酵母で量産したヒト型ラミニンによる再生医療の新展開

• 研究課題/領域番号: 18108003
• 研究種目: 基盤研究(S)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 応用生物化学
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 新美 友章 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 助教 (30377791)
• 研究分担者: 北川 泰雄 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 教授 (50101168) ; 鳥居 修平 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (60115607) ; 門脇 辰彦 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 准教授 (90313973)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 79,820千円 (直接経費: 61,400千円、間接経費: 18,420千円); 2009年度: 6,500千円 (直接経費: 5,000千円、間接経費: 1,500千円); 2008年度: 25,090千円 (直接経費: 19,300千円、間接経費: 5,790千円); 2007年度: 22,880千円 (直接経費: 17,600千円、間接経費: 5,280千円); 2006年度: 25,350千円 (直接経費: 19,500千円、間接経費: 5,850千円)
• キーワード: 細胞培養 / ラミニン / 脂肪細胞 / 再生医療

研究概要

成熟脂肪細胞が分泌するラミニン-411およびその部分構造がヘパリン結合性増殖因子と競合的に細胞膜表面受容体であるシンデカンに結合することにより、FGF-2の増殖刺激を遮断し、近隣の間葉系幹細胞の脂肪分化を抑制するというモデルを提唱した。また、再生医療に応用可能なラミニンの量産系構築には、トリパノソーマ原虫であるLeishmania tarentolaeのタンパク質発現系が有用であることを示した。

研究成果

• [雑誌論文] Hepatic stellate cells stimulate HCC cell migration vialaminin-5 production. (2011)
  • 著者名/発表者名: Santamato, A., Fransvea, E., Dituri, F., Caligiuri, A., Quaranta, M., Niimi, T., Pinzani, M., Antonaci, S., Giannelli, G.
  • 雑誌名: Clin.Sci. 121 ページ: 159-168
  • 査読あり
• [雑誌論文] The production of recombinant human laminin-332 in a Leishmania tarentolae expression system. (2009)
  • 著者名/発表者名: Phan, H.-P., Sugino, M., Niimi, T.
  • 雑誌名: Protein Expr Purif 68 ページ: 79-84
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel Culture System of Mesenchymal Stromal Cells from Human Subcutaneous Adipose Tissue. (2009)
  • 著者名/発表者名: Iwashima, S., Ozaki, T., Maruyama, S., Saka, Y., Kobori, M., Omae, K., Yamaguchi, H., Niimi, T., Toriyama K., Kamei Y., Torii S., Murohara, T., Yuzawa, Y., Kitagawa Y., Matsuo, S.
  • 雑誌名: Stem Cells Dev. 18 ページ: 533-543
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression and chain assembly of human laminin-332 in an insect cell-free translation system. (2008)
  • 著者名/発表者名: Phan, H.-P., Ezure, T., Ito, M., Kadowaki, T., Kitasawa, Y., Niimi, T.
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Biochem. 72 ページ: 1847-1852
  • NAID: 10027530048
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cryptic fragment α4 LG4-5 derived from laminin α4 chain inhibits de novo adipogenesis by modulating the effect of fibroblast growth factor-2. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yamashita, H., Goto, C., Tajima, R., Koparal, A.T., Kobori M., Ohki, Y, Shitara, K., Narita, R., Toriyama K., Torii S., Niimi, T., Kitagawa, Y.
  • 雑誌名: Dev.Growth Diff. 50 ページ: 97-107
  • NAID: 10021095600
  • 査読あり
• [雑誌論文] Recombinant sendai virus-mediated gene transfer to adipose tissue-derived stein cells (ASCs). (2008)
  • 著者名/発表者名: Yukawa, H., Noguchi, H., Oishi, K., Miyazaki T., Kitasawa, Y., Inoue, M., Hasegawa, M., Hayashi S.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 17 ページ: 43-50
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cryopreservation of mouse adipose tissue-derived stem/progenitor cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Oishi, K., Noguchi, H., Yukawa, H., Miyazaki T., Kato, R., Kitasawa, Y., Ueda, M., Hayashi, S.
  • 雑誌名: Cell Transplant. 17 ページ: 35-41
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cryptic fragment α4 LG4-5 derived from laminin α4 chain inhibits de novo a dipogenesis by modulating the effect of fibroblast growth factor-2 (2008)
  • 著者名/発表者名: Yamashita, H., et al
  • 雑誌名: Development, Growth & Differentiation 50 ページ: 97-1007
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Sp family of transcription factors regulates the human laminin α1 gene in JAR choriocarcinoma cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Niimi, T., Hayashi, Y., Sekiguchi, K., Kitasawa, Y.
  • 雑誌名: Biochim.Biophys.Acta. 1759 ページ: 573-579
  • 査読あり
• [雑誌論文] 脂肪組織由来幹細胞のマクロファージ様挙動 (2006)
  • 著者名/発表者名: 宮崎隆道, 北川泰雄
  • 雑誌名: 再生医療 5 ページ: 497-501
  • 査読あり
• [雑誌論文] 脂肪組織由来幹細胞発見の経緯と臨床応用にっいて (2006)
  • 著者名/発表者名: 北川泰雄, 小堀雅登, 鳥山和宏, 亀井譲, 鳥居修平
  • 雑誌名: 形成外科 49 ページ: 1087-1104
• [雑誌論文] The Sp family of transcription factors regulates the human laminin alpha 1 gene in JAR choriocarcinoma cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Niimi, T. et al.
  • 雑誌名: Biochimica et Biophysica Acta 1759 ページ: 573-579
• [雑誌論文] ヒト脂肪由来幹細胞発見の経緯と臨床応用について (2006)
  • 著者名/発表者名: 北川泰雄他
  • 雑誌名: 形成外科 49 ページ: 1087-1104
• [学会発表] Development of mass production system on the basement membrane protein laminin. (2010)
  • 著者名/発表者名: 新美友章
  • 学会等名: International symposium 2010 for Healthcare
  • 発表場所: Woosuk University, Jeoniu, Korea
• [学会発表] 新美友章骨粗鬆症モデルマウスにおける脂肪由来幹細胞を用いた再生治療の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 山崎浩志, 坂洋祐, 丸山彰一
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: パシフイコ横浜
• [学会発表] The production and purification of recombinant human Laminin-332 in Lelshmania tarentolae expression system (2009)
  • 著者名/発表者名: Sugino M., Phan, H.-P., Niimi T.
  • 学会等名: 第8回環太平洋結合組織学会シンポジウム・第41回日本結合組織学会学術大会・第56回マトリックス研究会大会合同学術集会
  • 発表場所: 湘南国際村センター
• [学会発表] Leishmania tarentolae発現系を用いた基底膜蛋白質の生産 (2009)
  • 著者名/発表者名: 杉野麻梨沙, Phan Phuong Hoang, 新美友章
  • 学会等名: 日本農芸化学会2009年度大会
  • 発表場所: 福岡国際会議場
• [学会発表] 無細胞蛋白質合成系を用いたラミニン鎖会合におけるジスルフィド結合様式の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: Phan Phuong Hoang, 江連徹, 伊東昌章, 門脇辰彦, 新美友章
  • 学会等名: BMB2008(第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会)
  • 発表場所: 神戸国際会議場
• [学会発表] 無細胞蛋白質合成系を用いたラミニンサブユニット会合機構の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: Phan Phuong Hoang, 江連徹, 伊東昌章、門脇辰彦, 北川泰雄, 新美友章
  • 学会等名: 第40回日本結合組織学会学術大会・第55回マトリックス研究会大会合同学術集会
  • 発表場所: 駒場エミナース
• [学会発表] 骨粗鬆症モデルマウスへの脂肪組織由来幹細胞の尾静脈注入による骨密度上昇 (2007)
  • 著者名/発表者名: 今泉正恭, 北川泰雄
  • 学会等名: 日本農芸化学会2007年度大会
  • 発表場所: 東京大学
• [学会発表] 脂肪組織由来自家幹細胞の臨床応用の可能性 (2007)
  • 著者名/発表者名: 北川泰雄
  • 学会等名: 第19回代用臓器・再生医学研究会
  • 発表場所: 北海道大学
• [学会発表] Selective expansion of mesenchymal stem cells by culturing stromal vascular fraction obtained from human omentum in low serum medium. (2006)
  • 著者名/発表者名: Toriyama K., Omae, K, Yamaguchi, H., Imaizumi M., Yamauchi, Y., Kamei, Y., Torii S., Kitagawa Y.
  • 学会等名: The 4^<th> Meeting of International Fat Applied Technology Society
  • 発表場所: Baton Rouge USA
• [学会発表] Macrophage-like behavior of adipose-derived stem cells in co-culture with adipocytes and their debris. (2006)
  • 著者名/発表者名: Miyazaki, T., Toriyama, K., Torii, S., Kitagawa, Y.
  • 学会等名: The 4^<th> Meeting of International Fat Applied Technology Society
  • 発表場所: Baton Rouge USA
• [学会発表] Transient increase of bone mineral density by tail vein injection of adipose-derived mesenchymal stem cells into OPG/OCIF-deficient mice as a model of osteoporosis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Imaizumi M., Takamatsu, S., Fuseya, A., Miyazaki, T., Kitagawa Y.
  • 学会等名: The 4^<th> Meeting of International Fat Applied Technology Society
  • 発表場所: Baton Rouge USA
• [学会発表] De nova adipogenesis at the site of injection of alginate in combination with fibroblast growth factor-2 and heparin. (2006)
  • 著者名/発表者名: Miyazaki, T., Yamauchi, Y., Toriyama K., Torii S., Kitagawa Y.
  • 学会等名: The 4^<th> Meeting of International Fat Applied Technology Society
  • 発表場所: Baton Rouge USA
• [学会発表] ラミニンα4鎖の断片はラミニン-8から切断され線維芽細胞増殖の作用を制御する (2006)
  • 著者名/発表者名: 竹ノ内和貴, 後藤千絵, 山下泰恒, 田島理恵, Ayse Tanse Koparal, 小堀雅登, 大木裕司, 設楽研也, 鳥山和宏, 鳥居修平, 北川泰雄
  • 学会等名: 日本農芸化学会中部支部第147回例会
  • 発表場所: 名古屋大学
• [学会発表] Adipose-derived stem cells with muhiple potential of differentiation (2006)
  • 著者名/発表者名: 北川泰雄
  • 学会等名: 第11回アディポサイエンス研究会シンポジウム
  • 発表場所: 千里阪急ホテル
• [図書] Leishmania tarentolae : A review.Methods in Molecular Biology.((Lorence, A.ed.)(Recombinant protein production in the eukaryotic protozoan parasite)
  • 著者名/発表者名: Niimi, T.
  • 出版者: Humana Press, NJ, USA(in press)
• [図書] Leishmania tarentolae. Methods in Molecular Biology.(Lorence, A.ed.)(Expression of multi-subunit proteins in)
  • 著者名/発表者名: Sugino, M., Niimi, T.
  • 出版者: Humana Press, NJ, USA(in press)
• [備考] ホームページ等
• [産業財産権] ラミニンコイルドコイル(LCC)ドメインヘテロ多量体を含むタンパク質会合体の調製方法 (2008)
  • 発明者名: 新美友章、門脇辰彦、ファン・ホアング・フォング、伊東昌章、江連徹
  • 権利者名: 島津製作所、名古屋大学
  • 産業財産権番号: 2008-055649
  • 出願年月日: 2008-03-06
• [産業財産権] ラミニンコイルドコイル(LCC)ドメインヘテロ多量体を含むタンパク質会合体の調製方法 (2008)
  • 発明者名: 新美友章, 門脇辰彦, ファン・ホアング・フォンダ, 伊東昌章, 江連徹
  • 権利者名: 新美友章, 門脇辰彦, ファン・ホアング・フォンダ, 伊東昌章, 江連徹
  • 産業財産権番号: 2008-055649
  • 出願年月日: 2008-03-06