Establishment of a synthetic promoter-based system for sensing oncogenic alteration in human live thyroid cells at a single-cell level

• 研究課題/領域番号: 15K09438
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 内分泌学
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: サエンコ ウラジミール 長崎大学, 原爆後障害医療研究所, 准教授 (30343346)
• 研究分担者: ログノビッチ タチアナ 長崎大学, 原爆後障害医療研究所, 助教 (30423643) ; 光武 範吏 長崎大学, 原爆後障害医療研究所, 准教授 (50404215)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2017年度)
• 配分額: 4,810千円 (直接経費: 3,700千円、間接経費: 1,110千円); 2017年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2016年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2015年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
• キーワード: 甲状腺癌 / 癌遺伝子 / 遺伝子プロモーター / 合成生物学 / 単一細胞レポーター

研究成果の概要

本研究の目的は、一個の生細胞レベルでがん遺伝子活性化を検出できるシステムの構築である。このシステムには、がん遺伝子導入によって引き起こされる遺伝子発現亢進と関連する転写因子結合領域を組み込んだ人工プロモーターによる蛍光レポーターを用いた。まず、転写因子結合領域ライブラリーに対するスクリーニングを二重発光アッセイを用いて行った。最適なプロモーターを蛍光レポーターベクターに組み込み、がん遺伝子をコードしたベクターと共トランスフェクションすることによってさらなるスクリーニングを行った。選び出したいくつかのベクターを標的細胞に安定導入し、がん遺伝子によって誘導される蛍光を検出できることを確認できた。

研究成果

• [雑誌論文] Targeted Foxe1 overexpression in mouse thyroid causes the development of multinodular goiter but does not promote carcinogenesis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nikitski A, Saenko V, Shimamura M, Nakashima M, Matsuse M, Suzuki K, Rogounovitch T, Bogdanova T, Shibusawa N, Yamada M, Nagayama Y, Yamashita S, Mitsutake N
  • 雑誌名: Endocrinology 巻: 印刷中 号: 5 ページ: 2182-2195
  • DOI: 10.1210/en.2015-2066
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Major Factors Affecting Incidence of Childhood Thyroid Cancer in Belarus after the Chernobyl Accident: Do Nitrates in Drinking Water Play a Role? (2015)
  • 著者名/発表者名: Drozd VM, Saenko VA, Brenner AV, Drozdovitch V, Pashkevich VI, Kudelsky AV, Demidchik YE, Branovan I, Shiglik N, Rogounovitch TI, Yamashita S, Biko J, Reiners C
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 10 号: 9 ページ: e0137226-e0137226
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0137226
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] TCUKIN and CORGI Consortiums, Carmona LG; JTCMS Consortium: The 8q24 rs6983267G variant is associated with increased thyroid cancer risk. (2015)
  • 著者名/発表者名: Sahasrabudhe R, Estrada A, Lott P, Martin L, Polanco Echeverry G, Velez A, Neta G, Takahasi M, Saenko V, Mitsutake N, Jaeguer E, Duque CS, Rios A, Bohorquez M, Prieto R, Criollo A, Echeverry M, Tomlinson I
  • 雑誌名: Endocr Relat Cancer 巻: 22 号: 5 ページ: 841-849
  • DOI: 10.1530/erc-15-0081
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] BRAFV600E mutation is highly prevalent in thyroid carcinomas in the young population in Fukushima: a different oncogenic profile from Chernobyl. (2015)
  • 著者名/発表者名: Mitsutake N, Fukushima T, Matsuse M, Rogounovitch T, Saenko V, Uchino S, Ito M, Suzuki K, Suzuki S, Yamashita S
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 5 号: 1 ページ: 16976-16976
  • DOI: 10.1038/srep16976
  • NAID: 120006986823
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Genetic signatures of thyroid cancer according to radiation dose level (2016)
  • 著者名/発表者名: サエンコ ウラジミール
  • 学会等名: Joint symposium of KTA-KHNP "Thyroid cancer"(Korean Thyroid Association-Korean Hydro & Nuclear Power Co., Ltd)
  • 発表場所: ソウル（韓国）
  • 年月日: 2016-12-02
  • 国際学会
• [学会発表] 甲状腺がん発症分子機構解明の為の特異的転写応答合成プロモーター活性を指標とした高感度細胞内シグナル活性経路検出アッセイ系の確立 (2016)
  • 著者名/発表者名: サエンコ ウラジミール
  • 学会等名: 第59回 日本甲状腺学会学術集会
  • 発表場所: 虎ノ門ヒルズフォーラム（東京都港区）
  • 年月日: 2016-11-03
• [学会発表] Novel RET/PTC rearrangement identified by RNA-NGS in a sporadic pediatric PTC (2016)
  • 著者名/発表者名: ログノビッチ タチアナ、サエンコ ウラジミール、マンコフスカヤ スベトラナ、フリドマン ミハイル、デミドチック ユリ、山下俊一
  • 学会等名: 第89回 日本内分泌学会学術総会
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府京都市）
  • 年月日: 2016-04-21
• [学会発表] The combined influence of nitrates in drinking water and radiation on incidence of childhood thyroid cancer in Belarus after the Chernobyl accident (2015)
  • 著者名/発表者名: Valentina M. Drozd, Vladimir A. Saenko, Alina V. Brenner, Vladimir Drozdovitch, Vasilii I. Pashkevich, Anatoliy V. Kudelsky, Yuri E. Demidchik, Igor Branovan, Nikolay Shiglik, Tatiana I. Rogounovitch, Shunichi Yamashita, Johannes Biko, Christoph Reiners
  • 学会等名: Global Summit and Medicare Expo on Head & Neck Surgery
  • 発表場所: サンアントニオ（アメリカ）
  • 年月日: 2015-11-30
  • 国際学会
• [学会発表] Screening for Thyroid Nodular Disease in Brest Region of Belarus: 29 Years after The Chernobyl Catastrophy (2015)
  • 著者名/発表者名: M. Lushchyk, V. Drozd, L. Danilova, A. Grigorovich, V. Sivuda, A. Romanovskyj, Y. Demidchik, T. Rogunovich, V. Saenko, I.D. Branovan, N. Takamura, S. Yamashita
  • 学会等名: 15th International Thyroid Congress and 85th Annual Meeting of the ATA
  • 発表場所: オーランド（アメリカ）
  • 年月日: 2015-10-18
  • 国際学会
• [学会発表] Influence of Nitrate in Drinking Water in Open Wells on Childhood Thyroid Cancer Rates in Belarus and Ukraine after The Chernobyl Accident (2015)
  • 著者名/発表者名: V. Drozd, V. Saenko, A. Brenner, V. Drozdovitch, M. Tronko, V. Shpak, T. Bogdanova, A. Serduk, I. Chernychenko, S. Tsymbaliuk, V. Pashkevich, A. Kudelsky, D. Branovan, N. Shiglik, T. Rogounovitch, S. Yamashita, J. Biko, C. Reiners
  • 学会等名: 15th International Thyroid Congress and 85th Annual Meeting of the ATA
  • 発表場所: オーランド（アメリカ）
  • 年月日: 2015-10-18
  • 国際学会
• [学会発表] Gene rearrangements in radiation-induced thyroid cancer (2015)
  • 著者名/発表者名: Vladimir Saenko
  • 学会等名: The 15th International Congress of Radiation Research
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2015-05-25
  • 国際学会
• [学会発表] Foxe1 Overexpression and Radiation Effects on Mouse Thyroid (2015)
  • 著者名/発表者名: Alyaksandr Nikitski, Norisato Mitsutake, Keiji Suzuki, Vladimir Saenko, Tatiana Rogounovitch, Shunichi Yamashita
  • 学会等名: The 15th International Congress of Radiation Research
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2015-05-25
  • 国際学会
• [学会発表] Novel RET/PTC rearrangement identified by RNA-NGS in pediatric papillary thyroid carcinoma from Belarus (2015)
  • 著者名/発表者名: T. Rogounovitch, V. Saenko, S. Mankouskaya, M. Fridman, Yu. Demidchik, S. Yamashita
  • 学会等名: The 15th International Congress of Radiation Research
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2015-05-25
  • 国際学会
• [学会発表] Potential Joint Effect of Nitrates in Drinking Water and Radiation Dose to the Thyroid on Incidence of Pediatric Thyroid Cancer in Belarus (2015)
  • 著者名/発表者名: Valentina M Drozd, Vladimir A Saenko, Alina V Brenner, Vladimir Drozdovitch, Vasilii I Pashkevich, Alexander V Kudelsky, Yuri E Demidchik, Igor Branovan, Nikolay Shiglik, Tatiana I Rogounovitch, Shunichi Yamashita, Tamara Platonova, Johannes Biko, Christoph Reiners
  • 学会等名: The 15th International Congress of Radiation Research
  • 発表場所: 国立京都国際会館（京都府・京都市）
  • 年月日: 2015-05-25
  • 国際学会
• [備考] 長崎大学 原研疫学ホームページ
  • URL: http://www-sdc.med.nagasaki-u.ac.jp/dhrc/
• [備考] 長崎大学 原研疫学ホームページ
  • URL: http://www-sdc.med.nagasaki-u.ac.jp/dhrc
• [備考] 長崎大学原研疫学ホームページ
  • URL: http://www-sdc.med.nagasaki-u.ac.jp/dhrc/