CRISPR/hCas9法による抗原特異的T細胞欠損マウスの作製と評価

• 研究課題/領域番号: 16K14591
• 研究種目: 挑戦的萌芽研究
• 配分区分: 基金
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 渡会 浩志 東京大学, 医科学研究所, 特任准教授 (70415339)
• 研究期間 (年度): 2016-04-01 – 2018-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2017年度)
• 配分額: 3,770千円 (直接経費: 2,900千円、間接経費: 870千円); 2017年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円); 2016年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: ゲノム編集 / CRISPR/Cas9 / iNKT細胞 / 肥満 / CD1d / ゲノム

研究成果の概要

新しいゲノム編集技術であるCRISPR/Cas9法を用いて、Traj18欠損マウス（CRISPR-Traj18-/-）の樹立に成功した。CRISPR-Traj18-/-のT細胞レパトアは正常で、抗原提示分子CD1d拘束性のインバリアント・ナチュラルキラT（iNKT）細胞特異的欠損マウスの樹立に成功した。iNKT細胞の肥満における影響を明らかにするため、高脂肪食負荷試験を行った。その結果、CRISPR-Traj18-/-マウスでは野生型マウスと比べて体重の増加、インスリン抵抗性、グルコース応答性の減弱が認められ、iNKT細胞が肥満やそれに伴うⅠ型糖尿病の増悪に寄与していることが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] Ultrafast confocal fluorescence microscopy beyond the fluorescence lifetime limit (2018)
  • 著者名/発表者名: Mikami H, Harmon J, Kobayashi H, Hamad S, Wang Y, Iwata O, Suzuki K, Ito T, Aisaka Y, Kutsuna N, Nagasawa K, Watarai H, Ozeki Y, Goda K.
  • 雑誌名: Optica 巻: 5 号: 2 ページ: 117-126
  • DOI: 10.1364/optica.5.000117
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Generation and validation of novel anti-bovine CD163 monoclonal antibodies ABM-1A9 and ABM-2D6 (2018)
  • 著者名/発表者名: Yoshinori Shimamoto, Junko Nio-Kobayashi, Hiroshi Watarai, Masashi Nagano, Natsuko Saito, Eiki Takahashi, Hidetoshi Higuchi, Atsushi Kobayashi, Takashi Kimura, Hiroshi Kitamura
  • 雑誌名: Veterinary Immunology and Immunopathology 巻: 198 ページ: 6-13
  • DOI: 10.1016/j.vetimm.2018.02.004
  • NAID: 120006798133
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role of plasmin in the pathogenesis of murine multiple myeloma (2017)
  • 著者名/発表者名: Eiamboonsert S, Salama Y, Watarai H, Dhahri D, Tsuda Y, Okada Y, Hattori K, Heissig B.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 巻: 488 号: 2 ページ: 387-392
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2017.05.062
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] IL-22BP dictates characteristics of Peyer's patch follicle-associated epithelium for antigen uptake. (2017)
  • 著者名/発表者名: Jinnohara T, Kanaya T, Hase K, Sakakibara S, Kato T, Tachibana N, Sasaki T, Hashimoto Y, Sato T, Watarai H, Kunisawa J, Shibata N, Williams I, Kiyono H, and Ohno H.
  • 雑誌名: J. Exp. Med. 巻: 214 号: 6 ページ: 1607-1618
  • DOI: 10.1084/jem.20160770
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Analyses of a Mutant Foxp3 Allele Reveal BATF as a Critical Transcription Factor in the Differentiation and Accumulation of Tissue Regulatory T Cells (2017)
  • 著者名/発表者名: Hayatsu Norihito、Miyao Takahisa、Tachibana Masashi、Murakami Ryuichi、Kimura Akihiko、Kato Takako、Kawakami Eiryo、Endo Takaho A.、Setoguchi Ruka、Watarai Hiroshi、Nishikawa Takeshi、Yasuda Takuwa、Yoshida Hisahiro、Hori Shohei
  • 雑誌名: Immunity 巻: 47 号: 2 ページ: 268-283.e9
  • DOI: 10.1016/j.immuni.2017.07.008
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] A Novel Mouse Model of iNKT Cell-deficiency Generated by CRISPR/Cas9 Reveals a Pathogenic Role of iNKT Cells in Metabolic Disease. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ren Y, Sekine-Kondo E, Shibata R, Kato-Itoh M, Umino A, Yanagida A, Satoh M, Inoue K, Yamaguchi T, Mochida K, Nakae S, Van Kaer L, Iwabuchi K, Nakauchi H, Watarai H.
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 7 号: 1 ページ: 12765-12765
  • DOI: 10.1038/s41598-017-12475-4
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] Differential role of CD1d in the development and functional acquisition of invariant natural killer T cell subtypes. (2017)
  • 著者名/発表者名: Hiroshi Watarai
  • 学会等名: 7th International Workshop of Kyoto T Cell Conference
  • 国際学会
• [学会発表] Obesity Study by Using a Novel Mouse Model of Invariant Natural Killer T Cell-deficiency Generated by CRISPR/Cas9. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yue Ren, Hiroshi Watarai
  • 学会等名: International Symposium of the Institute Network
  • 国際学会
• [学会発表] High-speed stimulated Raman scattering microscopy for studying the metabolic diversity of motile Euglena gracilis. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yuta Suzuki, Yoshifumi Wakisaka, Osamu Iwata, Ayaka Nakashima, Takuro Ito, Misa Hirose, Ryota Domon, Mai Sugawara, Norimichi Tsumura, Hiroshi Watarai, Tomoyoshi Shimobaba, Kengo Suzuki, Keisuke Goda, Yasuyuki Ozeki.
  • 学会等名: SPIE BiOS
  • 国際学会
• [学会発表] A novel mouse model of iNKT cell deficiency generated by CRISPR/Cas9 reveals a pathogenic role of iNKT cells in metabolic disease. (2017)
  • 著者名/発表者名: Hiroshi Watarai
  • 学会等名: International Symposium on CD1-MR1 2017.
  • 国際学会
• [学会発表] A Novel Mouse Model of iNKT Cell-deficiency Generated by CRISPR/Cas9 Technology Reveals a Pathogenic Role of iNKT Cells in Metabolic Disease. (2017)
  • 著者名/発表者名: 任月、近藤悦子、柴田理沙、渡会浩志
  • 学会等名: 第10回セラミド研究会学術集会
• [学会発表] A Novel Mouse Model of iNKT Cell-deficiency Generated by CRISPR/Cas9 Technology Reveals a Pathogenic Role of iNKT Cells in Metabolic Disease. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yue Ren, Etsuko Sekine-Kondo, Risa Shibata, Hiroshi Watarai.
  • 学会等名: 第46回日本免疫学会学術集会
• [学会発表] Euglena gracilisの貯蔵多糖パラミロンの免疫制御の機序の検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 中島綾香、永澤和道、任月、大湖菜央子、鈴木健吾、渡会浩志
  • 学会等名: 第71回日本栄養・食糧学会大会
• [学会発表] 抗ウシCD163モノクローナル抗体の樹立 (2017)
  • 著者名/発表者名: 齊藤 菜津子、嶋本 良則、小林 純子、永野 昌志、渡会 浩志、北村 浩
  • 学会等名: 第150回日本獣医学会学術集会
• [学会発表] CRISPR/Cas9技術を用いたモノ及びジカルボン酸トランスポーター欠損マウスの作製とその疫学的・生化学的解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 山田裕貴、長谷耕二、渡会浩志
  • 学会等名: ConBio2017
• [学会発表] Obesity Study by Using a Novel Mouse Model of Invariant Natural Killer T Cell-deficiency Generated by CRISPR/Cas9 (2016)
  • 著者名/発表者名: 任月、柴田理沙、渡会浩志
  • 学会等名: 第45回日本免疫学会学術集会
  • 発表場所: 沖縄コンベンションセンター
  • 年月日: 2016-12-05
• [学会発表] CRISPR/Cas9によるiNKT細胞欠損マウスの創出と生体機能評価 (2016)
  • 著者名/発表者名: 柴田理沙、任月、渡会浩志
  • 学会等名: 第39回日本分子生物学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜
  • 年月日: 2016-11-30