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支持脂質膜電気泳動法による巨大膜タンパク質調製と高速AFMによる構造動態解析

研究課題

研究課題/領域番号 18K05311
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分37010:生体関連化学
研究機関山形大学

研究代表者

奥野 貴士  山形大学, 理学部, 准教授 (80411031)

研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2021-03-31
研究課題ステータス 完了 (2020年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2019年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2018年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
キーワード膜タンパク質 / 細胞膜 / 巨大細胞膜小胞 / GPMVs / マイクロ流路 / 支持脂質膜電気泳動法 / 高速AFM
研究成果の概要

ヒトの細胞膜で膜の機能を調節する膜タンパク質は、創薬研究における標的タンパク質であり、膜タンパク質の構造や機能解析が、研究推進における重要な役割を担う。しかし、細胞から目的の膜タンパク質を精製するには、豊富な経験と高い技術を必要とするため、膜タンパク質の研究のボトルネックである。本研究は、ヒトの細胞膜で膜の機能を調節する膜タンパク質の新しい調製方法を開発することを目的とした。本研究の実施により、ヒト培養細胞から細胞膜だけを基板に固定した基板支持細胞膜を調製し、ジスフェルリン異常症の原因遺伝子ジスフェルリンの機能解析に成功した。今後は、基板上でのジスフェルリンの濃縮と精製方法を確立する。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究では,ヒト培養細胞から細胞膜の修復に関与するdyferlin膜タンパク質の新しい調製方法を確立し、dyferlinのカルシウム依存的に変化する物性(側方拡散速度)の計測に成功した。機能計測が困難であったdyferlinの機能解析を非常に簡便にすることができることを示すことができた。今後は、dysferlinだけを濃縮/精製する方法や他のタンパク質に応用することで、創薬研究に貢献すうることが期待できる。

報告書

(4件)
  • 2020 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2019 実施状況報告書
  • 2018 実施状況報告書
  • 研究成果

    (1件)

すべて 2019

すべて 学会発表 (1件)

  • [学会発表] ヒト培養細胞から基板支持細胞膜を直接作る研究2019

    • 著者名/発表者名
      土田修平, 鈴木琢斗, 奥野貴士
    • 学会等名
      日本生物物理学会 東北支部会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書

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公開日: 2018-04-23   更新日: 2022-01-27  

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