難治性神経芽腫モデルマウスを用いた単細胞解析による創薬標的スクリーニング

• 研究課題/領域番号: 16K10051
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 基金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 埼玉県立がんセンター(臨床腫瘍研究所)
• 研究代表者: 竹信 尚典 埼玉県立がんセンター(臨床腫瘍研究所), 臨床腫瘍研究所, 研究員 (60392247)
• 研究分担者: 上條 岳彦 埼玉県立がんセンター(臨床腫瘍研究所), 臨床腫瘍研究所, 所長 (90262708)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2019-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2018年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2018年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2017年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2016年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
• キーワード: 幹細胞 / 発がん / 細胞分化 / トランスジェニック動物 / 小児腫瘍学

研究成果の概要

我々は幹細胞マーカーであるCD133のプロモーター領域を解析し、転写を誘導する転写因子CDX1を同定した。CDX1は神経芽腫細胞の増殖を促進し、スフェア形成を誘導したが、同時に細胞の増殖を抑制する機能を有することが示唆された。CDX1は複数の幹細胞関連遺伝子の発現に関わっていることが示唆され、神経芽腫の静止状態のがん幹細胞で働いていることを明らかにした。CD133およびCDX1を組織特異的に発現するTgマウスを作出し、解析を行った

研究成果の学術的意義や社会的意義

神経芽腫を始めとした小児がんは、成人のがんと異なって遺伝子の変異を伴わずに発生する。したがって、発がんには何らかの遺伝子の発現異常が生じていると考えられるが、その分子機構はほとんど明らかになっていない。本研究で見出したCDX1は、神経芽腫のがん幹細胞に発現している転写因子であり、CD133をはじめとした幹細胞関連遺伝子の発現を上昇させることから、発がんだけでなく、複数の組織幹細胞の維持に関わっているものと考えられる。本課題で作出したCDX1のTgマウスは、発がんだけでなく、神経堤由来の組織の発生メカニズムを明らかにする、非常に有用なモデルとなりうる。

研究成果

• [雑誌論文] EZH2 regulates neuroblastoma cell differentiation via NTRK1 promoter epigenetic modifications (2018)
  • 著者名/発表者名: Li Zhenghao、Takenobu Hisanori、Setyawati Amallia Nuggetsiana、Akita Nobuhiro、Haruta Masayuki、Satoh Shunpei、Shinno Yoshitaka、Chikaraishi Koji、Mukae Kyosuke、Akter Jesmin、Sugino Ryuichi P.、Nakazawa Atsuko、Nakagawara Akira、Aburatani Hiroyuki、Ohira Miki、Kamijo Takehiko
  • 雑誌名: Oncogene 巻: 37 号: 20 ページ: 2714-2727
  • DOI: 10.1038/s41388-018-0133-3
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] CFC1 is a cancer stemness-regulating factor in neuroblastoma (2017)
  • 著者名/発表者名: Chikaraishi Koji、Takenobu Hisanori、Sugino Ryuichi P.、Mukae Kyosuke、Akter Jesmin、Haruta Masayuki、Kurosumi Masafumi、Endo Takaho A.、Koseki Haruhiko、Shimojo Naoki、Ohira Miki、Kamijo Takehiko
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 8 号: 28 ページ: 45046-45059
  • DOI: 10.18632/oncotarget.18464
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] Reevaluation of PDGFRα signal in neuroblastoma: high expression and a new nonsynonymous mutation (2018)
  • 著者名/発表者名: Shunpei Satoh, Miki Ohira, Hisanori Takenobu, Akira Nakagawara, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: Advanced Neuroblastoma Research 2018
  • 国際学会
• [学会発表] CDX1 regulates neuroblastoma stemness through MYC pathway modulation and reprogramming gene activation (2018)
  • 著者名/発表者名: Hisanori Takenobu, Miki Ohira, Ryuichi Sugino, Koji Chikaraishi, Kyosuke Mukae, Nobuhiro Akita, Masayuki Haruta, Akira Nakagawara, Manabu Nakayama, Haruhiko Koseki, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: Advanced Neuroblastoma Research 2018
  • 国際学会
• [学会発表] EZH2 regulates neuroblastoma cell differentiation via NTRK1 promoter epigenetic modifications (2018)
  • 著者名/発表者名: Zhenghao Li, Hisanori Takenobu, Amallia Nuggetsiana Setyawati, Nobuhiro Akita, Masayuki Haruta, Shunpei Satoh, Yoshitaka Shinno, Koji Chikaraishi, Kyosuke Mukae, Jesmin Akter, Ryuichi P. Sugino, Atsuko Nakazawa, Akira Nakagawara, Hiroyuki Aburatani, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: Advanced Neuroblastoma Research 2018
  • 国際学会
• [学会発表] CFC1 is a cancer stemness-regulating factor in neuroblastoma. (2018)
  • 著者名/発表者名: Chikaraishi K, Takenobu H, Sugino RP, Mukae K, Akter J, Haruta M, Kurosumi M, Endo TA, Koseki H, Shimojo N, Ohira M, Kamijo T
  • 学会等名: Advanced Neuroblastoma Research 2018
  • 国際学会
• [学会発表] Identification of molecules that regulate the sensitivity of EZH2 inhibitor in neuroblastoma (2018)
  • 著者名/発表者名: Yuki Endo, Hisanori Takenobu, Ryuichi Sugino, Masayuki Haruta, Kyosuke Mukae, Shunpei Satoh, Yoshitaka Shinno, Mariko Hasegawa, Ryu Okada, Yutaka Katai, Masaki Nio, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第77回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Polycomb molecule L3MBTL2 suppresses apoptotic cell death cooperating with BMI1 in neuroblastoma (2018)
  • 著者名/発表者名: Ryu Okada, Hisanori Takenobu, Miki Ohira, Ryuichi Sugino, Koji Chikaraishi, Nobuhiro Akita, Masayuki Haruta, Kyosuke Mukae, Yuki Endo, Shunpei Satoh, Yutaka Katai, Haruhiko Koseki, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第77回日本癌学会学術総会
• [学会発表] CDX1 regulates stemness through MYC pathway modulation and reprogramming gene activation in neuroblastoma (2018)
  • 著者名/発表者名: Hisanori Takenobu, Miki Ohira, Ryuichi Sugino, Koji Chikaraishi, Ryu Okada, Kyosuke Mukae, Yuki Endo, Parvin Sultana, Yutaka Katai, Nobuhiro Akita, Masayuki Haruta, Haruhiko Koseki, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第77回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Development of neuroblastoma model from iPS-based neural crest cells for analysis of neuroblastoma tumorigenesis (2018)
  • 著者名/発表者名: Kyosuke Mukae, Hisanori Takenobu, Ryuichi Sugino, Miki Ohira, Shunpei Satoh, Yuki Endo, Ryu Okada, Masayuki Haruta, Junya Toguchida, Kenji Osafune, Tatsutoshi Nakahata, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第77回日本癌学会学術総会
• [学会発表] EZH2 regulates neuroblastoma cell differentiation via NTRK1 promoter epigenetic modifications (2018)
  • 著者名/発表者名: Zhenghao Li, Hisanori Takenobu, Amallia Nuggetsiana Setyawati, Nobuhiro Akita, Masayuki Haruta, Shunpei Satoh, Yoshitaka Shinno, Koji Chikaraishi, Kyosuke Mukae, Jesmin Akter, Ryuichi P. Sugino, Atsuko Nakazawa, Akira Nakagawara, Hiroyuki Aburatani, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第60回 日本小児血液がん学会
• [学会発表] Screening of EZH2i effector molecules in neuroblastoma by multi-omics analysis (2018)
  • 著者名/発表者名: Yuki Endo, Hisanori Takenobu, Ryuichi Sugino, Masayuki Haruta, Kyosuke Mukae, Shunpei Satoh, Yoshitaka Shinno, Mariko Hasegawa, Ryu Okada, Yutaka Katai, Masaki Nio, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第60回 日本小児血液がん学会
• [学会発表] Effect of ATRX deletion by CRISPR-Cas9 system in neuroblastoma (2018)
  • 著者名/発表者名: Yutaka Katai, Jesmin Akter, Hisanori Takenobu, Miki Ohira, Ryuichi Sugino, Masayuki Haruta, Shunpei Satoh, Kyosuke Mukae, Parvin Sultana, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第41回 日本分子生物学会
• [学会発表] Neuroblastoma cell dedifferentiation via epigenetic modification (2018)
  • 著者名/発表者名: Hisanori Takenobu, Ryuichi P. Sugino, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第41回 日本分子生物学会
  • 招待講演
• [学会発表] CFC1 regulates cancer stemness phenotypes in neuroblastoma via Activin signaling suppression (2017)
  • 著者名/発表者名: Koji Chikaraishi, Hisanori Takenobu, Ryuichi Sugino, Kyosuke Mukae, Masayuki Haruta, Masafumi Kurosumi, Yoshitaka Shinno, Akter Jesmin, A Takaho Endo, Haruhiko Koseki, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Sphere specific transcription factor CDX1 has dual functions for regulating stemness of neuroblastoma (2017)
  • 著者名/発表者名: Hisanori Takenobu, Ryuichi Sugino, Miki Ohira, Koji Chikaraishi, Kyosuke Mukae, Masayuki Haruta, Haruhiko Koseki, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Characterization of cell type by DNA methylation pattern using principal component analysis-based approach (2017)
  • 著者名/発表者名: Ryuichi Sugino, Miki Ohira, Satoshi Yamashita, Hisanori Takenobu, Junya Toguchida, Toshikazu Ushijima, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] EZH2 regulates neuroblastoma cell differentiation via NTRK1 promoter epigenetic modifications (2017)
  • 著者名/発表者名: Zhenghao Li, Hisanori Takenobu, Masayuki Haruta, Shunpei Satoh, Yoshitaka Shinno, Kyosuke Mukae, Jesmin Akter, Ryuichi Sugino, Akira Nakagawara, Hiroyuki Aburatani, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] CRISPR/Cas9-based knockout of the chromatin remodeling factor ATRX and its effect in neuroblastoma (NB) cells (2017)
  • 著者名/発表者名: Jesmin Akter, Yutaka Katai, Hisanori Takenobu, Masayuki Haruta, Parvin Sultana, Kyosuke Mukae, Ryuichi Sugino, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術総会
• [学会発表] EZH2 regulates neuroblastoma cell differentiation via NTRK1 promoter epigenetic modifications (2017)
  • 著者名/発表者名: Hisanori Takenobu, Zhenghao Li, Masayuki Haruta, Shunpei Satoh, Yoshitaka Shinno, Kyosuke Mukae, Jesmin Akter, Ryuichi Sugino, Akira Nakagawara, Hiroyuki Aburatani, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: The 3rd Asia-Pacific International Symposium of Neuroblastoma
• [学会発表] EZH2 regulates neuroblastoma cell differentiation via NTRK1 promoter epigenetic modifications (2017)
  • 著者名/発表者名: Hisanori Takenobu, Zhenghao Li, Amallia Nuggetsiana Setyawati, Nobuhiro Akita, Masayuki Haruta, Shunpei Satoh, Yoshitaka Shinno, Koji Chikaraishi, Kyosuke Mukae, Jesmin Akter, Yuki Endo, Ryuichi P. Sugino, Akira Nakagawara, Hiroyuki Aburatani, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第59回 日本小児血液がん学会学術集会
• [学会発表] Sphere specific transcription factor CDX1 regulates stemness of neuroblastoma (2017)
  • 著者名/発表者名: Hisanori Takenobu, Ryuichi Sugino, Miki Ohira, Koji Chikaraishi, Kyosuke Mukae, Yuki Endo, Sultana Parvin, Ryu Okada, Yutaka Katai, Masayuki Haruta, Haruhiko Koseki, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第59回 日本小児血液がん学会学術集会
• [学会発表] Effect of CFC1 on cancer cell stemness in neuroblastoma (2017)
  • 著者名/発表者名: Koji Chikaraishi, Hisanori Takenobu, Ryuichi Sugino, Kyosuke Mukae, Jesmin Akter, Masayuki Haruta, Masafumi Kurosumi, Takaho Endo, Haruhiko Koseki, Naoki Shimojo, Miki Ohira, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第59回 日本小児血液がん学会学術集会
• [学会発表] ヒトiPS細胞を用いた神経芽腫発がんモデル (2016)
  • 著者名/発表者名: Takenobu H, Sugino R, Ohira M, Yamashita S, Toguchida J, Kamijo T
  • 学会等名: 第58回日本小児血液がん学会学術集会
  • 発表場所: 品川
  • 年月日: 2016-12-15
• [学会発表] CFC-1遺伝子は神経芽腫細胞の幹細胞化制御因子である (2016)
  • 著者名/発表者名: Chikaraishi K, Takenobu H, Mukae K, Sugino R, Ohira M, Koseki H, Kamijo T
  • 学会等名: 第58回日本小児血液がん学会学術集会
  • 発表場所: 品川
  • 年月日: 2016-12-15
• [学会発表] 神経芽腫幹細胞を制御する新規シグナル経路の解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: Hisanori Takenobu, Miki Ohira, Koji Chikaraishi, Kyosuke Mukae, Nobuhiro Akita, Masayuki Haruta, Haruhiko Koseki, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 第75回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2016-10-06
• [学会発表] iPS細胞から神経堤細胞への分化における統合解析 (2016)
  • 著者名/発表者名: Sugino R, Ohira M, Yamashita S, Takenobu H, Toguchida J, Ushijima T, Kamijo T
  • 学会等名: 第75回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2016-10-06
• [学会発表] EZH2による神経芽腫の分化抑制 (2016)
  • 著者名/発表者名: Li Z, Setyawati AN, Takenobu H, Akita N, Haruta M, Chikaraishi K, Mukae K, Akter J, Sugino R, Ohira M, Kamijo K
  • 学会等名: 第75回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2016-10-06
• [学会発表] CDX1 regulates cancer stemness pathway in neuroblastoma, CDX1 regulates cancer stemness pathway in neuroblastoma (2016)
  • 著者名/発表者名: Hisanori Takenobu, Miki Ohira, Koji Chikaraishi, Nobuhiro Akita, Yohko Yamaguchi, Masayuki Haruta, Akira Nakagawara, Manabu Nakayama, Haruhiko Koseki, Takehiko Kamijo
  • 学会等名: 国際神経芽腫学会 (ANR2016)
  • 発表場所: ケアンズ (オーストラリア)
  • 年月日: 2016-06-19
  • 国際学会