ゼブラフィッシュ創薬：ダイアモンド・ブラックファン貧血モデルを用いた化合物の探索

• 研究課題/領域番号: 15K15394
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 宮崎大学
• 研究代表者: 吉浜 麻生 宮崎大学, フロンティア科学実験総合センター, 研究員 (00381103)
• 研究分担者: 上地 珠代 宮崎大学, フロンティア科学実験総合センター, 研究員 (10381104)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2017年度)
• 配分額: 3,510千円 (直接経費: 2,700千円、間接経費: 810千円); 2016年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円); 2015年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: 創薬 / ゼブラフィッシュ / バイオラベリング / 造血効果 / 毒性試験 / 薬物代謝 / 化合物スクリーニング / リボソーム / 疾患モデル / ゼブラフィッシュ創薬 / 貧血

研究成果の概要

ゼブラフィッシュのダイアモンド・ブラックファン貧血モデルを用いた化合物の in vivo 検証系を構築した。(1)RPS19遺伝子ノックダウン胚を用いた化合物のスクリーニングを行なった。(2)薬物代謝の in vivo 実験系としてバイオラベリング法を開発した。(3)CRISPR-Cas9システムによりRPS19遺伝子に変異のあるゼブラフィッシュを作製した。この変異体は48時間胚の発生段階で重度の貧血を示した。(4)毒性試験では長期投与により致死率が増加する化合物を確認した。

研究成果

• [国際共同研究] University of Toledo(米国)
• [雑誌論文] Identification and characterization of 5alpha-cyprinol-sulfating cytosolic sulfotransferases (Sults) in the Zebrafish (Danio rerio). (2017)
  • 著者名/発表者名: Kurogi, K., Yoshihama, M., Horton, A., Schiefer, I.T., Krasowski, M.D., Hagey, L.R., Williams, F.E., Sakakibara, Y., Kenmochi, N., Suiko, M., Liu, M.-C.
  • 雑誌名: The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology 巻: 174 ページ: 120-127
  • DOI: 10.1016/j.jsbmb.2017.08.005
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] Analysis of the translational efficiencies of mRNAs in a zebrafish model of Diamond-Blackfan anemia (2018)
  • 著者名/発表者名: Tamayo Uechi, Yukari Nakajima, Maki Yoshihama, Etsuro Ito, Yutaka Suzuki, Naoya Kenmochi
  • 学会等名: 15th Diamond Blackfan Anemia International Consensus Conference
  • 国際学会
• [学会発表] Decreased translational efficiency of mRNAs required for hematopoiesis in a zebrafish model of Diamond-Blackfan anemia (2017)
  • 著者名/発表者名: Tamayo Uechi, Maki Yoshihama, Yukari Nakajima, Yutaka Suzuki, Sumio Sugano, Naoya Kenmochi
  • 学会等名: "Translation Machinery in Health & Disease" Gordon Research Conference
  • 発表場所: Galveston, USA
  • 年月日: 2017-03-19
  • 国際学会
• [学会発表] ゼブラフィッシュを用いたダイアモンド・ブラックファン貧血発症機構の解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 上地珠代, 吉浜麻生, 中島由香里, 鈴木穣, 菅野純夫, 伊藤悦朗, 剣持直哉
  • 学会等名: 2017年度生命科学系学会合同年次大会
• [学会発表] ゼブラフィッシュを用いたリボソーム病発症機構の解析および創薬スクリーニング (2017)
  • 著者名/発表者名: 上地珠代、吉浜麻生、中島由香里、鈴木穣、伊藤悦朗、剣持直哉
  • 学会等名: 第３回ゼブラフィッシュ創薬研究会
• [学会発表] in vivo analysis for drug screening using DBA zebrafish model and bio labeling to visualize drug metabolism (2017)
  • 著者名/発表者名: Maki Yoshihama, Tamayo Uechi, Katstuhisa Kurogi, Yukari Nakajima, Ming-Cheh Liu, Naoya Kenmochi
  • 学会等名: 第23回 小型魚類研究会
• [学会発表] リボソーム病モデルにおけるmRNAの飜訳制御と疾患発症の分子機構 (2017)
  • 著者名/発表者名: 上地珠代, 吉浜麻生, 中島由香里, 鈴木穣, 伊藤悦朗, 剣持直哉
  • 学会等名: 第19回日本RNA学会年会
• [学会発表] Ribosomal dysfunction and defective erythropoiesis in a zebrafish model of Diamond-Blackfan anemia (2017)
  • 著者名/発表者名: Tamayo Uechi, Maki Yoshihama, Yukari Nakajima, Yutaka Suzuki, Sumio Sugano, Etsuro Ito, Naoya Kenmochi
  • 学会等名: The 22nd Annual Meeting of the RNA Society
  • 国際学会
• [学会発表] ゼブラフィッシュ貧血モデルを用いた創薬スクリーニングおよび薬物代謝の in vivo 解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 吉浜 麻生, 上地 珠代, 黒木 勝久, Ming-Cheh Liu, 剣持 直哉
  • 学会等名: 平成29年度日本生化学会九州支部例会
• [学会発表] ゼブラフィッシュDBAモデルを用いた創薬のための in vivo スクリーニング (2016)
  • 著者名/発表者名: 吉浜 麻生, 上地 珠代, 中島 由香里, 引間 園美, 剣持 直哉
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2016-11-30
• [学会発表] ゼブラフィッシュを用いたダイアモンド・ブラックファン貧血の発症機構の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 上地 珠代, 中島 由香里, 吉浜 麻生, 鈴木 穣, 菅野 純夫, 剣持 直哉
  • 学会等名: 第89回日本生化学会大会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2016-09-25
• [学会発表] Selected mRNA translation and ribosomopathies: analyzing the zebrafish model of congenital pure red-cell (2016)
  • 著者名/発表者名: Tamayo Uechi, Yukari Nakajima, Maki Yoshihama, Yutaka Suzuki, Sumio Sugano, Naoya Kenmochi
  • 学会等名: RNA2016
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2016-06-28
  • 国際学会
• [学会発表] Investigation of the cardiovascular toxicity of oxidized cholesterols using the zebrafish as an animal model (2016)
  • 著者名/発表者名: Katsuhisa Kurogi, Maki Yoshihama, Naoya Kenmochi, Yoichi Sakakibara, Masahito Suiko, Frederick Williams, Ming-Cheh Liu
  • 学会等名: American Society for Biochemistry and Molecular Biology 2016 Annual Meeting
  • 発表場所: San Diego, USA
  • 年月日: 2016-04-02
  • 国際学会
• [学会発表] Aberrant translation and ribosomopathies: studying the molecular pathogenesis of human diseases using zebrafish as a model animal (2016)
  • 著者名/発表者名: Tamayo Uechi, Yukari Nakajima, Maki Yoshihama, Shiori Ishida, Tsutomu Toki, Yutaka Suzuki, Sumio Sugano, Etsuro Ito, Naoya Kenmochi
  • 学会等名: The International Meeting on Aquatic Model Organism for Human Disease and Toxicology Research
  • 発表場所: 岡崎
  • 年月日: 2016-03-18
  • 国際学会
• [学会発表] Decreased translation efficiency of mRNAs required for hematopoiesis in a zebrafish model of Diamond-Blackfan anemia (2016)
  • 著者名/発表者名: Tamayo Uechi, Yukari Nakajima, Maki Yoshihama, Tsutomu Toki, Yutaka Suzuki, Sumio Sugano, Etsuro Ito, Naoya Kenmochi
  • 学会等名: The 14th Diamond Blackfan Anemia International Consensus Conference
  • 発表場所: Atlanta, USA
  • 年月日: 2016-03-05
  • 国際学会
• [学会発表] ノックダウン胚を用いた化合物スクリーニングおよび薬物代謝の in vivo 解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: 吉浜 麻生, 上地 珠代, 黒木 勝久, Ming-Cheh Liu, 剣持 直哉
  • 学会等名: 第2回ゼブラフィッシュ創薬研究会
  • 発表場所: 岐阜
• [学会発表] ゼブラフィッシュを用いたリボソーム病発症メカニズムの解明 (2015)
  • 著者名/発表者名: 上地珠代, 中島由香里, 吉浜麻生, 鈴木穣, 菅野純夫, 剣持直哉
  • 学会等名: 第38回日本分子生物学会年会・第88回日本生化学会大会 合同大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2015-12-01
• [学会発表] リボソーム病モデルを用いた発症機序の解明と化合物スクリーニング (2015)
  • 著者名/発表者名: 上地珠代, 吉浜麻生, 中島由香里, 上米良美香, 剣持直哉
  • 学会等名: 第1回ゼブラフィッシュ創薬研究会
  • 発表場所: 津
  • 年月日: 2015-11-06
• [学会発表] Selected mRNA translation and ribosomopathies: studying the molecular pathogenesis of congenital anemia using zebrafish as a model system (2015)
  • 著者名/発表者名: Tamayo Uechi, Yukari Nakajima, Maki Yoshihama, Yutaka Suzuki, Sumio Sugano, Naoya Kenmochi
  • 学会等名: International Conference on Ribosome Synthesis
  • 発表場所: Brussels, Belgium
  • 年月日: 2015-08-19
  • 国際学会
• [備考] 研究室ホームページ
  • URL: http://ribosome-labo.med.miyazaki-u.ac.jp
• [備考] リボソームタンパク質遺伝子データベース
  • URL: http://ribosome.med.miyazaki-u.ac.jp