| 研究課題/領域番号 |
09470379
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
眼科学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
井上 幸次 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (10213183)
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| 研究分担者 |
林 皓三郎 神戸市環境保健研究所, 所長 (20012726)
永江 康信 大阪大学, 医学部, 助手 (20263288)
下村 嘉一 大阪大学, 医学部, 助教授 (20162737)
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| 研究期間 (年度) |
1997 – 1999
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| 研究課題ステータス |
完了 (1999年度)
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| 配分額 *注記 |
2,400千円 (直接経費: 2,400千円)
1999年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
1998年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
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| キーワード | 角膜ヘルペス / T細胞 / 単純ヘルペスウイルス / サイトカイン / DNAワクチン / glycoprotein D / Th1細胞 / Th2細胞 / 単純ヘルペスウィルス / インターフェロンα / インターロイキン-4 / インターフェロンγ / インターロイキン4 |
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| 研究概要 |
1.herpes simplex virus(HSV)によるヒト好中球化学走性について
ヒト角膜実質細胞・SV-40不死化ヒト角膜上皮細胞・ヒト好中球・Boiden dhamberを用いたin vitroの系で、HSV感染によって角膜上皮細胞・実質細胞よりIL-8が産生され、好中球に対してchemotaxisを生じることを見出した。
2.HSV抗原刺激に対する角膜ヘルペス患者末梢血T細胞の反応性
(1)ヒト末梢血単核球をT細胞と抗原提示細胞に分け、抗原提示細胞に紫外線不活化ウイルスをかけた後γ線照射したものをT細胞と再び共生培養することによってT細胞より産生されるサイトカインをELISAにて測定する系を確立した。
(2)この系にて角膜ヘルペス患者T細胞はTh1サイトカインであるIFNγ・IL-2を産生したが、Th2サイトカインであるIL-10の産生はわずかであり、IL-4の産生は認められなかった。
(3)角膜ヘルペスの病態とサイトカイン産生の関係について検索したところ過去1年間に実質型の再発を認める患者においては認めない患者と比較してTh1サイトカインが高値を示し、Th2サイトカインとの比(IFNγ/IL-10・IL-2/IL-10)が有意に高かった。
3.マウス角膜ヘルペスモデルを用いたヘルペスワクチンの検討
ヘルペスワクチンによる免疫療法の可能性をさぐるためHSV膜蛋白のglycoprotein D(gD)とヒトIL-2のキメラ蛋白を作製し、マウス角膜ヘルペス初感染モデルにて以下の結果を得た。
(1)gD-IL2蛋白の全身・局所(結膜下)投与にて実質型角膜ヘルペスへの進展が阻止された。
(2)gD-IL2DNA結膜下投与にてHSVに対する液性・細胞性免疫が惹起された。
(3)gD-IL2DNA結膜下投与にて実質型角膜ヘルペスへの進展が阻止された。
(4)gD-IL2DNA結膜下投与にて眼球・三叉神経節・脳でのウイルス増殖が抑制された。
4.マウス角膜ヘルペスモデルにおけるサイトカインなどの免疫組織学的検討
マウス角膜ヘルペス初感染モデルににて角膜・局所リンパ節における各種サイトカイン・接着分子・浸潤細胞・組織適合抗原の局在を免疫組織化学的に解析し、Th1サイトカインの反応・γδ-T細胞の浸潤などを確かめた。
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