研究課題/領域番号 |
18790069
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研究種目 |
若手研究(B)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
生物系薬学
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研究機関 | 日本大学 |
研究代表者 |
大橋 祥世 日本大学, 薬学部, 助教 (00385981)
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研究期間 (年度) |
2006 – 2007
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研究課題ステータス |
完了 (2007年度)
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配分額 *注記 |
3,500千円 (直接経費: 3,500千円)
2007年度: 1,700千円 (直接経費: 1,700千円)
2006年度: 1,800千円 (直接経費: 1,800千円)
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キーワード | 神経細胞 / mRNA輸送 / RNA結合タンパク |
研究概要 |
Purα-mRNPに含まれる新規タンパクC9orf10のポリソーム結合領域を解析するため、RNA結合性があると予測されるC端側のグリシンリッチな部分(GFP-GG)とその領域を除いた部分(GFP-delta GG)のGFP融合タンパク質を作製した。これらtruncateをNG108-15細胞内で発現させ、sucrose gradientにより解析したところ、GFP-C9orf10はポリソームの遠心パターンと同様の挙動を示した。一方で、GFP-GGとGFP-delta GGについては、リボソームサブユニットに結合している遠心パターンであった。この結果から、C9orf10は全長がないとポリソームには結合しないことが示唆された。これまでに、C9orf10がpoly(A)mRNAを介してポリソームに結合していることを報告しているが、C9orf10にはC端側のグリシンリッチな部分(Gly-rich)のほかに膜結合モチーフ(TM)が4箇所存在する。そこで、これらの構造が細胞内分布にどのように関係するかを調べた。その結果、C9orf10のN末端側にあるTM1、TM2のみを融合したGFPタンパク質は、シスゴルジ領域に局在し、いくつかのマーカータンパク質と共局在した。また以前に、C端側のグリシンリッチな部分は核に集積することを観察したが、この領域にあるRGG配列あるいはGRG配列のR(リジン)をA(アラニン)に変換したところ、核への集積は抑制された。このことは、核への集積にRが必要であることを示唆している。
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