TRECK法によるアトピー性皮膚炎の発症責任細胞系列の解明とモデルマウスの作製

• 研究課題/領域番号: 14208098
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: (財)東京都医学研究機構
• 研究代表者: 米川 博通 (財)東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 参事研究員(副所長) (30142110)
• 研究分担者: 多屋 長治 (財)東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (90175456) ; 松岡 邦枝 (財)東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (40291158) ; 河野 憲二 奈良先端科学技術大学院大学, 遺伝子教育研究センター, 教授 (50142005) ; 烏山 一 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (60195013) ; 松田 浩 (松田 浩珍) 東京農工大学, 大学院・共生科学技術研究部, 教授 (80145820) ; 設楽 浩志 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (90321885)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2004
• 研究課題ステータス: 完了 (2004年度)
• 配分額: 43,550千円 (直接経費: 33,500千円、間接経費: 10,050千円); 2004年度: 10,010千円 (直接経費: 7,700千円、間接経費: 2,310千円); 2003年度: 12,740千円 (直接経費: 9,800千円、間接経費: 2,940千円); 2002年度: 20,800千円 (直接経費: 16,000千円、間接経費: 4,800千円)
• キーワード: 遺伝子改変マウス / アトピー性皮膚炎 / ジフテリア毒素 / 毒素受容体 / マスト細胞 / T細胞 / 組織特異的プロモータ / 細胞標的破壊法

研究概要

これまで、アトピー性皮膚炎の発症には、免疫系の細胞の関与が必須であるが、そのうちマスト細胞系列とT細胞系列が最も強く関与していると考えられている。しかしそのいずれが重要であるかについてはいまだ決着を見ない。研究代表者の米川らは、これまでヒトアトピー性皮慮炎のモデルと思われている近交系マウスNC/Ngaを用い、このマウスに皮膚炎を発症させる遺伝子座の探索を行い、その主要な遺伝子がマウス第9染色体上に存在するdermlであることを見出した。本研究では、このNC/Ngaマウスを主たる材料に使い、このマウスのアトピー性皮膚炎に関連すると思われる細胞系列、例えばT細胞系列、マスト細胞系列の細胞群等を、細胞群特異的プロモータを用いたTRECK法(後述)により、それぞれの細胞系列を個体内で任意の時期に抹消し、それらのマウスを用いた皮膚炎発症を観察するととにより、皮膚炎発症にかかわる細胞系列(責任細胞系列)を明らかにすることを目的とした。TRECK法は、本研究班の班員の一人、奈良先端大の河野らによって開発された方法で、組織特異的なプロモータをヒトのジフテリア毒素受容体(ヘパリン結合性EGF受容体)の遺伝子に連結した後、このDNA組換え体をマウスに導入してトランスジェニック(Tg)マウスを作製する。その後、そのTgマウスが成長した適当な時期に、ジフテリア毒素をそのTgマウスに投与し、導入したプロモータが発現している細胞を特異的に破壊するという画期的な方法である。
昨年度までに、上記細胞群に特異的と思われるプ白モータを用い、TRECK-Tgマウスの作製を行った。これまでの実験においては、BALB/c、SCIDマウスを用いた実験ではTRECK-Tgマウスの作製に成功し、また、NC/NgaによるTRECK-Tgマウスの作製も、Tgファウンダー獲得後のIVF(体外受精法)との併用において成功したが、まだいずれの細胞群がアトピー性皮膚炎の細胞群かを同定できたまでに至っていない。本研究は今年度を以て終了するが、終了後も責任細胞の同定についての研究引き続き行い決着を付けたい。

研究成果

• [雑誌論文] Regulation of anaphylactic responses by phosphatidylinositol phosphate kinase type I α. ハ (2005)
  • 著者名/発表者名: Sasaki, J., Sasaki, T., Yamazaki, M., Matsuoka, M., Taya, C., Shitara, H., Takasuga, S., Nishino, M., Mizuno, K., Wada, T., Miyazai, H., Watanabe, H., Iizuka, R., Kubo, S., Murata, S, Chiba, T., Maehama, T., Hamad, K., Kishimoto, H., Frohman, M.A., Tanaka, K., Penninger, J.M., Yonekawa, H., Suzuki, A., Kanaho, Y.
  • 雑誌名: J. Exp. Med. 201 ページ: 859-870
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Ovalbumin-specific IgE modulates ovalbumin-specific T-cell response after repetitive oral antigen administration (2005)
  • 著者名/発表者名: Omata, N., 0hshima, Y., Yasutomi, M., Yamada, A., Karasuyama, H., Mayumi,M.
  • 雑誌名: J. Allergy Clin. Immunol. 115 ページ: 822-827
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Mycobacterium vaccae Reduces Scratching Behavior but not the Rash in NC Mice with Eczema : A Randomized, Blinded, Placebo-Controlled Trial (2005)
  • 著者名/発表者名: Arkwright, P.D., Fujisawa, C., Tanaka, A., Matsuda H.
  • 雑誌名: J. Invest. Dermatol. 124 ページ: 140-143
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Origins of mouse inbred strains deduced from whole-genome scanning by polymorphic microsatellite loci (2005)
  • 著者名/発表者名: Sakai, T., KikKawa, Y., Miura, I., Inoue, I., Moriwaki, K., Shiroishi, T., Satta, Y., Takahata, N., Yonekawa, H
  • 雑誌名: Mamm. Genome 16 ページ: 11-19
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Regulation of anaphylactic responses by phosphatidylinositol phosphate kinase type Iα. (2005)
  • 著者名/発表者名: Sasaki, J., Sasaki, T., Yamazaki, M., Matsuoka, M., Taya, C., Shitara, H., Takasuga, S., Nishio, M., Mizuno, K., Wada, T., Miyazaki, H., Watanabe, H., Iizuka, R., Kubo, S., Murata, S., Chiba, T., Maehama, T., Hamada, K., Kishimoto, H., Frohman, M.A., Tanaka, K., Penninger, J.M., Yonekawa, H., Suzuki, A., Kanaho, Y.
  • 雑誌名: J.Exp.Med. 201 ページ: 859-870
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Ovalbumin-specific IgE modulates ovalbumin-specific T-cell -response after repetitive oral antigen administration. (2005)
  • 著者名/発表者名: Omata, N., Ohshima, Y, Yasutomi, M., Yamada, A., Karasuyama, H., Mayumi, M.
  • 雑誌名: J.Allergy Clin.Immunol. 115 ページ: 822-827
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Mycobacterium vaccae Reduces Scratching Behavior but not the Rash in NC Mice with Eczema : A Randomized, Blinded, Placebo-Controlled Trial. (2005)
  • 著者名/発表者名: Arkwright, P.D., Fujisawa, C., Tanaka, A., Matsuda H.
  • 雑誌名: J.Invest.Dermatol. 124 ページ: 140-143
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Origins of mouse inbred strains deduced from whole-genome scanning by polymorphic microsatellite loci. (2005)
  • 著者名/発表者名: Sakai, T., Kikkawa, Y., Miura, I., Inoue, T., Moriwaki, K., Shiroishi, T., Satta, Y., Takahata, N., Yonekawa, H.
  • 雑誌名: Mamm.Genome 16 ページ: 11-19
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Regulation of anaphylactic responses by phosphatidylinositol phosphate kinase type I α (2005)
  • 著者名/発表者名: Sasaki, J.et al.
  • 雑誌名: J.Exp.Med. 201 ページ: 859-870
• [雑誌論文] Origins of mouse inbred strains deduced from whole-genome scanning by polymorphic microsatellite loci. (2005)
  • 著者名/発表者名: Sakai, T.et al.
  • 雑誌名: Mamml.Genome 16 ページ: 11-19
• [雑誌論文] Simple method of zygosity identification in transgenic mice by real-time quantitative PCR (2004)
  • 著者名/発表者名: Sgitara, H.et al.
  • 雑誌名: Transgenic Res. 13 ページ: 191-194
• [雑誌論文] Liver Regeneration in Heparin-Binding EGF-like Growth Factor Transgenic Mice After Partial Hepatectomy. (2003)
  • 著者名/発表者名: Kiso, S., Kawata, S., Tamura, S., Inui, Y., Yoshida, Y., Sawai, Y., Umeki, S., Ito, N., Yamada, A., Miyagawa, J., Higashiyama, S., Iwawaki, T., Saito, M., Taniguchi, N., Matsuzawa, Y., Kohno, K.
  • 雑誌名: Gastmenteml 124 ページ: 701-707
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Long-term maintenance of IgE-mediated memory in mast cells in the absence of detectable serum IgE (2003)
  • 著者名/発表者名: Kubo, S., Nakayama, T., Matsuoka, K., Yonekawa, H., Karasuyama, H
  • 雑誌名: J. Immunol. 170 ページ: 775-780
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Liver Regeneration in Heparin-Binding EGF-like Growth Factor Transgenic Mice After Partial Hepatectomy. (2003)
  • 著者名/発表者名: Kiso, S., Kawata, S., Tamara, S, Inui, Y, Yoshida, Y., Sawai, Y., Umeki, S., Ito, N., Yamada, A., Miyagawa, J., Higashiyama, S., Iwawaki, T., Saito, M., Taniguchi, N., Matsuzawa, Y., Kohno, K.
  • 雑誌名: Gastroenterol. 124 ページ: 701-707
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Long-term maintenance of IgE-mediated memory in mast cells in the absence of detectable serum IgE. (2003)
  • 著者名/発表者名: Kubo, S., Nakayama, T., Matsuoka, K., Yonekawa, H., Karasuyama, H.
  • 雑誌名: J.Immunol. 170 ページ: 775-780
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [図書] マウスラボマニュアル (第2版) (2003)
  • 著者名/発表者名: 東京都臨床医学総合研究所・実験動物研究部門
  • 総ページ数: 376
  • 出版者: シュプリンガーフェアラータ・束京
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [図書] Mouse Lab Manual (in Japanese) (2003)
  • 著者名/発表者名: Yonekawa, H. et al. ed.
  • 総ページ数: 376
  • 出版者: Springer Verlag Tokyo
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kubo S.et al.: "Long-term maintenance of IgE-mediated memory in mast cells in the absence of detectable serum IgE."J.Immunol.. 170. 775-780 (2003)
• [文献書誌] Sato, E. et al.: "Chronic inflammation in skin can be induced in IgE transgenic mice by a single challenge of multivalent antigen.."J.Allergy Clin.Immunol.. 111. 143-148 (2003)
• [文献書誌] 米川博通(著者兼編集代表): "マウスラボマニュアル(第2版)"シュプリンガーフェアラーク東京. 376 (2003)
• [文献書誌] Kubo S.et al.: "Long-term maintenance of IgE-mediated memory in mast cells in the absence of detectable serum IgE"J. Immunol.. (in press).
• [文献書誌] Hirahara K. et al.: "Chronic inflammation in skin can be induced in IgE transgenic mice by a single challenge of multivalent antigen"J. Allergy Clin. Immunol.. (in press).
• [文献書誌] 米川博通, 他: "マウスラボマニュアル(改訂版)"シュプリンガーフェアラーク東京(印刷中). 900