膜輸送蛋白質MXRの機能解析とその臨床的意義の検討

• 研究課題/領域番号: 15591699
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 泌尿器科学
• 研究機関: 鹿児島大学
• 研究代表者: 西山 賢龍 鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 講師 (80264422)
• 研究分担者: 久保 博幸 鹿児島大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (60336344)
• 研究期間 (年度): 2003 – 2005
• 研究課題ステータス: 完了 (2005年度)
• 配分額: 3,400千円 (直接経費: 3,400千円); 2005年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円); 2004年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円); 2003年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
• キーワード: MXR / 多剤耐性 / GS-Xポンプ / 膜小胞 / ATP依存性膜輸送

研究概要

1)MXRの482番目のアミノ酸がRからGまたはTに変異するとmitoxantroneやdoxorubicinに対する耐性度が増加する。加えて,novoviocinやfumitremorgin C(FTC)などのMXR阻害剤の効果にも影響する。MXRを過剰発現するMCF-7 AdVp3000細胞(変異MXR-482G-を発現)から調整した膜小胞はATP依存性にleukotrien C4(LTC4)を小胞内に取り込むことは既に報告したが,変異(482Gまたは482T)MXR遺伝子,およびwild-type(482R)MXR遺伝子を導入したHEK-293細胞から調整した膜小胞もATP依存性にLTC4を取込んだ。中でも482T膜小胞による取り込みが最も多く,MXRがGS-Xポンプ活性を有し,482番目のアミノ酸変異がLTC4輸送活性に関与している可能性が示唆された。
2)MCF-7 AdVp3000膜小胞によるATP依存性のLTC4の取り込みは,MXR阻害剤であるnovobiocinにより阻害され,MXRがGS-Xポンプであることを示唆するものであったが,他のMXR阻害剤FTCではほとんど阻害されなかった。これら薬剤のMXR阻害機構が異なる可能性が考えられ,さらなる検討を要する。
3)腎細胞癌患者16例,17腎から,手術により摘出された癌組織を用いて,RT-PCR法により,MXRmRNAの発現を検討した。腎癌組織では17サンプル4例にのみ発現をみとめるのみであったが,MDR1mRNAは10/17に,MRP1mRNAは13/17に検出された。腎癌ではMXRが臨床での薬剤耐性に関与している割合は低いと思われるが,MXRを含めたABCトランスポーターの発現プロファイルの解析により,適切な薬剤選択が可能となると思われる。