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コンポジット生体触媒の構築と機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 13125203
研究種目

特定領域研究

配分区分補助金
審査区分 理工系
研究機関京都大学

研究代表者

江崎 信芳  京都大学, 化学研究所, 教授 (50135597)

研究分担者 平竹 潤  京都大学, 化学研究所, 助教授 (80199075)
藤井 郁雄  大阪府立大学, 先端科学研究所, 教授 (70189984)
吉村 徹  名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 教授 (70182821)
藤井 郁夫  生物分子工学研究所, 機能創製プロジェクト部門, 部長
畑 安雄  京都大学, 化学研究所, 助教授 (10127277)
研究期間 (年度) 2001 – 2003
研究課題ステータス 完了 (2003年度)
配分額 *注記
79,700千円 (直接経費: 79,700千円)
2003年度: 12,400千円 (直接経費: 12,400千円)
2002年度: 12,400千円 (直接経費: 12,400千円)
2001年度: 54,900千円 (直接経費: 54,900千円)
キーワードコンポジット生体触媒 / 補酵素 / 構造活性相関 / ピリドキサルリン酸 / NADPH / 鉄硫黄クラスター / 不斉合成 / Suf / ジヒドロピリミジン / システインデスルフラーゼ / 鉄-硫黄クラスター / システインデルスフラーゼ / 抗体酵素
研究概要

コンポジット生体触媒の構成要素である鉄硫黄クラスターの形成機構の詳細を明らかにするとともに、新しいコンポジット生体触媒を開発し、種々の光学活性化合物の生産法を開発した。また、ピリドキサルリン酸を補酵素とするアミノ酸ラセミ化酵素など、コンポジット生体触媒の精密反応機構を解析した。主な研究成果は以下の通りである。
1.鉄硫黄クラスターを構成する硫黄原子は、システインデスルフラーゼが触媒するL-システインからの硫黄脱離反応によって供給される。Escherichia coliのシステインデスルフラーゼIscSとSufS、ラン藻Synechocystis sp.PCC6803のシステインデスルフラーゼSsCsd3が関与する鉄硫黄クラスター形成機構の詳細を解析した。特に、クラスター前駆体形成の足場と考えられるタンパク質と、各種システインデスルフラーゼの相互作用を解析した。
2.新奇NADPH酵素であるN-メチル-L-アミノ酸デヒドロゲナーゼを単離し、諸性質を明らかにするとともに、遺伝子をPseudomonas putida ATCC12633からクローニングして、高発現系を構築した。本酵素を用いて、医薬品、殺虫剤に含まれる光学活性N-メチル-L-アミノ酸をα-ケト酸とメチルアミンから合成するシステムを開発した。
3.ハロゲン化不飽和化合物の炭素-炭素二重結合を不斉還元する新奇NADPH酵素を単離して諸性質を明らかにし、世界で最大級の需要がある除草剤の一つ、フェノキシプロピオン酸系除草剤の合成前駆体L-2-クロロプロピオン酸の新しい不斉合成法を開発した。

報告書

(4件)
  • 2003 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 2002 実績報告書
  • 2001 実績報告書
  • 研究成果

    (123件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (123件)

  • [文献書誌] A.Watanabe et al.: "Stereochemistry of hydrogen abstraction from pyridoxamine phosphate catalyzed by alanine racemase of Bacillus stearothermophilus"J.Mol.Catal.B.Enzymatic. 12. 145-150 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Uo et al.: "Purification and characterization of alanine racemase from hepatopancreas of black-tiger prawn, Penaeus monodon"J.Mol.Catal.B : Enzymatic. 12. 137-144 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Uo et al.: "Functional characterization of alanine racemase from Schizosaccharomyces pombe : a eucaryotic counterpart to bacterial alanine racemase"J.Bacteriol.. 183. 2226-2233 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Suzuki et al.: "Cold-active lipolytic activity of psychrotrophic Acinetobacter sp. strain no.6"J.Biosci.Bioeng.. 92. 144-148 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Soda et al.: "Stereospecificity for the hydrogen transfer of pyridoxal enzyme reactions"The Chemical Record. 1. 373-384 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Kato et al.: "Screening and identification of a protein interacting with IscU"微量栄養素研究. 18. 105-109 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Kashiwa et al.: "Removal of soluble selenium by a selenate-reducing bacterium Bacillus sp. SF-1"BioFactors. 14. 261-265 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Mihara et al.: "Role of cysteine desulfurase in the biosynthesis of formate dehydrogenase H containing Mo, molybdopterin, selenocysteine, and Fe_4S_4 cluster"Biomed.Res.Trace.Elem.. 12. 261-262 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] A.Lewandowicz et al.: "Chlorine kinetic isotope effect on fluoroacetate dehalogenase reaction"J.Am.Chem.Soc.. 123. 9192-9193 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Yokoigawa et al.: "Structure and function of psychrophilic alanine racemase"J.Mot.Catal.B : enzymatic. 12. 27-35 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] A.Watanabe et al.: "Reaction mechanism of alanine racemase from Bacillus stearothermophilus : X-ray crystallographic studies of the enzyme bound with N-(5'-phosphopyridoxyl)-alanine"J.Biol.Chem.. 277. 19166-19172 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Uo et al.: "Gene cloning, purification and characterization of 2,3-diaminopropionate ammonia-lyase from Escherichia col"Biosci.Biotechnol.Biochem.. 66. 2639-2644 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] U.Tokumoto et al.: "Network of protein-protein interactions among iron-sulfur cluster assembly proteins in Eschrichia col"J.Biochem.. 131. 713-719 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Suzuki et al.: "A cold-active esterase with a substrate preference for vinyl esters from a psychrotroph, Acinetobacter sp.strain no.6 : gene cloning, purification, and characterization"J.Mol.Catal.B : Enzymatic. 16. 255-263 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Suzuki et al.: "Primary structure and catalytic properties of a cold-active esterase from a psychrotroph, Acinetobacter sp.strain no.6 isolated from Siberian soil"Biosci.Biotechnol.Biochem.. 66. 1682-1690 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Kato et al.: "Cys328 of IscS and Cys63 of IscU are the sites of disulfide bridge formation in a covalently-bound IscU/IscS complex : Implications for the mechanism of iron-sulfur cluster assembly"Proc.Natl.Acad.Sci.. 99. 5948-5952 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] E.Pilon-Smits et al.: "Characterization of a NifS-like chloroplast protein from Arabidopsis. Implications for its role in sulfur and selenium metabolism"Plant Physiol.. 130. 1309-1318 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Bae et al.: "Application of a thermostable glutamate racemase from Bacillus sp. SK-1 for the production of D-phenylalanine in a multi-enzyme system"J Mol Catal B : Enzymatic. 17. 223-233 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Ichiyama et al.: "Catalysis-linked inactivation fluoroacetate dehalogenase by ammonia : A novel approach to the active-site environment"J.Biochem.. 131. 671-677 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.A.Muranova et al.: "Crystallization and preliminary X-ray analysis of substrate complexes of leucine dehydrogenase from Thermoactinomyces intermedius"Acta Cryst.. D58. 1059-1062 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Mihara, N.Esaki: "Bacterial cysteine desulfurases : their function and mechanisms"Appl.Microbiol.Biotechnol.. 60. 12-23 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Mihara, N.Esaki: "Selenocysteine lyase from mouse liver"Methods in Enzymology. 347. 198-203 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Mihara et al.: "The iscS gene is essential for the biosynthesis of 2-selenouridine in tRNA and the selenocysteine containing formate dehydrogenase H"Proc.Natl.Acad.Sci.. 99. 6679-6683 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Mihara et al.: "Structure of external aldimine of Escherichia coli CsdB, an IscS/NifS homolog implications for its specificity toward selenocysteine"J.Biochem.. 131. 679-685 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Yoshimune et al.: "Hsc62, Hsc56, and GrpE, the third Hsp70 chaperone system of E.coli"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 293. 1389-1395 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Kwak et al.: "Protein interaction between selenocysteine lyase and MUP-I"Biomedical Research on Trace Elements. 13. 238-239 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] E.Kuwana et al.: "Effects of selenium deficiency on the expression of selenoprotein mRNAs in mouse brain"BiOMEUICAL RESEARCH ON TRACE ELEMETS. 14. 293-296 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Wei et al.: "A novel esterase from a psychrotrophic bacterium, Acinetobacter sp. strain no.6, that belongs to the amidase signature family"J.Mol.Catal.B : Enzymatic. 23. 357-365 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kurihara et al.: "Purification, characterization, and gene cloning of a novel fluoroacetate dehalogenase from Burkholderia sp. FA1"J.Mol.Catal.B : Enzymatic. 23. 347-355 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kurihara et al.: "Assembly of iron-sulfur clusters mediated by cysteine desulfurases, IscS, CsdB and CSD, from Escherichia coil"Biochimica et Biophysica Acta. 1647. 303-309 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] L.Kulakova et al.: "Improvement of thermostability of cold-active serine alkaline protease from the psychrotrophic bacterium Shewanella sp.strain Ac10 by rational mutagenesis"Journal of Molecular Catalysis B : Enzymatic. 22. 113-117 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Suzuki et al.: "Cloning, heterologous expression, renaturation, and characterization of a cold-adapted esterase with unique primary structure from a psychrotroph Pseudomonas sp.strain B11-1"Protein Expression and Purification. 30. 171-178 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Kato et al.: "Purification and characterization of alanine dehydrogenase from a marine bacterium, Vibrio proteolyticus"J.Mol.Catal.B : Enzymatic. 23. 373-378 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Pilon et al.: "Enhanced selenium tolerance and accumulation in transgenic Arabidopsis expressing a mouse selenocysteine lyase"Plant Physiol.. 131. 1250-1257 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] C.Park et al.: "A new DL-2-haloacid dehalogenase acting on 2-holoacid amides : Purification, characterization, and mechanism"J.Mol.Catal.B : Enzymatic. 23. 329-336 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] A.Galkin et al.: "Cold-active enzymes from cold-adapted microorganisms : Their possible applications and structural relationships with mesophilic and thermophilic counterparts"Recent Advances in Marine Biotechnology. 8. 1-27 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] G.Yow et al.: "Conversion of the catalytic specificity of alanine racemase to a D-amino acid aminotransferase activity by a double active-site mutation"J.Mol.Catal.B : Enzymatic. 23. 311-319 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Yoshimura, N.Esaki: "Amino acid racemases : Functions and mechanisms"Journal of Bioscience and Bioengineering. 96. 103-109 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Li et al.: "Mass spectrometric analysis of the reactions catalyzed by L-2-haloacid dehalogenase mutants and implications for the roles of the catalytic amino acid residues"J.Mol.Catal.B : Enzymatic. 23. 337-345 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Fuchikami et al.: "D-Amino acid aminotransferase: Fragmentation at a flexible loop is an efficient metond to generate mutant enzymes with new substrate specificities and elevated activities"J.Mol.Catal.B : Enzymatic. 23. 321-328 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Kwak et al.: "A novel regulatory function of selenocysteine lyase, a unique catalyst to modulate major urinary protein"J.Mol.Catal.B : Enzymatic. 23. 367-372 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Yamamoto et al.: "A novel NADH-dependent carbonyl reductase from Kluyveromyces aestuarii and comparison of NADH-regeneration system for the synthesis of ethyl (S)-4-chloro-3-hydroxybutanoate"Biosci.Biotechnol.Biochem.. 68. 638-649 (2004)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] L.Kulakova et al.: "Cold-active esterase from Psychrobacter sp. Ant300: gene cloning, characterization and the effects of Gly->Pro substitution near the active site on its catalytic activity and stability"Biochimica et Biophysica Acta. 1696. 59-65 (2004)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Takakura et al.: "Assay method for antitumor L-methionine γ-lyase : comprehensive kinetic analysis of the complex reaction with L-methionine"Analytical Biochemistry. 327. 233-340 (2004)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Ichiyama et al.: "Reactivity of asparagine residue at the active site of the D105N mutant of fluoroacetate dehalogenase from Moraxella sp.B"Biochimica et Biophysica Acta. 1698. 27-36 (2004)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] W.Guo, J.Hiratake, K.Ogawa, M.Yamamoto, S.-J.Ma, K.Sakata: "β-Glycosylamidines : potent, selective, and easily accessible β-glycosidase inhibitors"Bioorg.Med.Chem.Lett.. 11. 467-470 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.K.Boehlein, T.Nakatsu, J.Hiratake, R.Thirumoorthy, J.D.Stewart, N.G.J.Richards, S.M.Schuster: "Characterization of inhibitors acting at the synthetase site of Escherichia coli asparagine synthetase B"Biochemistry. 40. 11168-11175 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 藤井亮太, 平竹 潤: "リパーゼの進化分子工学"酵素工学ニユース (Enzyme Engineering News). 46. 22-27 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.-J.Ma, J.Hiratake, Y.Nakai, M.Izumi, K.Fukase, S.Kusumoto, K.Sakata: "A direct continuous spectrophotometric assay for glycosidases with 3-nitro2-pyridyl glycosides by tautomerization of 2-hydroxy-3-nitropyridine"Anal.Biochem.. 302. 291-297 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Hiratake, M.Inoue, K.Sakata: "γ-Glutamyltranspeptidase and γ-glutamyl peptide ligases : Use of fluorophosphonate and phosphonodifluoromethyl ketone analogues as probes of the tetrahedral transition state and the γ-glutamyl-P intermediate"Methods in Enzymology. 354. 272-295 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Hiratake, T.Irie, N.Tokutake, J.Oda: "Recognition of a cysteine substrate by E.coli γ-glutamylcysteine synthetase probed by sulfoximine-based transition-state analogue inhibitors"Biosci.Biotechnol.Biochem.. 66. 1500-1514 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Hiratake: "Rational design and synthesis of enzyme inhibitors : Significance in probing the function of enzymes"J.of Synthetic Organic Chemistry, Special Issue in English. 60. 1095-1103 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] R.Fujii, Y.Utsunomiya, J.Hiratake, A.Sogabe, K.Sakata: "Highly sensitive active-site titration of lipase in microscale culture media using fluorescent organophosphorus ester"Biochim.Biophys.Acta (Molecular and Cell Biology of Lipids). 1631. 197-205 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Hiratake, K.Sakata: "Glycosylamidines as potent selective and easily accessible glycosidase inhibitors and their application to affinity chromatography"Methods in Enzymology. 363. 421-444 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Inoue, J.Hiratake, M.Mizutani, M.Takada, M.Yamamoto, K.Sakata: "β-Glycosylamidine as ligand for affinity chromatography tailored to glycon substrate specificity of β-glycosidases"Carbohydr.Res.. 338. 1477-1491 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 平竹 潤: "遷移状態アナログを用いて酵素の構造と機能をさぐる"生化学. 74. 38-42 (2002)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 平竹 潤, 坂田完三: "選択的β-グリコシダーゼ阻害剤の分子設計と応用"化学と生物. 40. 352-354 (2002)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 平竹 潤: "研究ツールとしてのグリコシダーゼ阻害剤-その設計と応用-"日本農芸化学会誌. 77. 409-412 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 平竹 潤, 坂田完三: "新規グリコシダーゼ阻害剤 β-グリコシルアミジン誘導体の開発ど応用"BIOINDUSTRY. 8. 44-51 (2003)

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  • [文献書誌] 江崎信芳 他: "生化学基礎の基礎"化学同人. 326 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] N.Esaki et al.: "Isomerizations. Enzyme Catalysis in Organic Synthesis second edition (Edited by K Drauz and H.Waldmann)"VCH. 53 (2002)

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  • [文献書誌] J.Hiratake, H.Suzuki, H.Kumagai: "Glutamyl transpeptidase and its precursor. in Handbook of Proteolytic Enzymes, 2nd edition"Academic Press (In press). (2004)

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  • [文献書誌] A.Watanabe, T.Yoshimura, Y.H.Lim, Y.Kurokawa, K.Soda, N.Esaki: "Stereochemistry of hydrogen abstraction from pyridoxamine phosphate catalyzed by alanine racemase of Bacillus stearothermophilus."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 12. 145-150 (2001)

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  • [文献書誌] T.Uo, T.Ueda, T.Nishiyama, T.Yoshimura, N.Esaki: "Purification and characterization of alanine racemase from hepatopancreas of black-tiger prawn, Penaeus monodon"J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 12. 137-144 (2001)

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  • [文献書誌] T.Uo, T.Yoshimura, N.Tanaka, K.Takegawa, N.Esaki: "Functional characterization of alanine racemase from Schizosaccharomyces pombe : a eucaryotic counterpart to bacterial alanine racemase."J. Bacteriol.. 183. 2226-2233 (2001)

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  • [文献書誌] T.Suzuki, T.Nakayama, T.Kurihara, T.Nishino, N.Esaki: "Cold-active lipolytic activiy of psychrotrophic Acinetobacter sp.strain no. 6."J. Biosci. Bioeng.. 92. 144-148 (2001)

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  • [文献書誌] K.Soda, T.Yoshimura, N.Esaki: "Stereospecificity for the hydrogen transfer of pyridoxal enzyme reactions."The Chemical Record. 1. 373-384 (2001)

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  • [文献書誌] M.Kashiwa, M.Ike, H.Mihara, N.Esaki, M.Fujita: "Removal of soluble selenium by a selenate-reducing bacterium Bacillus sp. SF-1."BioFactors. 14. 261-265 (2001)

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  • [文献書誌] H.Mihara, S.Kato, T.Kurihara, T.Yoshimura, N.Esaki, G.M.Lacourdiere, T.C.Stadtman: "Role of cysteine desulfurase in the biosynthesis of formate dehydrogenase H containing Mo, molybdopterin, selenocysteine, and Fe_4S_4 cluster."Biomed. Res. Trace. Elem.. 12. 261-262 (2001)

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  • [文献書誌] A.Lewandowicz, D.Sicinska, J.Rudzinski, S.Ichiyama, T.Kurihara, N.Esaki, P.Paneth: "Chlorine kinetic isotope effect on fluoroacetate dehalogenase reaction."J. Am. Chem. Soc.. 123. 9192-9193 (2001)

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  • [文献書誌] K.Yokoigawa, Y.Okubo, H.Kawai, N.Esaki, K.Soda: "Structure and function of psychrophilic alanine racemase."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 12. 27-35 (2001)

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  • [文献書誌] A.Watanabe, T.Yoshimura, B.Mikami, H.Hayashi, H.Kagamiyama, N.Esaki: "Reaction mechanism of alanine racemase from Bacillus stearothermophilus : X-ray crystallographic studies of the enzyme bound with N-(5'-phosphopyridoxyl)-alanine."J. Biol. Chem.. 277. 19166-19172 (2002)

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  • [文献書誌] T.Uo, T.Yoshimura, T.Nishiyama, N.Esaki: "Gene cloning, purification and characterization of 2,3-diaminopropionate ammonia-B from Escherichia coli."Biosci. Biotechnol. Biochem.. 66. 2639-2644 (2002)

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  • [文献書誌] U.Tokumoto, S.Nomura, Y.Minami, H.Mihara, S.Kato, T.Kurihara, N.Esaki, H.Kanazawa, H.Matsubara, Y.Takahashi: "Network of protein-protein interactions among iron-sulfur cluster assembly proteins in Eschrichia coli."J. Biochem.. 131. 713-719 (2002)

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  • [文献書誌] T.Suzuki, T.Nakayama, T.Kurihara, T.Nishino.N.Esaki: "A cold-active esterase with a substrate preference for vinyl esters from a psychrotroph, Acinetobacter sp. strain no. 6 : gene cloning, purification, and characterization."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 16. 255-263 (2002)

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  • [文献書誌] T.Suzuki, T.Nakayama, T.Kurihara, T.Nishino.N.Esaki: "Primary structure and catalytic properties of a coldactive esterase from a psychrotroph, Acinetobacter sp. strain no. 6 isolated from Siberian soil."Biosci. Biotechnol. Biochem.. 66. 1682-1690 (2002)

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  • [文献書誌] S.Kato, H.Mihara, T.Kurihara, Y.Takahashi, U.Tokumoto, T.Yoshimura N.Esaki: "Cys328 of IscS and Cys63 of IscU are the sites of disulfide bridge formation in a covalently-bound IscU/IscS complex : Implications for the mechanism of iron-sulfur cluster assembly."Proc. Natl. Acad. Sci.. 99. 5948-5952 (2002)

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  • [文献書誌] E.Pilon-Smits, G.Garifullina, S.Abdel-Ghany, S.Kato, H.Mihara, K.Hale, J.Burkhead, N.Esaki, T.Kurihara, M.Pilon: "Characterization of a NifS-like chloroplast protein from Arabidopsis. Implications for its role in sulfur and selenium metabolism."Plant Physiol.. 130. 1309-1318 (2002)

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  • [文献書誌] H.Bae, S.Hong, S.Lee, M.Kwak, N.Esaki, M.Sung: "Application of a thermostable glutamate racemase from Bacillus sp. SK-1 for the production of D-phenylalanine in a multi-enzyme system."J. Mol. Catal B : Enzymatic. 17. 223-233 (2002)

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  • [文献書誌] S.Ichiyama, T.Kurihara, M.Miyagi, A.Galkin, S.Tsunasawa, H.Kawasaki, N.Esaki: "Catalysis-linked inactivation fluoroacetate dehalogenase by ammonia A novel approach to the active-site enviroment."J. Biochem.. 131. 671-677 (2002)

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  • [文献書誌] T.A.Muranova, S.N.Ruzheinikov, S.E.Sedelnikova, P.J.Baker, A.Pasquo, A.Galkin, N.Esaki, T.Ohshima, K.Soda, D.W.Rice: "Crystallization and preliminary X-ray analysis of substrate complexes of leucine dehydrogenase from Thermoactinomyces intermedius."Acta Cryst.. D58. 1059-1062 (2002)

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  • [文献書誌] H.Mihara, N.Esaki: "Bacterial cysteine desulfurases : their function and mechanisms."Appl. Microbiol Biotechnol.. 60. 12-23 (2002)

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  • [文献書誌] H.Mihara, N.Esaki: "Selenocysteine lyase from mouse liver."Methods in Enzymology. 347. 198-203 (2002)

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  • [文献書誌] H.Mihara, S.Kato, G.M.Lacourciere, T.C.Standman, R.A.J.D.Kennedy, T.Kurihara, U.Tokumoto, Y.Takahashi, N.Esaki: "The iscS gene is essential for the biosynthesis of 2-selenouridine in tRNA and the selenocysteine containing formate dehydrogenase H."Proc. Natl. Acad. Sci.. 99. 6679-6683 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H.Mihara, T.Fujii, S.Kato, T.Kurihara, Y.Hata, N.Esaki: "Structure of external aldimine of Escherichia coli CsdB, an IscS/NifS homolog implications for its specificity toward selenocysteine."J. Biochem.. 131. 679-685 (2002)

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  • [文献書誌] K.Yoshimune, T.Yoshimura, T.Nakayama, T.Nishino, N.Esaki: "Hsc62, Hsc56, and GrpE, the third Hsp70 chaperone system of E. coli."Biochem. Biophys. Res. Commune.. 293. 1389-1395 (2002)

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  • [文献書誌] M.Kwak, H.Mihara, N.Esaki: "Protein interaction between selenocysteine lyase and MUP-1."Biomedical Research on Trace Elements. 13. 238-239 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] E.Kuwana, S.Kurokawa, H.Mihara, T.Kurihara, T.Yoshimura, N.Esaki: "Effects of selenium deficiency on the expression of selenoprotein mRNAs in mouse brain."BiOMEDICAL RESEARCH ON TRACE ELEMENTS. 14. 293-296 (2003)

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  • [文献書誌] Y.Wei.T.Kurihara, T.Suzuki, N.Esaki: "A novel esterase from a psychrotrophic bacterium, Acinetobacter sp. strain no. 6, that belongs to the arnidase signature family."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 23. 357-365 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kurihara, T.Yamauchi, S.Ichiyama, H.Takahata, N.Esaki: "Purification, characterization, and gene cloning of a novel fluoroacetate dehalogenase from Burkholderia sp. FA1."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 23. 347-355 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Kurihara, H.Mihara, S.Kato, T.Yoshimura, N.Esaki: "Assembly of iron-sulfur clusters mediated by cysteine desulfurases, IscS, CscS, CsdB and CSD, from Escherichia coil."Biochimica et Biophysica Acta. 1647. 303-309 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] L.Kulakova, A.Galkin, T.Nakayama, T.Nishino, N.Esaki: "Improvement of thermostability of cold-active serine alkaline protease from the psychrotrophic bacterium Shewanella sp. strain Ac10 by rational mutagenesis."Journal of Molecular Catalysis B : Enzymatic. 22. 113-117 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Suzuki, T.Nakayama, D.W.Choo, Y.Hirano, T.Kurihara, T.Nishino, N.Esaki: "Cloning, heterologous expression, renaturation, and characterization of a cold-adapted esterase with unique primary structure from a psychrotroph Pseudomonas sp. strain B11-1."Protein Expression and Purification. 30. 171-178 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Kato, T.Ohshima, A.Galkin, L.Kulakova, T.Yoshimura, N.Esaki: "Purification and characterization of alanine dehydrogenase from a marine bacterium, Vibrio proteolyticus."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 23. 373-378 (2003)

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  • [文献書誌] M.Pilon, J.D.Owen, G.F.Garifullina, T.Kurihara, H.Mihara, N.Esaki, E.A.H.Pilon-Smits: "Enhanced selenium tolerance and accumulation in transgenic Arabidopsis expressing a mouse selenocysteine lyase."Plant Physiol.. 131. 1250-1257 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] C.Park, T.Kurihara, T.Yoshimura, K.Soda, N.Esaki: "A new DL-2-haloacid dehalogenase acting on 2-holoacid amides : Purification, characterization, and mechanism."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 23. 329-336 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] A.Galkin, L.Kulakova, T.Nakayama, T.Nishino, N.Esaki: "Cold-active enzymes from cold-adapted microorganisms : Their possible applications and structural relationships with mesophilic and thermophilic counterparts."Recent Advances in Marine Biotechnology. 8. 1-27 (2003)

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  • [文献書誌] G.Yow, A.Watanabe, T.Yoshimura, N.Esaki: "Conversion of the catalytic specificity of alanine racemase to a D-amino acid aminotransferase activity by a double active-site mutation."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 23. 311-319 (2003)

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  • [文献書誌] T.Yoshimura, N.Esaki: "Amino acid racemases : Functions and mechanisms."Journal of Bioscience and Bioengineering. 96. 103-109 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Li, T.Kurihara, S.Ichiyama, M.Miyagi, S.Tsunasawa, N.Esaki: "Mass spectrometric analysis of the reactions catalyzed by L-2-haloacid dehalogenase mutants and implications for the roles of the catalytic amino acid residues."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 23. 337-345 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y.Fuchikami, T.Yoshimura, N.Esaki: "D-Amino acid aminotransferase : Fragmentation at a flexible loop is an efficient metond to generate mutant enzymes with new substrate specificities and elevated activities."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 23. 321-328 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] M.Kwak, H.Mihara, N.Esaki: "A novel regulatory function of selenocysteine lyase, a unique catalyst to modulate major urinary protein."J. Mol. Catal. B : Enzymatic. 23. 367-372 (2003)

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  • [文献書誌] H.Yamamoto, K.Mitsuhashi, N.Kimoto, A.Matsuyama, N.Esaki, Y.Kobayashi: "A novel NADH-dependent carbonyl reductase from Kluyveromyces aestuarii and comparison of NADH-regeneration system for the synthesis of ethyl (S)-4-chloro-3-hydroxybutanoate."Biosci. Biotechnol. Biochem.. 68. 638-649 (2004)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] L.Kulakova, A.Galkin, T.Nakayama, T.Nishino, N.Esaki: "Cold-active esterase from Psychrobacter sp. Ant300 : gene cloning, characterization and the effects of Gly->Pro substitution near the active site on its catalytic activity and stability."Biochimica et Biophysica Acta. 1696. 59-65 (2004)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Takakura, K.Mitsushima, S.Yagi, K.Inagaki, H.Tanaka, N.Esaki, K.Soda, A.Takimoto: "Assay method for antitumor L-methionine g-lyase : comprehensive kinetic analysis of the complex reaction with L-methionine."Analytical Biochemistry. 327. 233-240 (2004)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Ichiyama, T.Kurihara, Y.Kogure, S.Tsunasawa, H.Kawasaki, N.Esaki: "Reactivity of asparagine residue at the active site of the D105N mutant of fluoroacetate dehalogenase from Moraxella sp. B."Biochimica et Biophysica Acta. 1698. 27-36 (2004)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] W.Guo, J.Hiratake, K.Ogawa, M.Yamamoto, S.-J.Ma, K.Sakata: "β-Glycosylamidines : potent, selective, and easily accessible-β-glycosidase inhibitors."Bioorg. Med. Chem. Lett.. 11. 467-470 (2001)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.K.Boehlein, T.Nakatsu, J.Hiratake, R.Thirumoorthy, J.D.Stewart, N.G.J.Richards, S.M.Schuster: "Characterization of ihibitors acting at the synthetase site of Escherichia coli asparagine synthetase B."Biochemistry. 40. 11168-11175 (2004)

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  • [文献書誌] S.-J.Ma, J.Hiratake, Y.Nakai, M.Izumi, K.Fukase, S.Kusumoto, K.Sakata: "A direct continuous spectrophotometric assay for glycosidases with 3-nitro2-pyridyl glycosides by tautomerization of 2-hydroxy-3-nitropyridine."Anal. Biochem.. 302. 291-297 (2002)

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  • [文献書誌] J.Hiratake, M.Inoue, K.Sakata: "γ-Glutamyltranspeptidase and γ-glutarnyl peptide ligases : Use of fluorophosphonate and phosphonodifluoromethyl ketone analogues as probes of the tetrahedral transition state and the γ-glutamyl-P intermediate."Methods in Enzymology. 354. 272-295 (2002)

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  • [文献書誌] J.Hiratake, T.Irie, N.Tokutake, J.Oda: "Recognition of a cysteine substrate by E. coli γ-glutamylcysteine synthetase probed by sulfoximine-based transition-state analogue inhibitors."Biosci. Biotechnol. Biochem.. 66. 1500-1514 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Hiratake: "Rational design and synthesis of enzyme inhibitors : Significance in probing the function of enzymes."J. of Synthetic Organic Chemistry, Special Issue in English. 60. 1095-1103 (2002)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] R.Fujii, Y.Utsunomiya, J.Hiratake, A.Sogabe, K.Sakata: "Highly sensitive active-site titration of lipase in microscale culture media using fluorescent organophosphorus ester."Biochim. Biophys. Acta (Molecular and Cell Biology of Lipids). 1631. 197-205 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] J.Hiratake, K.Sakata: "Glycosylamidines as potent selective and easily accessible glycosidase inhibitors and their application to affinity chromatography."Methods in Enzymology. 363. 421-444 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] K.Inoue, J.Hiratake, M.Mizutani, M.Takada, M.Yamamoto, K.Sakata: "β-Glycosylamidine as ligand for affinity chromatography tailored to glycon substrate specificity of β-glycosidases."Carbohydr. Res.. 338. 1477-1491 (2003)

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      2003 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Tatsuo Kurihara et al.: "Assembly of iron-sulfur clusters mediated by cysteine desulfurases, JscS, CsdB and CSD, from Escherichia coil"Biochimica et Biophysica Acta. 1647. 113-117 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Eriko Kuwana et al.: "Effects of Selenium Deficiency on the Expression of Selenoprotein mRNAs in Mouse Brain"BiOMEDICAL RESEARCH ON TRACE ELEMENTS. 14・4. 293-296 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Marinus Pilon et al.: "Enhanced Selenium Tolerance and Accumulation in Transgenic Arabidopsis Expressing a Mouse Selenocysteine Lyase."Plant Physiol"Plant Physiol.. 131. 1250-1257 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Mi-Sun Kwak et al.: "A novel regulatory function of selenocysteine lyase, a unique catalyst to modulate major urinary protein"Mol.Catal.B : Enzymatic. 23. 367-372 (2003)

    • 関連する報告書
      2003 実績報告書
  • [文献書誌] Mihara, H.: "Bacterial cysteine desulfurases : their function and mechanisms"Appl.Microbiol.Biotechnol.. 60. 12-23 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Mihara, H.: "The iseS gene is essential for the biosynthesis of 2-selenouridine in tRNA and the selenocysteine-containing formatedehydrogenase H"Proc.Natl.Acad.Sci., USA. 99. 6679-6683 (2002)

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Mihara, H.: "Structure of external aldimine of Escherichia coli CsdB, an IscS/NifS homolog : implications for its specificity towardselenocysteine"J.Biochem.. 131. 679-685

    • 関連する報告書
      2002 実績報告書
  • [文献書誌] Kato, S.: "Cys328 of IscS and Cys63 of IscU are the Sites of DisulfideBridge Formation in a Covalently-bound IscS/IscU Complex : Implication for the Mecbanism of lron-Sulfur Cluster Assembly"Proc. Natl. Acad. Sci., USA. (印刷中).

    • 関連する報告書
      2001 実績報告書

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公開日: 2001-04-01   更新日: 2018-03-28  

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