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P糖タンパク質立体構造のNMR解析を可能にする実験法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 16K15105
研究種目

挑戦的萌芽研究

配分区分基金
研究分野 物理系薬学
研究機関京都大学

研究代表者

加藤 博章  京都大学, 薬学研究科, 教授 (90204487)

連携研究者 宮ノ入 洋平  大阪大学, 蛋白質研究所, 准教授 (80547521)
研究期間 (年度) 2016-04-01 – 2018-03-31
研究課題ステータス 完了 (2017年度)
配分額 *注記
3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円)
2017年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2016年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
キーワード膜タンパク質 / NMR / 多剤耐性 / ATP / トランスポーター / 構造生物学 / 薬理学 / 好熱性真核生物
研究成果の概要

真核生物由来の巨大な膜タンパク質であるP糖タンパク質のNMRによる解析の実現を目指して、安定同位体標識に適した大量発現系の構築と限定的な同位体標識法を検討した。その結果、メタノール資化性酵母Pichia pastorisを用いることにより、15N標識を行って、数十ミリグラムレベルの標識試料タンパク質を精製することができた。また、そのタンパク質を用いてNMR測定を行うことにより、動的構造の解析に適すると考えられるスペクトルを得ることができた。

報告書

(3件)
  • 2017 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2016 実施状況報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて 2018 2017 2016

すべて 学会発表 (6件) (うち国際学会 1件、 招待講演 2件)

  • [学会発表] X-Ray Structures of CmABCB1 in outward- and inward-facing states reveal a conformational exchange allowing the efflux of multidrug, 7th FEBS Special Meeting on ATP-Binding Cassette (ABC) Proteins: From Multidrug Resistance to Genetic Diseases2018

    • 著者名/発表者名
      H. Kato
    • 学会等名
      ABC2018, 2018年3月6日~3月12日(Innsbruck, Austria)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] P糖タンパク質のメカニズムから薬物動態の分子構造基盤をさぐる2017

    • 著者名/発表者名
      加藤博章
    • 学会等名
      フォーラム富山創薬第45回研究会、2017年5月18日、富山県民会館(富山市)
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] P糖タンパク質の基質排出ゲート開閉の構造基盤2017

    • 著者名/発表者名
      ○松岡敬太、山口知宏、中津亨、加藤博章
    • 学会等名
      第17回日本蛋白質科学会年会、2017年6月20日~22日、仙台国際センター(宮城県仙台市)ポスター発表
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] トリプトファンの蛍光を利用した ABC 多剤排出トランスポーターとリガンドとの相互作用解析2017

    • 著者名/発表者名
      ○大城悠暉、山口知宏、松岡敬太、宇都宮裕人、中津亨、加藤博章
    • 学会等名
      第67回日本薬学会近畿支部総会・大会、2017年10月17日、兵庫医療大学(神戸市)ポスター発表
    • 関連する報告書
      2017 実績報告書
  • [学会発表] メタノール資化性酵母発現系を用いて15N安定同位体標識したABCトランスポーターのNMR解析2016

    • 著者名/発表者名
      宇都宮裕人、山口知宏、宮ノ入洋平、小田健人、中津亨、甲斐荘正恒、加藤博章
    • 学会等名
      第16回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場(福岡市)
    • 年月日
      2016-06-07
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書
  • [学会発表] [e-13C]メチオニン標識したABCトランスポーターMsbAの調製とNMR解析2016

    • 著者名/発表者名
      小田健人、山口知宏、宮ノ入洋平、ルカ、宇都宮裕人、中津亨、甲斐荘正恒、加藤博章
    • 学会等名
      第16回日本蛋白質科学会年会
    • 発表場所
      福岡国際会議場(福岡市)
    • 年月日
      2016-06-07
    • 関連する報告書
      2016 実施状況報告書

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公開日: 2016-04-21   更新日: 2019-03-29  

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