| 研究課題/領域番号 |
16K13096
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| 研究種目 |
挑戦的萌芽研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 研究分野 |
ケミカルバイオロジー
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| 研究機関 | 東京工業大学 |
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研究代表者 |
車 兪徹 東京工業大学, 地球生命研究所, 特任准教授 (40508420)
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| 研究期間 (年度) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2018年度)
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| 配分額 *注記 |
3,510千円 (直接経費: 2,700千円、間接経費: 810千円)
2018年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2017年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2016年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
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| キーワード | セルフリー 系 / nanodisc / GPCR / mRNA display / 抗体医薬 / 創薬基盤研究 / cell-freeシステム / Nanodisc / 無細胞タンパク質合成系 / 受容体膜タンパク質 / 試験管内選択 / ポストゲノム創薬 / セルフリー合成系 |
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| 研究成果の概要 |
Nanodicを加えたcell-free系において、バクテリオロドプシン（bR）を合成し、bRが膜挿入したNDを調製した。これをベイトととし、ランダムなアミノ酸（AA）配列を持つ10AAペプチドのプールから特異的に結合する配列を選択した。選択された配列のDNA情報からさらに次サイクルのライブラリーを作製し、同じセレクションを数回繰り返したあと、選択された配列をNGSにより解析した。その結果、サイクルを重ねるごとにコピー数が増加した配列が入手できた。これらのDNA配列情報からターゲットのbRに特異的に結合するペプチドの裏付け実験を行なっている。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
モノクローナル抗体を作製する従来の方法は、ハイブリドーマ法やファージディスプレイ法があるが、いずれの方法においても、ターゲット抗原発現細胞や精製抗原タンパク質の入手が必要である。申請者は先端技術としての試験管内合成法と、最新の脂質操作技術を用いて、正しい構造を維持した膜タンパク質の合成に成功している。本方法により、これまでの生体や培養細胞を用いた方法と比較して、抗体入手までの時間が大幅に短縮できることが期待できる。このようなセルフリー系による抗原作製と、連続した抗体作製ができるようになれば、抗体医薬創薬研究の１次選別技術として広く応用できることが期待できる。
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