エキソソームを介したB型肝炎ウイルスの新規感染経路の解析

• 研究課題/領域番号: 17K15709
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 基金
• 研究分野: ウイルス学
• 研究機関: 公益財団法人東京都医学総合研究所
• 研究代表者: 真田 崇弘 公益財団法人東京都医学総合研究所, ゲノム医科学研究分野, 研究員 (60721272)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2019年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2018年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2017年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
• キーワード: HBV / エキソソーム / ウイルス / B型肝炎ウイルス

研究成果の概要

本研究では、HBV感染個体におけるエキソソームの解析を行った。HBV感染ヒト肝臓置換キメラマウスの血清中に含まれるエキソソーム（HBV-Exo）よりウイルスの遺伝子が検出された。さらにHBV-Exoは肝細胞に接着することが明らかとなった。またHBV-ExoはHBVに対する中和抗体に対して抵抗性を有することが明らかとなった。続いてエキソソームを介したHBV感染を防止すべく、細胞性免疫を誘導する新規予防ワクチンの開発を試みた。HBs-LとHBcをカルボキシポリマー基剤と鼻粘膜に投与することで強い細胞性免疫応答・液性免疫応答を誘導することができた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究により、エキソソームがHBVの産生機構および感染機構に関与していることが示唆された。本研究をさらに進めていくことで、現在問題となっているワクチン接種者でのHBV感染のメカニズムの解明につながっていくものと考えられる。また細胞性免疫を効率的に誘導できる免疫法に関して、基礎的なデータを得ることができた。本研究によって得られたデータは、エキソソームを介した感染を防御できる予防法の構築につながるものと考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Intranasal vaccination with HBs and HBc protein combined with carboxyl vinyl polymer induces strong neutralizing antibody, anti-HBs IgA, and IFNG response (2019)
  • 著者名/発表者名: Sanada Takahiro、Yamamoto Naoki、Kayesh Mohammad Enamul Hoque、Tsukiyama-Kohara Kyoko、Hasegawa Hideki、Miyazaki Takashi、Takano Jun-ichiro、Shiogama Yumiko、Yasutomi Yasuhiro、Goh Yasumasa、Yoshida Osamu、Hiasa Yoichi、Kohara Michinori
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 520 号: 1 ページ: 86-92
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2019.09.072
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Construction of complete Tupaia belangeri transcriptome database by whole-genome and comprehensive RNA sequencing (2019)
  • 著者名/発表者名: Sanada Takahiro、Tsukiyama-Kohara Kyoko、Shin-I Tadasu、Yamamoto Naoki、Kayesh Mohammad Enamul Hoque、Yamane Daisuke、Takano Jun-ichiro、Shiogama Yumiko、Yasutomi Yasuhiro、Ikeo Kazuho、Gojobori Takashi、Mizokami Masashi、Kohara Michinori
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 9 号: 1 ページ: 12372-12372
  • DOI: 10.1038/s41598-019-48867-x
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Avian H5N1 influenza virus infection causes severe pneumonia in the Northern tree shrew (Tupaia belangeri) (2019)
  • 著者名/発表者名: Takahiro Sanada, Fumihiko Yasui, Tomoko Honda, Mohammad Enamul Hoque Kayesh, Jun-ichiro Takano, Yumiko Shiogama, Yasuhiro Yasutomi, Kyoko Tsukiyama-Kohara, and Michinori Kohara
  • 雑誌名: Virology 巻: 529 ページ: 101-110
  • DOI: 10.1016/j.virol.2019.01.015
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Oxidative Stress and Immune Responses During Hepatitis C Virus Infection in Tupaia belangeri (2017)
  • 著者名/発表者名: Kayesh Mohammad Enamul Hoque、Ezzikouri Sayeh、Sanada Takahiro、Chi Haiying、Hayashi Yukiko、Rebbani Khadija、Kitab Bouchra、Matsuu Aya、Miyoshi Noriaki、Hishima Tsunekazu、Kohara Michinori、Tsukiyama-Kohara Kyoko
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 7 号: 1 ページ: 9848-9848
  • DOI: 10.1038/s41598-017-10329-7
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Interferon-β response is impaired by hepatitis B virus infection in Tupaia belangeri (2017)
  • 著者名/発表者名: Kayesh MEH, Ezzikouri S, Chi H, Sanada T, Yamamoto N, Kitab B, Haraguchi T, Matsuyama R, Nkogue CN, Hatai H, Miyoshi N, Murakami S, Tanaka Y, Takano JI, Shiogama Y, Yasutomi Y, Kohara M, Tsukiyama-Kohara K
  • 雑誌名: Virus Research 巻: 237 ページ: 47-57
  • DOI: 10.1016/j.virusres.2017.05.013
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Susceptibility and initial immune response of Tupaia belangeri cells to dengue virus infection (2017)
  • 著者名/発表者名: Kayesh MEH, Kitab B, Sanada T, Hayasaka D, Morita K, Kohara M, *Tsukiyama-Kohara K.
  • 雑誌名: Infect Genet Evol. 巻: 51 ページ: 203-210
  • DOI: 10.1016/j.meegid.2017.04.003
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] HBs-large hybrid protein vaccination via intranasal route with carboxyl vinyl polymer rapidly induced strong neutralizing antibody and anti-HBs IgA. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sanada T, Kayesh MEH, Tsukiyama-Kohara K, Hasegawa H, Goh Y, Miyazaki T, Kohara M.
  • 学会等名: 2019 AASLD THE LIVER MEETING.
  • 国際学会
• [学会発表] Construction of genomic and transcriptomic database of the tree shrew (Tupaia belangeri), which is a small animal model of HBV infection. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sanada T, Tsukiyama-Kohara K, Shin-I T, Yamamoto N, Kayesh MEH, Kohara M.
  • 学会等名: 2019 International HBV Meeting: The Molecular Biology of Hepatitis B Viruses.
  • 国際学会
• [学会発表] Construction of genomic and transcriptomic database of the tree shrew (Tupaia belangeri), which is a small animal model of HBV infection. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sanada T, Tsukiyama-Kohara K, Shin-I T, Yamamoto N, Kayesh MEH, Kohara M.
  • 学会等名: 第67回日本ウイルス学会学術集会
• [学会発表] HBs-large protein vaccination via intranasal route with carboxyl vinyl polymer induces strong neutralizing antibody and anti-HBs IgA (2018)
  • 著者名/発表者名: SanadaT, Kayesh MEH, Chi H, Yamamoto N, Tsukiyama-Kohara K, Yoshida O, Hiasa Y, Hasegawa H, Sugiyama M, Mizokami M, Oda Y, Goh Y, Miyazaki T, Kamishita T, Kohara M.
  • 学会等名: 2018 International HBV Meeting: The Molecular Biology of Hepatitis B Viruses
  • 国際学会
• [学会発表] HBs-large protein vaccination via intranasal route with carboxyl vinyl polymer induces strong neutralizing antibody and anti-HBs IgA (2018)
  • 著者名/発表者名: SanadaT, Kayesh MEH, Chi H, Yamamoto N, Tsukiyama-Kohara K, Yoshida O, Hiasa Y, Hasegawa H, Sugiyama M, Mizokami M, Oda Y, Goh Y, Miyazaki T, Kamishita T, Kohara M.
  • 学会等名: 第66回日本ウイルス学会学術集会
• [学会発表] Transmission of HBV mediated by extracellular vesicles (2017)
  • 著者名/発表者名: Sanada T, Hirata Y, Naito Y, Yamamoto N, Kikkawa Y, Ishida Y, Yamasaki C, Tateno C, Ochiya T, Kohara M.
  • 学会等名: 2017 International HBV Meeting: The Molecular Biology of Hepatitis B Viruses
  • 国際学会
• [学会発表] Transmission of HBV genomic DNA mediated by extracellular vesicles (2017)
  • 著者名/発表者名: Sanada T, Hirata Y, Naito Y, Yamamoto N, Kikkawa Y, Ishida Y, Yamasaki C, Tateno C, Ochiya T, Kohara M.
  • 学会等名: XVII International Congress of Virology
  • 国際学会
• [備考] 公益財団法人 東京都医学総合研究所 感染制御プロジェクト
  • URL: http://www.igakuken.or.jp/infectious/index.html
• [産業財産権] Ｂ型肝炎ウイルスの複製阻害組成物 (2018)
  • 発明者名: 棟方翼、小原道法、真田崇弘
  • 権利者名: 公益財団法人 東京都医学総合研究所
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2018
• [産業財産権] B型肝炎ワクチン (2017)
  • 発明者名: 日浅陽一、小原恭子、小原道法、真田崇弘、郷保正、織田康則
  • 権利者名: 日浅陽一、小原恭子、小原道法、真田崇弘、郷保正、織田康則
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2017
• [産業財産権] 経鼻B型肝炎ワクチン組成物およびその製造方法 (2017)
  • 発明者名: 上下泰造、宮崎隆、小原道法、真田崇弘、日浅陽一、吉田理他
  • 権利者名: 上下泰造、宮崎隆、小原道法、真田崇弘、日浅陽一、吉田理他
  • 産業財産権種類: 特許
  • 出願年月日: 2017