研究課題/領域番号 |
02670266
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研究種目 |
一般研究(C)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
内科学一般
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研究機関 | 静岡大学 (1991) 東京大学 (1990) |
研究代表者 |
鈴木 修二 静岡大学, 保健管理センター, 教授 (30010151)
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研究期間 (年度) |
1990 – 1991
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研究課題ステータス |
完了 (1991年度)
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配分額 *注記 |
1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
1991年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
1990年度: 700千円 (直接経費: 700千円)
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キーワード | 浮遊粒子状物質 / 培養ヒト気道上皮細胞 / サイトカイン / GMーCSF / LPS / 気道過敏性 / 大気 / 気道 / ラット / ヒスタミン |
研究概要 |
(目的)大気中浮遊粒子状物質(Suspended Particulate Matter/SPM)の気道収縮性亢進作用および気道上皮細胞によるサイトカイン産生増強作用を調べた。 (材料および方法)1.2分間で1.1m^3の大気を吸引するエアサンプラ-を東京都文京区本郷の病院の屋上に設置して、SPMを採取した。2.気道収縮性への作用に関しては、in vivo→in vitro系を用いた。ラットに毎週一回、被験SPM液および対象液を経鼻的に吸入させ、3カ月後に、その気管を取りだして、ヒスタミン(Hi)に対する反応性を調べた。3.気道上皮細胞によるサイトカイン産生に関しては、in vitroの実験を行った。肺葉切除時に得られたヒト健常気管支片を0.1%プロテア-ゼ溶液中で4℃で18時間処理の後、軽く振って上皮細胞を剥がしコラ-ゲンをコ-トした24穴のプレ-トに5×10^4/wellの密度で蒔き、ホルモン添加無血清培養液(Ham's F12 medium)中で培養。培養細胞が単層、均一になった時点で、LPSあるいは2.5μg/mlから2.5mg/mlまでのSPMを加え、48時間後の培養上清を採取した。上清中GMーCSF活性は市販のELISAキット(Genzyme社)を用いて測定した。また、ヒト気道上皮細胞の別のソ-スとして、adenovirusー12とSVー40のhybrid virusでtransformした細胞株であるBEASー2Bを用いて同様の実験を行った。 (結果)1.SPMは、μgのオ-ダ-でも、ラットの気道をHiに反応するようにし、アナフィラキシ-性収縮後のHiに対する反応を亢進した。2.1)ヒト正常気道上皮細胞は無血清培養条件下でGMーCSFを産生した。2)LPSはGMーCSF産生を増強させた。3)SPMはヒト正常気道上皮細胞からのGMーCSF産生を用量依存的に増強させた。4)SPMはヒト気道上皮細胞株BEASー2Bについても同様にGMーCSF産生を増強させた。
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