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蛍光性リポソームを用いた酵素活性の高感度分析

研究課題

研究課題/領域番号 16K05827
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
研究分野 分析化学
研究機関龍谷大学

研究代表者

宮武 智弘  龍谷大学, 理工学部, 教授 (10330028)

研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2019-03-31
研究課題ステータス 完了 (2018年度)
配分額 *注記
4,940千円 (直接経費: 3,800千円、間接経費: 1,140千円)
2018年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2017年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2016年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
キーワード酵素アッセイ / リポソーム / 膜透過性分子 / 酵素 / 酵素阻害剤 / 蛍光センシング / 膜透過性ペプチド / カチオン性ポリマー / 酵素活性評価 / 蛍光分析
研究成果の概要

従来法とは大きく異なり、蛍光色素を内封したリポソームとその分子膜を透過する分子を用いて、酵素反応の活性を簡便かつ蛍光発光により評価できるシステムの構築を行った。本申請の課題では、より低い濃度で活性を有する新しい膜透過性分子を設計・合成することで、より少ない酵素量で活性評価が行えるシステムの開発を目指した。オリゴペプチドに疎水性の置換基を導入する、あるいは従来の膜透過性ポリマーの化学修飾によって膜透過活性の向上を実現できた。さらに生理的に重要な酵素であるキナーゼを対象とした酵素活性評価を実現でき、僅か0.56マイクロリットルのサンプリング量で活性評価が可能な系を開発することができた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究では、高い膜透過活性を持つペプチド、高分子の合成に成功し、これらの構造と機能の解析をさらに進めることで、分子の細胞膜透過性に関する研究の進展に寄与し、細胞への薬物輸送などさらなる応用研究にも発展できると期待される。また、これらの膜透過性分子を利用して、より少量の酵素反応液でその活性評価ができたことは、酵素活性試験の低コスト化に寄与し、医薬品開発のさらなる進展に寄与できる可能性を有している。

報告書

(4件)
  • 2018 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2017 実施状況報告書
  • 2016 実施状況報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて 2019 2018 2016

すべて 学会発表 (6件) (うち国際学会 1件)

  • [学会発表] アルキル鎖をもつ両親媒性ペプチドの合成と脂質二分子膜に対する透過現象2019

    • 著者名/発表者名
      幡野瑞穂、宮武智弘
    • 学会等名
      日本化学会第99春季年会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] アンモニウム基およびグアニジウム基をもつカチオン性ポリマーと蛍光性リポソームを用いたキナーゼ類の活性評価2019

    • 著者名/発表者名
      林 友理、宮武智弘
    • 学会等名
      日本化学会第99春季年会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] Cell-Penetrative Activities of Cationic Polymers Possessing Ammonium or Guanidinium Groups: Application for ATP Assays2018

    • 著者名/発表者名
      Y. Hayashi, T. Miyatake
    • 学会等名
      3.14th International Workshop on Supramolecular Nanoscience of Chemically Programmed Pigments
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] アンモニウム基およびグアニジウム基をもつカチオン性ポリマーと蛍光性リポソームを用いた酵素活性評価2018

    • 著者名/発表者名
      林 友理、宮武智弘
    • 学会等名
      第12回バイオ関連化学シンポジウム
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] アンモニウム基およびグアニジウム基をもつカチオン性ポリマーの膜透過活性の評価2018

    • 著者名/発表者名
      林友理、宮武智弘
    • 学会等名
      日本化学会第98春季年会
    • 関連する報告書
      2017 実施状況報告書
  • [学会発表] 蛍光性リポソームを用いた酵素の活性評価2016

    • 著者名/発表者名
      宮武 智弘、竹村 仁志
    • 学会等名
      第10回バイオ関連化学シンポジウム
    • 発表場所
      石川県立音楽堂
    • 年月日
      2016-09-07
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書

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公開日: 2016-04-21   更新日: 2020-03-30  

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