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メチルセルロースを用いた角膜輪部上皮オルガノイドの長期培養法の確立

研究課題

研究課題/領域番号 18K09461
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分56060:眼科学関連
研究機関東京歯科大学

研究代表者

比嘉 一成  東京歯科大学, 歯学部, 講師 (60398782)

研究期間 (年度) 2018-04-01 – 2021-03-31
研究課題ステータス 完了 (2020年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2020年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2019年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
2018年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
キーワードオルガノイド / 角膜上皮幹細胞 / 細胞治療 / ニッチ / 角膜輪部上皮
研究成果の概要

化粧品や医薬としても利用されているメチルセルロースを用いて、角膜輪部組織から分離したオルガノイドの維持培養法を構築し、角膜再生への応用が可能な移植方法について検討した。培養1ヶ月後においてメチルセルロースを用いても比較的小さいが、オルガノイドを形成した。輪部機能不全モデルのウサギ輪部上皮下にポケットを作成し、移植したところ、移植1週間後において移植部位から角膜に向かって抗ヒト核抗体陽性のkeratin12陽性上皮の進展が観察された。このことから、輪部機能不全モデルのウサギへ移植したオルガノイドは輪部に生着し、角膜に上皮を供給できる可能性が考えられ、移植法としても有用であることが示唆された。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究で申請者が確立してきたオルガノイド作成法は他の上皮細胞の分離法に比べ細胞周囲の環境を崩さずに採取できるため、幹細胞-ニッシェの環境を維持していると考えられる。また、異種由来成分が含まれるマトリゲルに変わりすでに化粧品や医薬としても利用されているメチルセルロースを用いてオルガノイド培養法を確立できたことは大きな進歩であり、再生医療新法下で角膜再生への応用が可能な移植法を確立することができたことから、今後、輪部機能不全を伴った難治性の疾患に対する上皮細胞供給の拡大が期待される。

報告書

(4件)
  • 2020 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2019 実施状況報告書
  • 2018 実施状況報告書
  • 研究成果

    (6件)

すべて 2021 2020 2019

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] Human corneal limbal organoids maintaining limbal stem cell niche function.2020

    • 著者名/発表者名
      10.Higa K, Higuchi J, Kimoto R, Miyashita H, Shimazaki J, Tsubota K, Shimmura S.
    • 雑誌名

      Stem Cell Res.

      巻: Sep 30;49 ページ: 102012-102012

    • DOI

      10.1016/j.scr.2020.102012

    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] メチルセルロースを用いたヒト角膜輪部オルガノイドの培養2021

    • 著者名/発表者名
      比嘉一成、樋口順子、木本玲緒奈、宮下英之、島崎 潤、坪田一男、榛村重人
    • 学会等名
      第45回角膜学会総会・第37回日本角膜移植学会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] ヒト角膜輪部オルガノイド培養におけるメチルセルロースの応用2021

    • 著者名/発表者名
      比嘉一成、樋口順子、木本玲緒奈、宮下英之、島崎 潤、坪田一男、榛村重人
    • 学会等名
      第20回日本再生医療学会総会
    • 関連する報告書
      2020 実績報告書
  • [学会発表] Human limbal organoid transplantation in a rabbit limbal deficiency model.2019

    • 著者名/発表者名
      Higa, K; Higuchi, J; Kimoto, R; Miyashita, H; Shimazaki, J; Tsubota, K; Shimmura, S
    • 学会等名
      The Association for Research in Vision and Ophthalmology- Meeting 2019
    • 関連する報告書
      2019 実施状況報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 輪部機能不全モデルウサギへの角膜輪部オルガノイド移植2019

    • 著者名/発表者名
      比嘉一成、樋口順子、木本玲緒奈、宮下英之、島崎潤、坪田一男、榛村重人
    • 学会等名
      角膜間ファランス2019
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書
  • [学会発表] 角膜輪部オルガノイドの輪部機能不全モデルへの移植2019

    • 著者名/発表者名
      比嘉一成、樋口順子、木本玲緒奈、宮下英之、島崎潤、坪田一男、榛村重人
    • 学会等名
      第18回日本再生医療学会
    • 関連する報告書
      2018 実施状況報告書

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公開日: 2018-04-23   更新日: 2022-01-27  

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