microRNA-33a/bによる包括的代謝調節機構の解明と特異的人工核酸の開発

• 研究課題/領域番号: 17H04177
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 循環器内科学
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 尾野 亘 京都大学, 医学研究科, 准教授 (00359275)
• 研究分担者: 堀江 貴裕 京都大学, 医学研究科, 助教 (20565577)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2019年度)
• 配分額: 17,030千円 (直接経費: 13,100千円、間接経費: 3,930千円); 2019年度: 4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円); 2018年度: 4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円); 2017年度: 8,580千円 (直接経費: 6,600千円、間接経費: 1,980千円)
• キーワード: マイクロRNA / iPS細胞 / 核酸医薬 / 代謝 / 人工核酸 / iPSC

研究成果の概要

本研究において、低HDL-C、動脈硬化症、動脈瘤、線維化、NASHを含む慢性炎症、高血圧症、アルツハイマー症、交感神経系の活性化に共通する発症基盤として、生体でのmicroRNA-33a/bの役割を、遺伝子改変iPS細胞、（臓器特異的）遺伝子改変マウスの解析を通して明らかとした。その結果、miR-33a/bが臓器細胞特異的な標的遺伝子を持つことが示された。さらに、miR-33aおよび33bを個別に制御できる架橋型人工核酸を開発し、複数の疾患モデルにおいて治療効果の検討を行った。すでに大動脈瘤については特許申請中であり、今後臨床応用へと発展させることを目標とする。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究により、microRNA-33a/bが低HDL-C、動脈硬化症、動脈瘤、線維化、NASHを含む慢性炎症、高血圧症、アルツハイマー症、交感神経系の活性化に共通する発症基盤であることが明らかになった。これは我々の作成した遺伝子改変マウスによってのみ明らかにすることができた点であり、学術的意義が高いと考えられる。さらに、miR-33aおよび33bを個別に制御できる架橋型人工核酸を開発し、複数の疾患モデルにおいて治療効果の検討を行っている。すでに大動脈瘤については治療法の特許申請中であり、今後さらに治療可能な疾患が増えることが予想されるため、臨床的・社会的意義も高いと考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] MiR-33a is a therapeutic target in SPG4-related hereditary spastic paraplegia human neurons (2019)
  • 著者名/発表者名: Nakazeki F、Tsuge I、Horie T、Imamura K、Tsukita K、Hotta A、Baba O、Kuwabara Y、Nishino T、Nakao T、Nishiga M、Nishi H、Nakashima Y、Ide Y、Koyama S、Kimura M、Tsuji S、Naitoh M、Suzuki S、Izumi Y、Kawarai T、Kaji R、Kimura T、Inoue H、Ono K
  • 雑誌名: Clinical Science 巻: 133 号: 4 ページ: 583-595
  • DOI: 10.1042/cs20180980
  • NAID: 120006937614
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Hepatokine α1-Microglobulin Signaling Exacerbates Inflammation and Disturbs Fibrotic Repair in Mouse Myocardial Infarction (2018)
  • 著者名/発表者名: Hakuno Daihiko、Kimura Masahiro、Ito Shinji、Satoh Junko、Nakashima Yasuhiro、Horie Takahiro、Kuwabara Yasuhide、Nishiga Masataka、Ide Yuya、Baba Osamu、Nishi Hitoo、Nakao Tetsushi、Nishino Tomohiro、Nakazeki Fumiko、Koyama Satoshi、Hanada Ritsuko、Randolph Ruiz R.、Endo Jin、Kimura Takeshi、Ono Koh
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 8 号: 1 ページ: 1-17
  • DOI: 10.1038/s41598-018-35194-w
  • NAID: 120006645320
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] SREBF1/MicroRNA-33b Axis Exhibits Potent Effect on Unstable Atherosclerotic Plaque Formation In Vivo (2018)
  • 著者名/発表者名: Nishino T、Horie T、Baba O、Sowa N、Hanada R、Kuwabara Y、Nakao T、Nishiga M、Nishi H、Nakashima Y、Nakazeki F、Ide Y、Koyama S、Kimura M、Nagata M、Yoshida K、Takagi Y、Nakamura T、Hasegawa K、Miyamoto S、Kimura T、Ono K.
  • 雑誌名: Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology 巻: 38 号: 10 ページ: 2460-2473
  • DOI: 10.1161/atvbaha.118.311409
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Circulating markers of collagen types I, III, and IV in patients with dilated cardiomyopathy: relationships with myocardial collagen expression (2018)
  • 著者名/発表者名: Nagao Kazuya、Inada Tsukasa、Tamura Akinori、Kajitani Kenji、Shimamura Kiyotaka、Yukawa Hiroshi、Aida Kenji、Sowa Naoya、Nishiga Masataka、Horie Takahiro、Makita Toshinori、Ono Koh、Tanaka Masaru
  • 雑誌名: ESC Heart Failure 巻: 5 号: 6 ページ: 1044-1051
  • DOI: 10.1002/ehf2.12360
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Loss of periostin ameliorates adipose tissue inflammation and fibrosis in vivo (2018)
  • 著者名/発表者名: Nakazeki Fumiko、Nishiga Masataka、Horie Takahiro、Nishi Hitoo、Nakashima Yasuhiro、Baba Osamu、Kuwabara Yasuhide、Nishino Tomohiro、Nakao Tetsushi、Ide Yuya、Koyama Satoshi、Kimura Masahiro、Tsuji Shuhei、Sowa Naoya、Yoshida Shigeo、Conway Simon J.、Yanagita Motoko、Kimura Takeshi、Ono Koh
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 8 号: 1 ページ: 8553-8553
  • DOI: 10.1038/s41598-018-27009-9
  • NAID: 120006510274
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] MicroRNA-33 regulates the population of peripheral inflammatory Ly6Chigh monocytes through dual pathways. (2018)
  • 著者名/発表者名: Baba O, Horie T, Hakuno D, Nakashima Y, Nishi H, Kuwabara Y, Nakao T, Nishiga M, Nishino T, Ide Y, Nakazeki F, Koyama S, Kimura M, Hanada R, Kawahara M, Kimura T, and Ono K.
  • 雑誌名: Mol Cell Biol. 巻: 38 号: 14 ページ: 1-17
  • DOI: 10.1128/mcb.00604-17
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Long Non-Coding RNAs as Key Regulators of Cardiovascular Diseases (2018)
  • 著者名/発表者名: Ono K, Kuwabara Y, Horie T, Kimura T.
  • 雑誌名: Circulation Journal 巻: 82 号: 5 ページ: 1231-1236
  • DOI: 10.1253/circj.CJ-18-0169
  • NAID: 130006725985
  • ISSN: 1346-9843, 1347-4820
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Impact of Baseline Thrombocytopenia on Bleeding and Mortality after Percutaneous Coronary Intervention (2018)
  • 著者名/発表者名: Ito Shinya、Watanabe Hirotoshi、Morimoto Takeshi、Yoshikawa Yusuke、Shiomi Hiroki、Shizuta Satoshi、Ono Koh、Yamaji Kyohei、Soga Yoshimitsu、Hyodo Makoto、Shirai Shinichi、Ando Kenji、Horiuchi Hisanori、Kimura Takeshi
  • 雑誌名: Am J Cardiol. 巻: 印刷中 号: 11 ページ: 1304-1314
  • DOI: 10.1016/j.amjcard.2018.02.010
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Prognostic impacto of left ventricular ejection fraction in patients with severe aortic stenosis (2018)
  • 著者名/発表者名: Taniguchi T, Morimoto T, Shiomi H, Ando K, Kanamori N, Murata K, Kitai T, Kadota K, Izumi C, Nakatsuma K, Sasa T, Watanabe H, Kuwabara Y, Makiyama T, Ono K, Shizuta S, Kato T, Saito N, Minatoya K, Kimura T.
  • 雑誌名: JACC Cardiovascular Interv 巻: 11 号: 2 ページ: 145-157
  • DOI: 10.1016/j.jcin.2017.08.036
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Therapeutic angiogenesis by local sustained release of microRNA-126 using poly lactic-co-glycolic acid nanoparticles in murine hindlimb ischemia. (2017)
  • 著者名/発表者名: Tsumaru S, Masumoto H, Minakata K, Izuhara M, Yamazaki K, Ikeda T, Ono K, Sakata R, Minatoya K.
  • 雑誌名: J Vasc Surg. 巻: 印刷中 号: 4 ページ: 1209-1215
  • DOI: 10.1016/j.jvs.2017.08.097
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Preclinical evaluation of a paclitaxel-incorporated nanoparticle-coated balloon in rabbit and porcine models. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto E, Watanabe S, Bao B, Watanabe H, Nakatsuma K, Izuhara M, Ono K, Nakazawa G, Kimura T, Saito N.
  • 雑誌名: Cardiovasc Revasc Med. 巻: 印刷中 号: 4 ページ: 433-437
  • DOI: 10.1016/j.carrev.2017.10.007
  • 査読あり
• [雑誌論文] on behalf of the CREDO-Kyoto PCI/CABG Registry Cohort-2 Investigators. Single-session Versus Staged Procedures for Elective Multi-vessel Percutaneous Coronary Intervention. (2017)
  • 著者名/発表者名: Toyota T, Morimoto T, Shiomi H, Yamaji K, Ando K, Ono K, Shizuta S, Saito N, Kato T, Kaji S, Furukawa Y, Nakagawa Y, Kadota K, Horie M, Kimura T,
  • 雑誌名: Heart. 巻: Nov 16. 号: 11 ページ: 936-944
  • DOI: 10.1136/heartjnl-2017-312117
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Impact of Transient or Persistent Contrast-Induced Nephropathy on Long-Term Mortality after Elective Percutaneous Coronary Intervention. (2017)
  • 著者名/発表者名: Abe M, Morimoto T, Nakagawa Y, Furukawa Y, Ono K, Kato T, Kadota K, Ando K, Ishii M, Masunaga N, Akao M, Kimura T.
  • 雑誌名: Am J Cardiol. 巻: Dec 15;120(12): 号: 12 ページ: 2146-2153
  • DOI: 10.1016/j.amjcard.2017.08.036
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Very long-term clinical outcomes after radiofrequency catheter ablation for atrial fibrillation: A large single-center experience. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kawaji T, Shizuta S, Morimoto T, Aizawa T, Yamagami S, Yoshizawa T, Ota C, Onishi N, Sasaki Y, Yahata M, Nakai K, Hayano M, Nakao T, Hanazawa K, Goto K, Doi T, Ono K, Kimura T.
  • 雑誌名: Int J Cardiol. 巻: 249 ページ: 204-213
  • DOI: 10.1016/j.ijcard.2017.09.023
• [雑誌論文] Genetic Ablation of MicroRNA-33 Attenuates Inflammation and Abdominal Aortic Aneurysm Formation via Several Anti-Inflammatory Pathways. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nakao T, Horie T, Baba O, Nishiga M, Nishino T, Izuhara M, Kuwabara Y, Nishi H, Usami S, Nakazeki F, Ide Y, Koyama S, Kimura M, Sowa N, Ohno S, Aoki H, Hasegawa K, Sakamoto K, Minatoya K, Kimura T, Ono K.
  • 雑誌名: Arterioscler Thromb Vasc Biol. 巻: 37 号: 11 ページ: 2161-2170
  • DOI: 10.1161/atvbaha.117.309768
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Imbalanced expression of polycistronic miRNA in acute myeloid leukemia. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kotaki R, Higuchi H, Ogiya D, Katahira Y, Kurosaki N, Yukihira N, Ogata J, Yamamoto H, Mohamad Alba S, Azhim A, Kitajima T, Inoue S, Morishita K, Ono K, Koyama-Nasu R, Kotani A.
  • 雑誌名: Int J Hematol. 巻: 106 号: 6 ページ: 811-819
  • DOI: 10.1007/s12185-017-2314-1
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Smoking cessation reduces the lectin-like low-density lipoprotein receptor index, an independent cardiovascular risk marker of vascular inflammation (2017)
  • 著者名/発表者名: Komiyama Maki、Wada Hiromichi、Ono Koh、Yamakage Hajime、Satoh-Asahara Noriko、Shimada Sayaka、Akao Masaharu、Morimoto Tatsuya、Shimatsu Akira、Takahashi Yuko、Sawamura Tatsuya、Hasegawa Koji
  • 雑誌名: Heart and Vessels 巻: 33 号: 1 ページ: 9-16
  • DOI: 10.1007/s00380-017-1026-z
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Nardilysin is a promising biomarker for the early diagnosis of acute coronary syndrome (2017)
  • 著者名/発表者名: Chen Po-Min、Ohno Mikiko、Hiwasa Takaki、Nishi Kiyoto、Saijo Sayaka、Sakamoto Jiro、Morita Yusuke、Matsuda Shintaro、Watanabe Shin、Kuwabara Yasuhide、Ono Koh、Imai Masao、Inoue Katsumi、Murai Tatsuya、Inada Tsukasa、Tanaka Masaru、Kita Toru、Kimura Takeshi、Nishi Eiichiro
  • 雑誌名: International Journal of Cardiology 巻: 243 ページ: 1-8
  • DOI: 10.1016/j.ijcard.2017.04.047
  • NAID: 130007900462
  • 査読あり
• [雑誌論文] Transradial versus transfemoral approach in patients undergoing primary percutaneous coronary intervention for ST-elevation acute myocardial infarction: insight from the CREDO-Kyoto AMI registry. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yamashita Y, Shiomi H, Morimoto T, Yaku H, Kaji S, Furukawa Y, Nakagawa Y, Ando K, Kadota K, Abe M, Akao M, Nagao K, Shizuta S, Ono K, Kimura T
  • 雑誌名: Heart Vessels. 巻: 32 号: 12 ページ: 1936-1944
  • DOI: 10.1007/s00380-017-1021-4
  • 査読あり
• [雑誌論文] Asymptomatic Lower Extremity Deep Vein Thrombosis ― Clinical Characteristics, Management Strategies, and Long-Term Outcomes ― (2017)
  • 著者名/発表者名: Yamashita Y, Shiomi H, Morimoto T, Yoneda T, Yamada C, Makiyama T, Kato T, Saito N, Shizuta S, Ono K, Kimura T.
  • 雑誌名: Circulation Journal 巻: 81 号: 12 ページ: 1936-1944
  • DOI: 10.1253/circj.CJ-17-0445
  • NAID: 130006219233
  • ISSN: 1346-9843, 1347-4820
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Development of a Patient-Derived Induced Pluripotent Stem Cell Model for the Investigation of <i>SCN5A</i>-D1275N-Related Cardiac Sodium Channelopathy (2017)
  • 著者名/発表者名: Hayano M, Makiyama T
  • 雑誌名: Circulation Journal 巻: 81 号: 12 ページ: 1783-1791
  • DOI: 10.1253/circj.CJ-17-0064
  • NAID: 130006219109
  • ISSN: 1346-9843, 1347-4820
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Dynamic changes of serum microRNA-122-5p through therapeutic courses indicates amelioration of acute liver injury accompanied by acute cardiac decompensation. (2017)
  • 著者名/発表者名: Satoshi Koyama, Takashi Kuragaichi, Yukihito Sato, Yasuhide Kuwabara, Shunsuke Usami, Takahiro Horie, Osamu Baba, Daihiko Hakuno, Yasuhiro Nakashima, Tomohiro Nishino, Masataka Nishiga, Tetsushi Nakao, Hidenori Arai, Takeshi Kimura, Koh Ono
  • 雑誌名: ESC Heart Failure 巻: 4 号: 2 ページ: 112-121
  • DOI: 10.1002/ehf2.12123
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Significant association of RNF213 p.R4810K, a moyamoya susceptibility variant, with coronary artery disease (2017)
  • 著者名/発表者名: Morimoto T, Mineharu Y, Ono K, Nakatochi M, Ichihara S, Kabata R, Takagi Y, Cao Y, Zhao L, Kobayashi H, Harada K. H, Takenaka K, Funaki T, Yokota M, Matsubara T, Yamamoto K, Izawa H, Kimura T, Miyamoto S, Koizumi A
  • 雑誌名: PLoS ONE 巻: 12 号: 4 ページ: e0175649-e0175649
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0175649
  • NAID: 120006534994
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Incidence and Prognostic Impact of Heart Failure Hospitalization During Follow-up after Primary Percutaneous Coronary Intervention in ST-segment Elevation Myocardial Infarction. (2017)
  • 著者名/発表者名: Taniguchi T, Horie M, et al.
  • 雑誌名: American Journal of Cardiology 巻: 印刷中 号: 11 ページ: 1729-1739
  • DOI: 10.1016/j.amjcard.2017.03.013
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prevention of neointimal formation using miRNA-126-containing nanoparticle-conjugated stents in a rabbit model. (2017)
  • 著者名/発表者名: Izuhara M, Kuwabara Y, Saito N, Yamamoto E, Hakuno D, Nakashima Y, Horie T, Baba O, Nishiga M, Nakao T, Nishino T, Nakazeki F, Ide Y, Kimura M, Kimura T, Ono K.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 12(3) 号: 3 ページ: e0172798-e0172798
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0172798
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Cardiac and Noncardiac Causes of Long-Term Mortality in ST-Segment-Elevation Acute Myocardial Infarction Patients Who Underwent Primary Percutaneous Coronary Intervention. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yamashita Y, Shiomi H, Morimoto T, Yaku H, Furukawa Y, Nakagawa Y, Ando K, Kadota K, Abe M, Nagao K, Shizuta S, Ono K, Kimura T; CREDO-Kyoto AMI Registry Investigators.
  • 雑誌名: Circ Cardiovasc Qual Outcomes. 巻: 10 号: 1
  • DOI: 10.1161/circoutcomes.116.002790
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] MicroRNA-33 Controls Adaptive Fibrotic Response in the Remodeling Heart by Preserving Lipid Raft Cholesterol. (2016)
  • 著者名/発表者名: Nishiga M, Horie T, Kuwabara Y, Nagao K, Baba O, Nakao T, Nishino T, Hakuno D, Nakashima Y, Nishi H, Nakazeki F, Ide Y, Koyama S, Kimura M, Hanada R, Nakamura T, Inada T, Hasegawa K, Conway SJ, Kita T, Kimura T, Ono K.
  • 雑誌名: Circ Res. 巻: - 号: 5 ページ: 835-847
  • DOI: 10.1161/circresaha.116.309528
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [学会発表] 1.SREBF1/MicroRNA-33b axis exhibits potent effect on unstable atherosclerotic plaque formation in vivo. (2018)
  • 著者名/発表者名: Koh Ono
  • 学会等名: XVIIIth International Symposium on Atherosclerosis.
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] SREBF1/MicroRNA-33b axis は不安定プラークの形成に重要である (2018)
  • 著者名/発表者名: 尾野 亘
  • 学会等名: 第50回日本動脈硬化学会総会・学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] Functions of microRNA-33a/b on inflammation and atherosclerosis (2018)
  • 著者名/発表者名: Koh Ono
  • 学会等名: China-Japan International Conference on Atherosclerosis 2018.
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] マイクロRNAと心血管疾患、代謝性疾患 (2018)
  • 著者名/発表者名: 尾野 亘
  • 学会等名: 第66回日本心臓病学会
  • 招待講演
• [学会発表] MicroRNA-33の欠損は複数の抗炎症経路を介して大動脈瘤の形成を抑制する (2018)
  • 著者名/発表者名: 尾野 亘
  • 学会等名: 第59回日本脈管学会総会
  • 招待講演
• [学会発表] A Novel Long Intergenic Noncoding RNA, Lionheart, Protects the Heart from Pressure Overload (2018)
  • 著者名/発表者名: 尾野 亘
  • 学会等名: 第83回 日本循環器学会学術集会
  • 招待講演
• [学会発表] Novel Long Intergenic Noncoding RNA, Lionheart, Guards the Heart from Pressure Overload (2018)
  • 著者名/発表者名: Kuwabara Y, Horie T, Baba O, Nishiga M, Nakao M, Nishino T, Nakazeki F, Koyama S, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: 第82回日本循環器学会
• [学会発表] MicroRNA-33b promotes atherosclerotic plaque formation in Apoe-/- mice (2018)
  • 著者名/発表者名: Nishino T, Horie T, Baba O, Kuwabara Y, Hakuno D, Nakashima Y, Nakao T, Nishiga M, Kimura T, Ono K.
  • 学会等名: 第82回日本循環器学会
• [学会発表] Roles of microRNAs in cardiovascular diseases (2017)
  • 著者名/発表者名: Koh Ono
  • 学会等名: 2nd International Symposium for Noncoding RNA Neo-taxonomy In conjunction with Tokyo RNA Club 23rd meeting
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] MicroRNA-33b promotes atherosclerotic plaque formation in Apoe-/- mice. (2017)
  • 著者名/発表者名: Koh Ono
  • 学会等名: 43rd Naito Conference Noncoding RNA
  • 国際学会
• [学会発表] MicroRNA-33b promotes atherosclerotic plaque formation in Apoe-/- mice. (2017)
  • 著者名/発表者名: Nishino T, Horie T, Kuwabara Y, Nakao T, Nishiga M, Ide Y, Nakazeki F, Koyama S, Kimura M, Kimura T, Ono K
  • 学会等名: American Heart Association Scientific Sessions 2017
  • 国際学会
• [備考] 京都大学循環器内科 分子循環器グループ
  • URL: http://kyoto-u-cardio.jp/kisokenkyu/metabolic/
• [備考] 心血管疾患分子機構解明グループ
  • URL: http://kyoto-u-cardio.jp/kisokenkyu/metabolic/
• [産業財産権] 遺伝性痙性対麻痺(Hereditary Spastic Paraplegia; HSP)SPG4 に対するmicroRNA-33a抑制療法 (2018)
  • 発明者名: 尾野 亘、井上治久、今村恵子、堀江貴裕、中関典子
  • 権利者名: 尾野 亘、井上治久、今村恵子、堀江貴裕、中関典子
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 2018-119251
  • 出願年月日: 2018
• [産業財産権] miR-33bノックインマウスによる非アルコール性脂肪肝炎モデル (2018)
  • 発明者名: 尾野 亘、堀江貴裕、西野共達
  • 権利者名: 尾野 亘、堀江貴裕、西野共達
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2018
  • 外国