| Project/Area Number |
19K24078
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
0907:Oral science and related fields
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| Research Institution | Health Sciences University of Hokkaido |
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Principal Investigator |
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| Project Period (FY) |
2019-08-30 – 2021-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2020)
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| Budget Amount *help |
¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2020: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000)
Fiscal Year 2019: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
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| Keywords | 血液脳関門 / LPS / 歯周病 / p. gingivalis / P. gingivalis由来LPS / アルツハイマー |
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| Outline of Research at the Start |
初年度は、脳の血液脳関門構成細胞であるヒト脳毛細血管内皮細胞、アストロサイト、ペリサイトの長期培養を行い、歯周病原菌P. gingivalis由来内毒素であるLipopolysaccharide（LPS）の影響および、BBBの3次元構成モデルであるBBB透過性検定キットを用いてLPS透過性の検討を行う。
次年度は、アルツハイマー病モデルマウスに対して歯周病を誘発させ、脳海馬へのLPS到達能の検討をLPS測定キットを用いて行う。また、前年度に同定された遺伝子についてqPCRによるmRNAの発現変化の検討、および免疫組織化学染色によるタンパク発現変化の検討を行う。
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| Outline of Final Research Achievements |
It has been suggested that periodontal disease may have a role in pathogenesis of Alzheimer's disease. In this study, we investigated the effect of Porphyromonas gingivalis, one of the periodontal pathogens, on the blood-brain barrier. Human Brain Microvascular Endothelial cells were cultured in a vascular endothelial medium for 24 hours and P. gingivalis derived Lipopolysaccharide (LPS) was added to the cells at a concentration of 1.0 ug / ml, The tight junction related genes such as Claudin-1,-3,-5,-12, Occludin, ZO-1 and VE-cadherin were analyzed for changes in mRNA expression level using qRT-PCR. The results showed that the mRNA level of Claudin-5 was significantly downregulated in cells cultured with LPS as compared to control.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
脳には血液脳関門（BBB）があり、血液中から脳組織への物質の移行は厳密に制限されている。BBBは脳毛細血管内皮細胞が密接に結合し、その周囲に脳血管周皮細胞とペリサイトが存在する。これまで、この3種類のBBB構成細胞の機能についての研究は進められてきたが、歯周病原菌がBBB構成細胞にどのように影響するかについては仮説の域を出ていないのが現状である。そこで本研究では、LPSがBBBに対してどのような機序で障害を及ぼし、脳海馬へ影響するかについて検証する。これらの機序が明らかとなれば、P. gingivalisによるアルツハイマー病発症・進行の病態解明が大きく前進するものと考えられる。
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