is associated with behavioral evolution in hymenopteran insects2017

    • Author(s)
      Oya Satoyo、Kohno Hiroki、Kainoh Yooichi、Ono Masato、Kubo Takeo
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 7 Issue: 1 Pages: 13785-13785

    • DOI

      10.1038/s41598-017-14174-6

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] ミツバチにおけるゲノム編集法の開発:その先の眺望2017

    • Author(s)
      河野大輝、佐々木哲彦、久保健雄
    • Journal Title

      昆虫と自然

      Volume: 52(10) Pages: 36-39

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] Production of mKast mutatnt drones and heterozygote mutant workers by genome editing using CRISPR/Cas92018

    • Author(s)
      Hiroki Kohno, Takeo Kubo
    • Organizer
      International Union for the Study of Social Insects (IUSSI2018)
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Possible roles and evolution of Kenyon cell subtypes in the brains of hymenopteran insects2018

    • Author(s)
      Hiroki Kohno, Satoyo Oya, Takeo Kubo
    • Organizer
      2018 ESA, ESC, and ESBC Joint Annual Meeting (Entomology 2018)
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Analysis of the physiologic function of mKast using the knocked-out male European honeybees2018

    • Author(s)
      Hiroki Kohno, Takeo Kubo
    • Organizer
      日本比較生理生化学会第40回神戸大会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] ノックアウト雄蜂を用いたmKast生理機能の探索2018

    • Author(s)
      河野大輝、久保健雄
    • Organizer
      日本動物学会第89回札幌大会 (代替行事)
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] Development of essential techniques of CRISPR/Cas9 in the honeybee toward functional analysis of genes in honeybee social behaviors.2017

    • Author(s)
      Hiroki Kohno, Shota Suenami, Hideaki Takeuchi, Tetsuhiko Sasaki, Takeo Kubo
    • Organizer
      第17回東京大学生命科学シンポジウム
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] ミツバチにおける遺伝子操作法の開発による遺伝子機能解析の試み2017

    • Author(s)
      河野大輝, 久保健雄
    • Organizer
      日本動物学会第88回富山大会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] Development of gene manipulation methods towards functional analysis of genes in the honeybee2017

    • Author(s)
      Hiroki Kohno, Takeo Kubo
    • Organizer
      日本比較生理生化学会第39回大会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] ミツバチにおける遺伝子操作法の開発による遺伝子機能解析の試み2017

    • Author(s)
      河野大輝, 久保健雄
    • Organizer
      2017年度生物科学系学会合同年次大会(ConBio2017)
    • Related Report
      2017 Annual Research Report

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Published: 2017-05-25   Modified: 2024-03-26  

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