| 研究課題/領域番号 |
14370223
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
循環器内科学
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| 研究機関 | 三重大学 |
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研究代表者 |
伊藤 正明 三重大学, 医学部附属病院, 講師 (00223181)
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| 研究分担者 |
吉田 恭子 (吉田 恭子(今中 恭子) / 今中 恭子) 三重大学, 医学部, 講師 (00242967)
大西 勝也 三重大学, 医学部, 助手 (40343222)
鈴木 昇 三重大学, 生命科学研究支援センター, 助教授 (00202135)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2004
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| 研究課題ステータス |
完了 (2004年度)
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| 配分額 *注記 |
14,100千円 (直接経費: 14,100千円)
2004年度: 2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
2003年度: 2,200千円 (直接経費: 2,200千円)
2002年度: 9,900千円 (直接経費: 9,900千円)
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| キーワード | Rhoキナーゼ / Rho / ミオシンホスファターゼ / MYPT2 / MYPT1 / ミオシン軽鎖リン酸化 / Ca^<2+>感受性 / 心臓 |
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| 研究概要 |
心筋におけるRho/Rhoキナーゼ/ミオシンホスファターゼ(MP)・シグナルの機能と病態との関連につき解析した。
1.Myosin Phosphatase Target Subunit 2(MYPT2)は1型ホスファターゼ触媒サブユニットδアイソフォーム(PP1cδ)、HS-M_<21>と結合して心筋MPを形成している。MYPT2は活性型RhoAの標的蛋白質で、RhoキナーゼはMYPT2のThr646をリン酸化して心筋MP活性を阻害する。MYPT2-PP1cδを過剰発現させた培養心筋細胞では、ミオシン軽鎖(MLC)リン酸化の低下とAngiotensin IIによるサルコメア再構築が抑制されることより、MPはMLCリン酸化を介するサルコメア再構築に関与し、Rho/Rhoキナーゼ・シグナルはこの活性を制御し得る上流のシグナルと考えられた。
2.心筋特異的MPトランスジェニックマウス(Tg)は、左心室径の拡大、壁厚の菲薄化と短縮率の低下など拡張型心筋症様フェノタイプを示し、心収縮・拡張能の低下が認められた。Tg心筋では野生型と比較して収縮のCa^<2+>感受性の低下が認められ、またMLCリン酸化レベルも有意に低下していた。以上より、心筋MPがin vivoでMLCリン酸化レベルを制御し、MLCリン酸化レベルは生理的な心機能の維持に重要であることが明らかとなった。
3.Rhoキナーゼの心臓における機能を解析する為、そのdominant negative fragment及びconstitutively active fragmentの誘導型トランスジェニックマウスの作製を試みたが、心筋特異的Creマウスを用いてそれぞれのTgマウスを作製することは出来なかった。そこで、Rhoを活性化させるRho-GEFの一つのLARGのトランスジェニックマウスの作製し、今後引き続き解析を行っていく予定である。
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