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酵素複合体メタボロン研究の新展開:酵素群の膜上提示技術がもたらすブレークスルー

研究課題

研究課題/領域番号 18H03938
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分一般
審査区分 中区分38:農芸化学およびその関連分野
研究機関東北大学

研究代表者

中山 亨  東北大学, 工学研究科, 教授 (80268523)

研究分担者 飯嶋 益巳  東京農業大学, 応用生物科学部, 准教授 (40390728)
山下 哲  金沢大学, 物質化学系, 准教授 (70361186)
黒田 俊一  大阪大学, 産業科学研究所, 教授 (60263406)
研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2021-03-31
研究課題ステータス 完了 (2021年度)
配分額 *注記
44,460千円 (直接経費: 34,200千円、間接経費: 10,260千円)
2020年度: 13,780千円 (直接経費: 10,600千円、間接経費: 3,180千円)
2019年度: 14,560千円 (直接経費: 11,200千円、間接経費: 3,360千円)
2018年度: 16,120千円 (直接経費: 12,400千円、間接経費: 3,720千円)
キーワードフラボノイド / メタボロン / タンパク質間相互作用 / カルコン異性化酵素類似タンパク質 / カルコン合成酵素 / カルコン異性化酵素 / カルコンイソメラーゼ / リポソーム / シトクロムP450
研究成果の概要

フラボノイドメタボロンの構成と小胞体膜上の形成様式を明らかにし,代謝チャネリングにおけるメタボロン形成の重要性を検証した.フラボノイド生合成の鍵酵素カルコン合成酵素CHSの生成物特異性を矯正し,陸上植物において普遍的に保存されているタンパク質CHILを見出した.CHSとCHILの立体構造をX線結晶構造解析により明らかにし,得られた構造を用いてフラボノイドメタボロンの構造モデルを構築した.ナノディスクへの膜タンパク質の提示技術の基盤を構築し,膜タンパク質の膜上提示を高速AFMにより観察した.また高速AFM観察によるCHS/CHIL複合体を直接的に観察し,構造モデルと比較した.

研究成果の学術的意義や社会的意義

フラボノイドは,農業,食品工業,医学・薬学・栄養学領域で極めて重要な天然化合物群である.フラボノイドの生合成において,生合成酵素群が複合体(メタボロン)を形成するものと推定されていたが,実証に乏しかった.本研究では,フラボノイドメタボロンの形成様式を具体的に明らかにし,小胞体膜上に形成されるメタボロン解析に必要な,膜タンパク質のナノディスクへの提示技術の基盤を構築した.また,膜タンパク質のナノディスクへの提示やタンパク質間相互作用を,高速AFMにより直接的に観察した.本研究の成果は,この重要な化合物群の進化的側面の理解や生産制御に重要な知見を提供するものである.

報告書

(4件)
  • 2021 研究成果報告書 ( PDF )
  • 2020 実績報告書
  • 2019 実績報告書
  • 2018 実績報告書
  • 研究成果

    (19件)

すべて 2022 2021 2020 2019 2018 その他

すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (11件) (うち国際共著 2件、 査読あり 11件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (7件) (うち招待講演 5件)

  • [国際共同研究] オーボアカデミー大学(フィンランド)

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [雑誌論文] Biochemistry and regulation of aurone biosynthesis2022

    • 著者名/発表者名
      Toru Nakayama
    • 雑誌名

      ioscience, Biotechnology, and Biochemistry

      巻: NA 号: 5 ページ: 557-573

    • DOI

      10.1093/bbb/zbac034

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] ゴマリグナン配糖体の生合成経路の全貌解明2020

    • 著者名/発表者名
      小埜 栄一郎 村田 純 堀川 学 中山 亨
    • 雑誌名

      バイオサイエンスとインダストリー

      巻: 78 ページ: 386-391

    • NAID

      40022368209

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] A conserved strategy of chalcone isomerase-like protein to rectify promiscuous chalcone synthase specificity2020

    • 著者名/発表者名
      T. Waki, A. Hoshino, et al.
    • 雑誌名

      Nature Communications

      巻: 11 号: 1 ページ: 870-870

    • DOI

      10.1038/s41467-020-14558-9

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書 2019 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] 酵素の特異性のあいまいさと植物特化代謝の進化: フラボノイド生合成から示唆されること 特異性を矯正する影武者タンパク質の発見2020

    • 著者名/発表者名
      中山 亨,高橋征司,和氣駿之
    • 雑誌名

      化学と生物

      巻: 58 ページ: 354-361

    • NAID

      130008046468

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Managing enzyme promiscuity in plant specialized metabolism: A lesson from flavonoid biosynthesis2020

    • 著者名/発表者名
      Waki Toshiyuki、Takahashi Seiji、Nakayama Toru
    • 雑誌名

      BioEssays

      巻: 43 号: 3 ページ: 2000164-2000164

    • DOI

      10.1002/bies.202000164

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書 2019 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Crystal structure of chalcone synthase, a key enzyme for isoflavonoid biosynthesis in soybean2020

    • 著者名/発表者名
      Imaizumi Riki、Mameda Ryo、Takeshita Kohei、Kubo Hiroki、Sakai Naoki、Nakata Shun、Takahashi Seiji、Kataoka Kunishige、Yamamoto Masaki、Nakayama Toru、Yamashita Satoshi、Waki Toshiyuki
    • 雑誌名

      Proteins: Structure, Function, and Bioinformatics

      巻: 89 号: 1 ページ: 126-131

    • DOI

      10.1002/prot.25988

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] 酵素の特異性のあいまいさと植物特化代謝の進化: フラボノイド生合成から示唆されること 特異性を矯正する影武者タンパク質の発見2020

    • 著者名/発表者名
      中山 亨,高橋征司,和氣駿之
    • 雑誌名

      化学と生物

      巻: 58 ページ: 354-361

    • NAID

      130008046468

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] タンパク質間相互作用によるフラボノイド生合成酵素の活性制御: カルコン合成酵素の特異性あいまいさの矯正2020

    • 著者名/発表者名
      和氣駿之、高橋征司、中山 亨
    • 雑誌名

      酵素工学ニュース

      巻: 84 ページ: 27-31

    • 関連する報告書
      2019 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Physical interactions among flavonoid enzymes in snapdragon and torenia reveal the diversity in the flavonoid metabolon organization of different plant species2018

    • 著者名/発表者名
      Naoto Fujino, Natsuki Tenma, Toshiyuki Waki, Keisuke Ito, Yuki Komatsuzaki, Keigo Sugiyama, Tatsuya Yamazaki, Saori Yoshida, Masayoshi Hatayama, Satoshi Yamashita, Yoshikazu Tanaka, Reiko Motohashi, Konstantin Denessiouk, Seiji Takahashi and Toru Nakayama
    • 雑誌名

      The Plant Journal

      巻: 94 号: 2 ページ: 372-392

    • DOI

      10.1111/tpj.13864

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Involvement of chalcone reductase in the soybean isoflavone metabolon: identification of GmCHR5, which interacts with 2-hydroxyisoflavanone synthase2018

    • 著者名/発表者名
      Mameda Ryo、Waki Toshiyuki、Kawai Yosuke、Takahashi Seiji、Nakayama Toru
    • 雑誌名

      The Plant Journal

      巻: 96 号: 1 ページ: 56-74

    • DOI

      10.1111/tpj.14014

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] フラボノイドメタボロン 代謝工学へのインパクト2018

    • 著者名/発表者名
      和氣 駿之 高橋 征司 中山  亨
    • 雑誌名

      バイオサイエンスとインダストリー

      巻: 76 ページ: 390-394

    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] 植物フラボノイドの生合成と構造的多様性に関する酵素科学的研究2021

    • 著者名/発表者名
      中山 亨
    • 学会等名
      日本農芸化学会大会2021年度大会(仙台)
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] キンギョソウとベニバナに学ぶ花色発現のフラボノイド酵素科学2021

    • 著者名/発表者名
      中山 亨
    • 学会等名
      日本農芸化学会東北支部 第156回大会 (山形大学 オンライン開催)
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] イソフラボノイド生合成におけるメタボロン形成2021

    • 著者名/発表者名
      中山 亨
    • 学会等名
      第94回日本生化学会大会(横浜 オンライン開催)
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] セサミノール配糖体の分解の代謝生理学2021

    • 著者名/発表者名
      中山 亨
    • 学会等名
      第36回日本ゴマ科学会大会(宮崎 オンライン)
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] フラボノイドの生合成 植物はなぜそれをつくるのか2021

    • 著者名/発表者名
      中山 亨
    • 学会等名
      ビタミンB研究委員会シンポジウム バイオファクター:そのつくられ方と多彩な健康増進効果
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 招待講演
  • [学会発表] Enhancer of flavonoid productionの機能と進化2019

    • 著者名/発表者名
      中山 亨
    • 学会等名
      ビタミンB研究委員会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書
  • [学会発表] タンパク質間相互作用を介したカルコン合成酵素の生成物特異性の制御2018

    • 著者名/発表者名
      中山 亨
    • 学会等名
      酵素補酵素研究会
    • 関連する報告書
      2018 実績報告書

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公開日: 2018-04-23   更新日: 2023-01-30  

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