がんエピゲノム変異誘導マウス作製技術の開発

• 研究課題/領域番号: 15K20888
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 実験動物学; 腫瘍生物学
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 伊関 大敬 筑波大学, 国際統合睡眠医科学研究機構, 助教 (50433652)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2016年度: 2,470千円 (直接経費: 1,900千円、間接経費: 570千円); 2015年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
• キーワード: エピゲノム編集 / CRISPR/Cas9 / lncRNA / がん / エピゲノム変異モデルマウス

研究成果の概要

エピゲノムの異常は発がんに寄与すると考えられているが個体レベルで検証するためのエピゲノム編集技術が確立されていない。そこで本研究では、CRISPR/Cas9ゲノム編集システム及びエピゲノム酵素足場を組み合わせたエピゲノム編集技術の開発を試みた。本研究成果として、N末端側約700アミノ酸を欠損した機能的縮小化dCas9タンパク質を作製した。また、Jarid2等のエピゲノム酵素足場タンパク質をdCas9に融合した新規エピゲノム編集システムを開発した。さらに、ガイドRNAへ付加可能な約150塩基のエピゲノム酵素足場長鎖非翻訳RNAを同定した。

研究成果

• [雑誌論文] Germline recombination in a novel Cre transgenic line, Prl3b1-cre mouse. (2016)
  • 著者名/発表者名: Al-Soudy AS, Hiromori Y, Mizuno S, Hasegawa Y, Shawki HH, Katoh MC, Basha WA, Ibrahim AE, El-Shemy HA, Iseki Hi, Yoshiki A, Nagase H, Nakanishi T, Takahashi S, Oishi H, Sugiyama F.
  • 雑誌名: Genesis. 巻: 54(7) 号: 7 ページ: 389-97
  • DOI: 10.1002/dvg.22944
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Generation of CRISPR/Cas9-mediated bicistronic knock-in <i>ins1-cre</i> driver mice (2016)
  • 著者名/発表者名: Yoshikazu Hasegawa, Yoshikazu Hoshino, Abdelaziz E. Ibrahim, Kanako Kato, Yoko Daitoku1, Yoko Tanimoto, Yoshihisa Ikeda, Hisashi Oishi, Satoru Takahashi, Atsushi Yoshiki, Ken-ichi Yagami, Hiroyoshi Iseki, Seiya Mizuno, Fumihiro Sugiyama
  • 雑誌名: Experimental Animals 巻: 65 号: 3 ページ: 319-327
  • DOI: 10.1538/expanim.16-0016
  • NAID: 130006882371
  • ISSN: 0007-5124, 1341-1357, 1881-7122
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Combined overexpression of JARID2, PRDM14, ESRRB, and SALL4A dramatically improves efficiency and kinetics of reprogramming to induced pluripotent stem cells. (2016)
  • 著者名/発表者名: Iseki H, Nakachi Y, Hishida T, Yamashita-Sugahara Y, Hirasaki M, Ueda A, Tanimoto Y, Iijima S, Sugiyama F, Yagami K, Takahashi S, Okuda A, Okazaki Y
  • 雑誌名: Stem Cells 巻: 34 号: 2 ページ: 322-333
  • DOI: 10.1002/stem.2243
  • 査読あり
• [学会発表] Identification of a causative gene involved in resistance of lymphoma cells to rat parvovirus oncolytic infection by a genome-wide DNA methylation analysis (2016)
  • 著者名/発表者名: 伊関 大敬、今野 裕士、奥泉 久人、高橋 智、八神 健一、杉山 文博
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神奈川県横浜市西区みなとみらい一丁目1番1号 パシフィコ横浜
  • 年月日: 2016-11-30
• [学会発表] Jarid2過剰発現による効率的なiPS細胞誘導 (2016)
  • 著者名/発表者名: 伊関 大敬、仲地 豊、菱田 友昭、菅原 泉、谷本 陽子、飯島 沙織、杉山 文博、八神 健一、高橋 智、奥田 晶彦、岡崎 康司
  • 学会等名: 第62回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 京都府京都市南区東九条下殿田町70番地 京都テルサ
  • 年月日: 2016-05-28