| 研究概要 |
新鮮鶏卵卵白中の濃厚卵白より粗オボムチンを得,さらに常法に従って高シアロ糖蛋白質(HSGT)を分画した。この蛋白質は卵白中に不溶型β-アボムチンとして存在し,易熱性で400KDという分子量を有していた。このHSGTをトリプシン処理して高シアロ糖ペプタイド(HSGPE)を分画した。これらの物質をin Uitroにおいて腫瘍細胞に培地中に添加することによって,細胞膜表面のマイクロビリに著明な変性を与えることをまず確認した。この作用機序については,腫瘍細胞の膜表面だけに作用しているのか,あるいはDNA合成にも影響をおよぼしているのか明白でなかった。6^<-3>Hチミジン(^3H-TdR)を用いて,細胞内の取り込みによるHSGT,あるいはHSGPE添加後の腫瘍細胞のDNA合成能を測定した。腫瘍細胞にはHepatomacell, ^3LLcell, SR180cell, SEKIcell, IMR90cellを用い,細胞数は10^4〜10^5個/2mlとした。これらの各種腫瘍細胞において,^3H-TdRの取り込みはHSGTの添加群では15〜40%の減少が認められた。腫瘍細胞によってその減少度に差があったが,これはHSGTに対する感受性が細胞によって異なっていることによると推論した。一方,正常体細胞はHSGT投与によってほとんど影響を受けなかった。以上のことから,HSGTは腫瘍細胞の膜表面だけに作用するだけでなく,核内のDNA合成能も阻害することによって細胞増殖活性を低下させるものと明らかにした。HSGPEはHSGTよりも弱いながらも同様の活性を有すると結論した。なお,HSGTとHSGPEの化学的・物理的性質について解析し,上記生物機能発現には糖鎖のみならず,ペプタイド部分も必要であると示した。平成3〜4年度科学研究費補助金にて購入した高速冷却遠心機,分光光度計とペンレコーダーは,試料の調製,細胞の数と濁度の測定,およびその記緑に有効利用した。
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