肝細胞癌のエンドセリン産生と増殖

• 研究課題/領域番号: 05454324
• 研究種目: 一般研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 内分泌・代謝学
• 研究機関: 帝京大学
• 研究代表者: 石橋 みゆき 帝京大学, 医学部, 教授 (50134599)
• 研究分担者: 住永 雅司 帝京大学, 医学部, 助手 (30163059)
• 研究期間 (年度): 1993 – 1994
• 研究課題ステータス: 完了 (1994年度)
• 配分額: 6,100千円 (直接経費: 6,100千円); 1994年度: 2,700千円 (直接経費: 2,700千円); 1993年度: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円)
• キーワード: エンドセリン / 肝細胞癌 / エンドセリン産生腫瘍 / 肝細胞癌の増殖 / 成長因子 / エンドセリン受容体 / 肝細胞の増殖

研究概要

エンドセリン-1(ET-1)が肝細胞癌の成長因子であるという仮説を証明するため,ヒト肝細胞癌株細胞を対象に次の検討を行った。Northern blot-tingを行うと,少なくとも複数の肝細胞癌株細胞にpreproET-1のmRNAが証明された。ET-1モノクローナル抗体による免疫組織化学では,いずれの細胞株にET-1の免疫活性が認められ,正常肝細胞と明らかな差異を示した。培養細胞抽出液及び培養液を特異的なEIAで測定した結果,いずれの細胞株でもET-1が産生・分泌されていることが明らかになった。肝細胞癌の増殖に及ぼすET-1の作用を知るため,肝細胞癌株細胞(Mahlavu,Alexander)の増殖能をclonogenic assayで調べると,ET-1の添加が用量依存的に増殖を促進すること,ET-1受容体拮抗薬やET-1に対するモノクローナル抗体がその作用をブロックするばかりでなく,単独で肝細胞癌の増殖も抑制することを明らかにした。次に,ヒトET_AおよびET_B受容体のプローブを用いたnorthern blottingを行うと,少なくとも2つの肝細胞癌株(Mahlave,Hep G2)にET_B受容体mRNAが検出された。一方,ET_A受容体の発現はいずれの肝細胞癌株にも認められなかった。遊離肝細胞癌株細胞と^<125>I標識ET-1との結合実験では,Huh-7には高親和性(Kd=2.7 x10^<-10>M)のET-1結合部位が存在することが明らかになった。ET-1拮抗薬の肝細胞癌増殖抑制効果を調べるため,肝細胞癌株(Huh-7,Mahlave)をヌードマウスに移植し,実験群はET-1拮抗薬bosentanを混じた飼料で飼育した。Bosentan(10mg/kg/日)は肝細胞癌の増殖を明らかに抑制し,効果は投与開始後既に4日目で認められ,実験終了時まで存続した。実験終了時に秤量した実験群の腫瘍重量も対照群に比べて有意の低値を示した。以上の成績から,(1)ヒトの肝細胞癌はET-1を産生・分泌している,(2)ヒトの肝細胞癌にはET_B受容体が存在し,その増殖はET-1に依存している,(3)ET-1拮抗薬は肝細胞癌増殖を抑制することから治療薬として有望であることが結論された。

研究成果

• [文献書誌] Yamaji T,Johshita H,Ishibashi M,Takaku F,Ohno H,Suzuki N,Matsumoto H,Fujino M: "Endothelin family in human plasma and cerebrospinal fluid." J Clin Endocrinol Metab. 71. 1611-1615 (1990)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Kamoi K,Sudo N,Ishibashi M,Yamaji T: "Plasma endothelin-1 levels in patients with preqnancy-induced hypertension." N Engl J Med. 323. 1486-1487 (1990)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Saito K,Watanabe K,Uesugi S,Furue H,Yamaji T :"Plasma endothelin-1 levels in patients with disseminated intravascular coagulation." N Engl J Med. 324. 1516-1517 (1991)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Kamoi K,Ishibashi M,Yamaji T: "Plasma endothelin-1 levels in patients with hyponatremia." Nephron. 62. 469-470 (1992)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Haizuka H,Tsukamura T,Furue H,Yamaji T :"Endothelin-1 and Blood Pressure." Am J Hypert. 5. 772-774 (1992)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Fujita M,Nagai K,Kako K,Furue H,Haku E,Osamura Y,Yamaji T: "Production and secretion of endothelin by hepatocellular carcinama." J Clin Endocrinol Metab. 76. 378-383 (1993)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Sudo N,Kamoi K,Ishibashi M,Yamaji T: "Plasma endothelin-1 and big endothelin-1 levels in women with pre-eclampsia." Acta Endocrinol. 129. 114-120 (1993)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Kamoi K,Ishibashi M,Yamaji T: "Endothelin-1 and big endothelin-1 in NIDDM patients with and without microangiopathy." Diabetes Res Clin Pract. 284. 125-129 (1994)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Ito N,Fujita M,Furue H,Yamaji T: "Endothelin-1 as an aggravating factor of disseminated intravascular coagulation associated with malignant neoplasms." Cancer. 73. 191-195 (1994)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Fujisawa M,Furue H,Maeda Y,Fukayama M,Yamaji T: "Inhibition of growth of human small cell lung cancer by bromocriptine." Cancer Res. 54. 3442-3446 (1994)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] 石橋みゆき,古江 尚,大西 真,三浦英明,藤沢道夫,岡 輝明,山路 徹: "成長因子としてのエンドセリン." 成長科学協会研究年報. 17. 343-354 (1994)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Yamaji T,Johshita H,Ishibashi M,Takaku F,Ohno H,Suzuki N,Matsumoto H,Fujino M: "Endothelin family in human plasma and cerebrospinal fluid." J Clin Endocrinol Metab. 71. 1611-1615 (1990)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kamoi K,Sudo N,Ishibashi M,Yamaji T: "Plasma endothelin-1 levels in patients with pregnancy-induced hypertension." N Eng1 J Med. 323. 1486-1487 (1990)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Saito K,Watanabe K,Uesugi S,Furue H,Yamaji T: "Plasma endothelin-1 levels in patients with disseminated intravascular coagulation." N Eng1 J Med. 324. 1516-1517 (1991)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kamoi K,Ishibashi M,Yamaji T: "Plasma endothelin-1 levels in patients with hyponatremia." Nephron. 62. 469-470 (1992)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Haizuka H,Tsukamura T,Furue H,Yamaji T: "Endothelin-1 and Blood Pressure." Am J Hypert. 5. 772-774 (1992)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Fujita M,Nagai K,Kako K,Furue H,Kaku E,Osamura Y,Yamaji T: "Production and secretion of endothelin by hepatocellular carcinoma." J Clin Endocrinol Metab. 76. 378-383 (1993)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Sudo N,Kamoi K,Ishibashi M,Yamaji T: "Plasma endothelin-1 and big endothelin-1 levels in women with pre-eclampsia." Acta Endocrinol. 129. 114-120 (1993)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kamoi K,Ishibashi M,Yamaji T: "Endothelin-1 and big endothelin-1 in NIDDM patients with and without microangiopathy." Diabetes Res Clin Pract. 284. 125-129 (1994)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Ito N,Fujita M,Furue H,Yamaji T: "Endothelin-1 as an aggravating factor of disseminated intravascular coagulation associated with malignant neoplasms." Cancer. 73. 191-195 (1994)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Fujisawa M,Furue H,Maeda Y,Fukayama M,Yamaji T: "Inhibition of growth of human small cell lung cancer by bromocriptine" Cancer Res. 54. 3442-3446 (1994)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Ishibashi M,Ito N,Fujita M,Furue H,Yamaji T: "Endothelin-1 as an aggravating factor of disseminated intravascular coagulation associated with malignant neoplasms." Cancer. 73. 191-195 (1994)
• [文献書誌] Ishibashi M,Fujisawa M,Furue H,Maeda Y,Fukayama M,Yamaji T: "Inhibition of growth of human small cell lung cancer by bromocriptine." Cancer Res. 54. 3442-3446 (1994)
• [文献書誌] Kamoi K,Ishibashi M,Yamaji T: "Endothelin-1 and big endothelin-1 in NIDDM patients with and without microangiopathy." Diabetes Res Clin Pract. 24. 125-129 (1994)
• [文献書誌] 宮川浩,輿石剛,中村尚志,阿部和裕,永井孝三,石橋みゆき,賀古眞,古江尚: "インターフェロン投与中,自己免疫性甲状腺機能低下症をきたしたC型慢性肝炎の一例." 総合臨床. 43. 205-208 (1994)
• [文献書誌] 石橋みゆき,古江尚,大西真,三浦英明,藤沢道夫,岡輝明,山路徹: "成長因子としてのエンドセリン." 成長科学協会 研究年報 平成5年度. 17. 343-354 (1994)
• [文献書誌] 石橋みゆき(分担執筆): "今日の治療指針 1994(無月経・乳汁分泌症候群.pp.524-525)" 日野原重明,阿部正和(監修)医学書院, 1298 (1994)
• [文献書誌] 石橋みゆき(分担執筆): "内科治療ガイド'94(カルチノイド.pp.1036-1038)" Medical Practice編集委員会編,分光堂, 1508 (1994)
• [文献書誌] Ishibashi M,Ito N,Fujita M,Furue H,Yamaji T: "Endothelin-1 as an aggravating factor of disseminated intravascular coagulation associated with malignant neoplasms." Cancer. 73. 191-195 (1994)
• [文献書誌] Ishibashi M,et al.: "Production and secretion of endothelin by hepatocellular carcinoma." J Clin Endocrinol Metab. 76. 378-383 (1993)
• [文献書誌] Ishibashi M,Shimada K,Abe K,Furue H,Yamaji T: "Spontaneous remission in Cushing′s disease." Arch Intern Med. 153. 251-255 (1993)
• [文献書誌] Sudo N,Kamoi K,Ishibashi M,Yamaji T: "Plasma endothelin-1 and big endothelin-1 levels in women with pre-eclampsia." Acta Endocrinol. 129. 114-120 (1993)
• [文献書誌] Kamoi K,Tamura T,Tanaka K,Ishibashi M,Yamaji T: "Hyponatremia and osmoredgulation of thirst and vasopressin secretion in patients with adrenal insufficiency." J Clin Endocrinol Metab. 77. 1584-1588 (1993)
• [文献書誌] 宮川浩,輿石剛,中村尚志,阿部和裕,永井孝三,石橋みゆき,賀古眞,古江尚: "インターフェロン投与中,自己免疫性甲状腺機能低下症をきたしたC型慢性肝炎の一例" 総合臨床. 43. 205-208 (1994)
• [文献書誌] 石橋みゆき(分担執筆): "Annual Review 内分泌,代謝1993(成長ホルモン.p.166-174)" 岡博,永田直一,金澤康徳,柳沼〓(編),中外医学社, 284 (1993)
• [文献書誌] 石橋みゆき(分担執筆): "今日の治療指針1993(カルチノイド.p.535)" 日野原重明,阿部正和(監修),医学書院, 1304 (1993)