LFA-1接着"時間"制御機構の一分子解析

• 研究課題/領域番号: 15K21524
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 免疫学; 機能生物化学
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 近藤 直幸 関西医科大学, 医学部, 助教 (30570840)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2017-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2016年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2016年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2015年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: 一分子解析 / LFA-1 / Rap1 / Kindlin-3 / 免疫シナプス / ICAM-1 / 全反射顕微鏡 / 平面脂質二重膜 / 一分子計測 / 免疫学 / 一分子生物学 / 蛋白質化学 / 時空間制御

研究成果の概要

獲得免疫応答時に形成される超分子構造, 免疫シナプス(IS), 上での LFA-1の時空間制御機構を解明する目的で,全反射顕微鏡を用いたLFA-1/ICAM-1一分子結合計測実験系をIS上で確立し詳細な解析を行った.
その結果, LFA-1結合時間の分布はIS上で一様ではなく, Rap1やKindlin-3等のLFA-1活性化因子の局在箇所にのみ長いLFA-1/ICAM-1結合が起こり, Rap1/Kindlin-3等の欠損細胞では長期型結合数が減少し細胞接着も低下した．以上から, IS上のLFA-1制御は細胞内因子の空間的な配置による結合時間調節により担われていることが示唆された．

研究成果

• [雑誌論文] NDR1-Dependent Regulation of Kindlin-3 Controls High-Affinity LFA-1 Binding and Immune Synapse Organization. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kondo, N., Ueda, Y., Kita, T., Ozawa, M., Tomiyama, T., Yasuda, K., Lim, D.S. and Kinashi, T.
  • 雑誌名: Mol. Cell Biol. 巻: 37 号: 8 ページ: 00424-16
  • DOI: 10.1128/mcb.00424-16
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Sema3e/plexin D1 modulates immunological synapse and migration of thymocytes by Rap1 inhibition (2016)
  • 著者名/発表者名: Ueda Y., Kondo N., Ozawa M., Tomiyama T., Yasuda K., Kinashi T.
  • 雑誌名: J Immunol. 巻: 196(7) 号: 7 ページ: 3019-31
  • DOI: 10.4049/jimmunol.1502121
  • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Distinct requirements for HIV-cell fusion and HIV-mediated cell-cell fusion (2015)
  • 著者名/発表者名: Kondo N., Marin M., Kim J.H., Desai T.M., Melikyan G.B.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 巻: 290(10) 号: 10 ページ: 6558-73
  • DOI: 10.1074/jbc.m114.623181
  • 査読あり
• [学会発表] High-affinity LFA-1/ICAM-1 binding triggers the reorganization of vesicular transport regulators to facilitate the maturation of immunological synapse (2016)
  • 著者名/発表者名: 近藤 直幸, 植田 祥啓, 木梨 達雄
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2016-11-30
• [学会発表] Regulation of high-affinity LFA-1/ICAM-1 binding and immunological synapse formation, (2015)
  • 著者名/発表者名: Kondo N., Ueda Y., Ozawa M. and Kinashi T.
  • 学会等名: The 44th Annual Meeting of the Japanese Society for Immunology
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(北海道・札幌)
  • 年月日: 2015-11-18
• [学会発表] Establishment of thymic organ culture system for regulatory T cell developent (2015)
  • 著者名/発表者名: Ueda Y., Kondo N., Ozawa M. and Kinashi T.
  • 学会等名: The 44th Annual Meeting of the Japanese Society for Immunology
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター(北海道・札幌)
  • 年月日: 2015-11-18
• [学会発表] Single molecule imaging of LFA-1/ICAM-1 interaction at immune cell contact site (2015)
  • 著者名/発表者名: Kondo N.
  • 学会等名: The final annual meeting of molecule imaging center of diseases
  • 発表場所: 関西医科大学 (大阪・枚方)
  • 年月日: 2015-11-13