| 研究課題/領域番号 |
03557037
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| 研究種目 |
試験研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
神経内科学
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
湯浅 龍彦 (1993) 東京医科歯科大学, 医学部・神経内科学講座, 助教授 (10115090)
宮武 正 (1991-1992) 東京医科歯科大学, 神経内科, 教授 (50048998)
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| 研究分担者 |
勝木 元也 九州大学, 生体防御医学研究所・細胞化学部門, 教授 (20051732)
内田 洋子 東京都老人総合研究所, 神経病理, 研究員 (60133633)
井原 康夫 東京大学, 医学部・脳研究所・神経病理学, 教授 (60114386)
辻 省次 新潟大学, 脳研究所・神経内科学, 教授 (70150612)
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| 研究期間 (年度) |
1991 – 1993
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| 研究課題ステータス |
完了 (1993年度)
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| 配分額 *注記 |
17,200千円 (直接経費: 17,200千円)
1993年度: 3,300千円 (直接経費: 3,300千円)
1992年度: 4,400千円 (直接経費: 4,400千円)
1991年度: 9,500千円 (直接経費: 9,500千円)
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| キーワード | アルツハイマー病 / 神経成長抑制因子(GIF) / メタロチオネイン / 金属反応部位 / ジーン・ターゲティング / 老年痴呆 / 遺伝学 / cDNAクロ-ニング / ゲノム / 神経成長抑制因子 / 神経成長因子 / gene targetting |
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| 研究概要 |
アルツハイマー病にて低下するとされる神経成長抑制因子(GIF)について、GIF発現低下のメカニズムを明らかにする目的でヒト脳cDNAライブラリーより、全長のcDNA(396塩基対)を単離することに成功した。更に、このcDNAをプローブとしてゲノムライブラリーをスクリーニングし、ヒトGIFの遺伝子構造を解析した。更にマウス及びラットのGIF遺伝子をクローニングした。GIF遺伝子は3個のエクソンを含有し、全長約1キロベースの小さな遺伝子であり、アミノ酸翻訳部位はメタロチオネイン属と高い相同性を有していた。プロモーターには、メタロチオネインに存在する金属反応部位(MRE)と同様の配列が認められた。GIFもメタロチオネイン同様、金属で発現が誘導されるか否かを検索するため、マウスのアストロサイト初代培養に銅を作用させたところ、GIFの発現はmRNAレベルでの上昇を認めた。更に、ある種のサイトカインにても発現が誘導されることが明らかになった。また、GIFの組織分布をラットを用い検討したところ、GIFは中枢神経、特にアストロサイト特異的に発現していることが明らかになった。アルツハイマー病にて、GIFの発現を検索するため、ヒトGIFcDNAをプローブとして、ノーザンブロット解析を行った結果、アルツハイマー病脳ではmRNAの発現が低下していることが判明した。このアルツハイマー病でのGIF発現低下の機序を解明するために、GIF遺伝子のターゲティングを試みた。マウスGIF遺伝子のエクソン1を欠失させ、同部位にNe耐性遺伝子を挿入し、遺伝子本体と6キロベースの相同部位を持つターゲティングベクターを構築した。現在、マウス胚性幹細胞にこのベクターを導入し、GIF遺伝子欠失マウスを作製中である。
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