| 研究課題/領域番号 |
09044234
|
|---|
| 研究種目 |
基盤研究(B)
|
| 配分区分 | 補助金 |
|---|
| 応募区分 | 一般 |
|---|
| 研究分野 |
細胞生物学
|
|---|
| 研究機関 | 横浜市立大学 |
|---|
研究代表者 |
鮎沢 大 横浜市立大学, 木原生物研究所, 教授 (00142109)
|
|---|
| 研究分担者 |
鈴木 敏和 横浜市立大学, 木原生物研究所, 助手 (70270527)
藤井 道彦 横浜市立大学, 木原生物研究所, 助手 (80285155)
SCHERER Step トロント小児病院, 遺伝部, 研究員
TUSI Lap Che トロント大学, 医学部, 教授
SCHERER Ste トロント小児病院, 遺伝部, 研究員
TSUI Lap Che トロント大学, 医学部, 教授
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
1997 – 1999
|
| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
|
| 配分額 *注記 |
4,500千円 (直接経費: 4,500千円)
1999年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1998年度: 1,500千円 (直接経費: 1,500千円)
1997年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
|
|---|
| キーワード | TARベクター / 不死化抑制遺伝子 / テロメア / テロメラーゼ / 7番染色体 / BAC / YAC / 染色体の移入 / 細胞老化 / 細胞不死化 / 遺伝子 |
|---|
| 研究概要 |
酵母TAR(transformation associated recombination)YAC/BACを用いて、マウス放射線雑種細胞S10-3-2(ヒトDNAを2-3Mb含む)からヒトDNAを300個のBACクローンとして回収した。YACクローンを大腸菌内でBACに変更し、不死化細胞株Met5Aへの遺伝子導入によって、その分裂を停止するBACクローンを数個単離した。しかし、分裂停止という負の選択では、目的遺伝子以外でも分裂停止を誘導することが起こることが判明し、BACクローンの解析はまだ完了していない。一方、ヒト7番染色体を移入し、分裂が停止したMet5A細胞クローンから多数のリバータントを分離した。これらリバータントについてSTSマーカーを用いたPCR解析を行い、移入されたヒト7番染色体上の欠失部位のマッピングを行った。共通の欠失部位が存在すれば、そこに目的遺伝子が乗っていることが示唆されるが、そのような領域はまだ特定されていない。一方、7番染色体は、D群不死化細胞のテロメラーゼの制御およびテロメアの短縮を誘導することを示した。7番染色体はテロメラーゼ活性をもたない不死化細胞株のテロメア短縮も誘導するので、細胞老化の誘導を介してテロメア維持機構を負に制御することが示唆された。
|
