| 研究課題/領域番号 |
02454519
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
血液内科学
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
丸山 征郎 鹿児島大学, 医学部, 助教授 (20082282)
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| 研究分担者 |
納 光弘 鹿児島大学, 医学部, 教授 (10041435)
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| 研究期間 (年度) |
1990 – 1991
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| 研究課題ステータス |
完了 (1991年度)
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| 配分額 *注記 |
2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
1991年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1990年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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| キーワード | トロンボモジュリン / 血管内皮細胞 / サイクリックAMP / プロスタサイクリン / thrombomodulin / TNF / ILーI / 動脈硬化 / 血栓症 / テラトカルチノ-マ |
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| 研究概要 |
培養臍帯静脈血管内皮細胞(HUVEC)とヒト巨核芽球性白血病細胞(MEG01)を用い、次のことを明らかにした。
1)HUVEC、MEG01ともに3〜5mMのdbcAMPに反応して、HUVECの場合は約250%、MEG01の場合は約600%thrombomodulinが増加した。
2)その他の細胞内cAMPを増加させる薬剤IBMX、forskolin、PGI_2でも同様の効果が観察された。
3)ILー1、TNFαでは、thrombomodulinは逆に50%減少した。
4)dbcAMP PGI_2はILー1、TNFによるTMのダウンレギュレ-ションを防止した。
5)thrombomodulin遺伝子の上流には、cAMP responsive elementは見いだし得なかった。
6)ヒトthrombomodulinのDNAをCHO細胞に組み替え、組み替え体のthrombomodulin(γーTM)を発現させてところ、いままで知られていた分子量サイズのthormbomodulin(MW:約750,000)の他に、高分子のthrombomodulin(MW:170,000)が発現した。ここで通常のものをtype1、高分子のものをtype2 TMと命名すると、組み替え体CHOの場合、type1/type2はほぼ1/1であった。
7)次にimmunoblot法で、HUVECにおけるtype1/type2の発現を調べた。通常の培養条件でも、HUVECにtype2が約5%発現していた。
8)HUVECを、cAMP、フォルボ-ルエステルで刺激すると約12時間後に、type2が約20%にまで増加した。
9)ヒトTMのcDNAをエレクトロフォレ-ション法でthrombomodulin非発現細胞にトランスフェクトすると、thrombomodulinが発現した。
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