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リソソーム形成における膜識別と融合に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 06454678
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 細胞生物学
研究機関九州大学

研究代表者

姫野 勝  九州大学, 薬学部, 教授 (50037602)

研究分担者 石川 豊子  九州大学, 薬学部, 助手 (50201314)
田中 嘉孝  九州大学, 薬学部, 助手 (20217095)
研究期間 (年度) 1994 – 1995
研究課題ステータス 完了 (1995年度)
配分額 *注記
6,600千円 (直接経費: 6,600千円)
1995年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1994年度: 5,600千円 (直接経費: 5,600千円)
キーワードリソソーム / エンドソーム / ソーティング・シグナル / 融合 / N-エチルマレイミド感受性因子
研究概要

リソソーム膜タンパク質のリソソームターゲティングについて
リソソーム膜タンパク質のリソソームへの局在化機構に関する研究は、リソソーム膜の主たる構成成分であるIgp-Aグループに属するタンパク質が中心に行なわれ、その細胞質領域に含まれるgly-tyr配列(GY-motif)がリソソーム局在化に必要かつ充分なシグナルであることが報告されている。今回は、Igp-Bグループに属するラット肝リソソーム膜の主要構成成分の一つであるLGP96についてリソソーム局在化の詳細な検討を行なった。10個のアミノ酸から成る細胞質領域(-KRHHTGYEQF)に様々な変異を導入したLGP96のcDNAをCOS細胞に一過性に発現させその細胞内分布を共焦点レーザー顕微鏡を用いて観察した。その結果、1)C末端から8アミノ酸を欠失させた変異体は大部分が細胞膜に存在した。2)GY-motifのG→A変異体は野性型と同様のリソソーム様の分布を示したが、Y→A変異体は細胞膜に分布した。3)さらに、C末端のF→AおよびF→T変異体は一部細胞内にも存在するもののかなりの量が細胞膜に分布した。これらの結果より、LGP96がリソソーム様顆粒に局在化するためにはその細胞質領域のGY-motifに加え、C末端のFも効率良い局在化に必要であることが明かとなった。
リソソームとエンドソームのin vitroでの融合について
エンドソームとエンドソームのインビトロでの融合はすでに報告されているがエンドソームとリソソームのインビトロでの融合実験の報告は成されていない。そこで、エンドソームとリソソームののインビトロでの融合を検討し、次の様な事実を明らかにした。
1)両顆粒の融合には細胞質とATPが必要であった。2)エンドソームとエンドソームの融合を阻害するGTPgSでは両顆粒の融合は阻害されなかったのでこの融合にはGTP結合タンパク質は関与していない。3)エンドソームの表在性タンパク質がエンドソームとリソソームの融合に関与している。4)エンドソーム間の融合を阻害するNSFに対するモノクローナル抗体はエンドソームとリソソームの融合を阻害しなかった。このことは、エンドソームとエンドソームの融合に関与するファクターとエンドソームとリソソームの融合に関与するファクターが異なることを示唆している。さらに、このことはエンドソーム表在性タンパク質でリソソームとの融合に関与し、NSFとは異なるN-ethylmaleimide感受性因子の存在を示唆している。

報告書

(3件)
  • 1995 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1994 実績報告書
  • 研究成果

    (23件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (23件)

  • [文献書誌] Y. Konishi: "Insulin-like growth factor II promotes in Vitro cholinergic development of mouse septal neurons: comparison with the effects of insulin-like growth factor 1." Brain Research. 649. 53-61 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K. Goto: "Localization of cathepsin B, D, and L in the rat osteoclast by immuno-light and-electron microscopy." Histochemistry. 101. 33-40 (1994)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T. Kiyoshima: "Immunocytochemical localozation of cathepsin Lin the synovial lining calls of the rat temporomandibular joint." Archs oral Biol.39. 1049-1056 (1994)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y. Nakayama: "Microtubulle Reorganization and Lysosome Redistribution by a Viral v-src Oncogene, in Mouse Balb/3T3 Cells Expressing Human EGF-Receptor." Cell Struct. Funct.19. 397-409 (1994)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S. Yokota: "Formation of autophagosomes during degradation of excess peroxisomes induced by di- (2-ethylhexyl) -phthalate treatment. III. Fusion of early autophagosomes with lysosomal compartments." Eur. J. Cell Biol.66. 15-24 (1995)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y. Nishimura: "Expression of Rat Cathepsin D cDNA in Saccharomyces cereviriae : Implications for Intracellular Targething of Cathepsin D to Vacuoles." J. Biochem.118. 168-177 (1995)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Konishi: "Insulin-like growth factor II promotes in vitro cholinergic development of mouse septal neurons : comparison with the effects of insulin-like growth factor 1." Brain Research. 646. 53-61 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Goto: "Localization of cathepsin B,D,and L in the rat osteoclast by immuno-light and-electron microscopy." Histochemistry. 101. 33-40 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kiyoshima: "Immunocytochemical localization of cathepsin L in the synovial lining cells of the rat temporomandibular joint." Archs Oral Biol.39. 1049-1056 (1994)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Nakayama: "Microtubulle Reorganization and Lysosome Redistribution by a Viral v-src Oncogene, in Mouse Balb/3T3 cells Expressiong Human EGF Receptor." Cell Struct.Funct.19. 397-409 (1994)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Yokota: "Formation of autophagosomes during degradation of excess peroxisomes induced by di- (2-ethylhexyl) -phthalate treatment. III.Fusion of early autophagosomes with lysosomal compartments." Eur.J.Cell Biol.66. 15-24 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Nishimura: "Expression of Rat Cathepsin D cDNA in Saccharomyces cerevisiae : lmplication for lntracellular Targeting of Cathepsin D to Vacuoles." J.Biochem. 118. 168-177 (1995)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1995 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y. Konishi: "Insulin-like growth factor II promotes in vitro cholinergic development of mouse septal neurons: comparison with the effects of insulin-like growth factor I." Brain Research. 649. 53-61 (1994)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] K. Goto: "Localization of cathepsin B,D, and L in the rat osteoclast by immuno-light and -electron microscopy." Histochemistry. 101. 33-40 (1994)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] T. Kiyoshima: "Immunocytochemical localization of cathepsin L in the synovial lining calls of the rat temporomandibular joint." Archs oral Biol.39. 1049-1056 (1994)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Y. Nakayama: "Microtubulle Reorganization and Lysosome Redistribution by a Viral v-src Oncogene, in Mouse Balb/3T3 Cells Expressing Human EGF Receptor." Cell Struct. Funct.19. 397-409 (1994)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] S. Yokota: "Formation of autophagosomes during degradation of excessperoxisomes induced by di-(2-ethylhexyl)-phthalate treatment. III. Fusion of early autophagosomes with lysosomal compartments." Eur. J. Cell Biol.66. 15-24 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Y. Nishimura: "Expression of Rat Cathepsin D cDNA in Saccharomyces cerevisiae: Implications for Intracellular Targething of Cathepsin D to Vacuoles." J. Biochem.118. 168-177 (1995)

    • 関連する報告書
      1995 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Konishi: "Insulin-like growth factor II promotse in vitro cholinergic development of mouse septal neurons:comparison with the effects of insulin-like growth factor I." Brain Research. 649. 53-61 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] K.Goto: "Localization of cathepsin B,D,and L in the rat osteoclast by immuno-light and-electron microscopy." Histochemistry. 101. 33-40 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] T.Kiyoshima: "Immunocytochemical localization of cathepsin L in the synovial lining cells of the rat temporomandibular joint." Archs oral Biol.39. 1049-1056 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Nakayama: "Microtubule Reorganization and Lysosome Redistribution by a Viral v-src Oncogene,in MouseBalb/3T3 Cells Expressing Human EGF Receptor." Cell Struct.Funct.19. 397-409 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書
  • [文献書誌] 姫野 勝: "リソソーム膜タンパク質の一次構造とターゲッティングシグナル." 生化学. 66. 1203-1218 (1994)

    • 関連する報告書
      1994 実績報告書

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公開日: 1994-04-01   更新日: 2016-04-21  

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