胎便性腹膜炎モデルマウスに対する薬物的HO-1誘導/MSCs投与併用療法の開発

• 研究課題/領域番号: 18K15710
• 研究種目: 若手研究
• 配分区分: 基金
• 審査区分: 小区分52050:胎児医学および小児成育学関連
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 藤岡 一路 神戸大学, 医学部附属病院, 講師 (20568810)
• 研究期間 (年度): 2018-04-01 – 2020-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2019年度)
• 配分額: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2019年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円); 2018年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
• キーワード: 胎便性腹膜炎 / 炎症性疾患 / ヒト胎便 / 早産児マウス敗血症モデル / モデルマウス / 糞便懸濁液 / HO-1 / 間葉系幹細胞 / 胎便 / 胎便懸濁液 / 新生仔マウス / 新生児 / 炎症 / 細菌感染 / 動物モデル / 消化酵素 / 胎便性腹膜炎モデル / ヘムオキシゲナーゼ-1

研究成果の概要

胎便性腹膜炎は、胎生期の腸管穿孔により、無菌性の胎便が腹腔内に漏出して生じる化学性腹膜炎と定義される。本研究では、Cecal Slurry法による敗血症モデルマウス作成技術を応用して、ヒト胎便懸濁液（Meconium slurry, MS）の腹腔内投与による胎便性腹膜炎モデルマウス作成を試みた。
MSは、肛囲刺激により排泄させた新鮮胎便をPBSに懸濁して作成した。次いで、4日齢マウスへMSを200μL腹腔内投与し、24時間後の体重増加率、7日間生存率をPBS投与群（Veh群）と比較した。MS群では、Veh群と比較して、体重増加率の減退、死亡率の増加を認め、胎便性腹膜炎の病態を模倣すると考えた。

研究成果の学術的意義や社会的意義

胎便性腹膜炎は、周産期の難治性疾患であり、胎生期の腸管穿孔により無菌性の胎便が腹腔内に漏出して生じる化学性腹膜炎と定義される。一方、その病態を反映する動物モデルが無く、有効な治療法もない。
本研究では、「胎便性腹膜炎の病態解明のための疾患モデル動物は確立できるか？」という学術的問いに解答するために、申請者の新生児モデルマウス作成技術を駆使し、胎便性腹膜炎モデルマウスを作製・解析し、新規治療法開発のための基盤を確立した。本モデルマウスの確立により、今後、薬物的ヘムオキシゲナーゼ-1誘導、間葉系幹細胞投与などの新規治療法の有効性の検討が可能となり、本研究成果の学術的意義は大きいと考えている。

研究成果

• [雑誌論文] Recombinant human thrombomodulin attenuated sepsis severity in a non-surgical preterm mouse model (2020)
  • 著者名/発表者名: Ashina Mariko、Fujioka Kazumichi、Nishida Kosuke、Okubo Saki、Ikuta Toshihiko、Shinohara Masakazu、Iijima Kazumoto
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 10 号: 1 ページ: 333-333
  • DOI: 10.1038/s41598-019-57265-2
  • NAID: 120006877475
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Case report of eight pregnant women with syphilis. (2020)
  • 著者名/発表者名: Nakasuji Y, Tanimura K, Sasagawa Y, Imafuku H, Morizane M, Fujioka K, Ohji G, Yamada H.
  • 雑誌名: J Infect Chemother. 巻: 26(3) 号: 3 ページ: 298-300
  • DOI: 10.1016/j.jiac.2019.10.016
  • NAID: 120006886619
  • 査読あり
• [雑誌論文] Insulin Therapy for Hyperglycemia in Neonatal Sepsis Using a Preterm Mouse Model (2019)
  • 著者名/発表者名: Miyauchi Harunori、Fujioka Kazumichi、Okubo Saki、Nishida Kosuke、Ashina Mariko、Ikuta Toshihiko、Okata Yuichi、Maeda Kosaku、Iijima Kazumoto、Bitoh Yuko
  • 雑誌名: Pediatrics International 巻: - 号: 5 ページ: 581-586
  • DOI: 10.1111/ped.14126
  • NAID: 120006864552
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Clinical factors associated with congenital cytomegalovirus infection: A cohort study of pregnant women and newborns. (2019)
  • 著者名/発表者名: Uchida A, Tanimura K, Morizane M, Fujioka K, Morioka I, Oohashi M, Minematsu T, Yamada H.
  • 雑誌名: Clin Infect Dis. 巻: Epub 号: 11 ページ: 2833-2839
  • DOI: 10.1093/cid/ciz1156
  • NAID: 120006975760
  • 査読あり
• [雑誌論文] Pharmacokinetic assessment of alprazolam-induced neonatal abstinence syndrome using physiologically based pharmacokinetic model (2019)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto Kazuhiro、Fukushima Sachiyo、Mishima Yui、Hashimoto Mari、Yamakawa Kei、Fujioka Kazumichi、Iijima Kazumoto、Yano Ikuko
  • 雑誌名: Drug Metabolism and Pharmacokinetics 巻: 34 号: 6 ページ: 400-402
  • DOI: 10.1016/j.dmpk.2019.09.002
  • NAID: 120006775971
  • 査読あり
• [雑誌論文] Incidence and Neonatal Risk factors of Short Stature and Growth Hormone treatment in Japanese Preterm Infants Born Small for Gestational Age. (2019)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto M, Nagano N, Awano H, Ohyama S, Fujioka K, Iwatani S, Urakami T, Iijima K, Morioka I.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 9(1) 号: 1 ページ: 12238-12238
  • DOI: 10.1038/s41598-019-48785-y
  • NAID: 120006719426
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Diagnostic Value of Cytomegalovirus IgM Antibodies at Birth in PCR-Confirmed Congenital Cytomegalovirus Infection (2019)
  • 著者名/発表者名: Ohyama Shohei、Fujioka Kazumichi、Fukushima Sachiyo、Abe Shinya、Ashina Mariko、Ikuta Toshihiko、Nishida Kosuke、Matsumoto Hisayuki、Nakamachi Yuji、Tanimura Kenji、Yamada Hideto、Iijima Kazumoto
  • 雑誌名: International Journal of Molecular Sciences 巻: 20 号: 13 ページ: 3239-3239
  • DOI: 10.3390/ijms20133239
  • NAID: 120006712319
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Prediction of poor neurological development in patients with symptomatic congenital cytomegalovirus diseases after oral valganciclovir treatment (2019)
  • 著者名/発表者名: Fukushima Sachiyo、Morioka Ichiro、Ohyama Shohei、Nishida Kosuke、Iwatani Sota、Fujioka Kazumichi、Mandai Tsurue、Matsumoto Hisayuki、Nakamachi Yuji、Deguchi Masashi、Tanimura Kenji、Iijima Kazumoto、Yamada Hideto
  • 雑誌名: Brain and Development 巻: 41 号: 9 ページ: 743-750
  • DOI: 10.1016/j.braindev.2019.04.016
  • NAID: 120006782284
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mesenchymal stem cell therapy for neonatal intraventricular hemorrhage: a long way to go? (2019)
  • 著者名/発表者名: Abe S, Fujioka K.
  • 雑誌名: Ann Transl Med. 巻: 7(5) 号: 5 ページ: 79-79
  • DOI: 10.21037/atm.2018.12.69
  • NAID: 120006954844
  • オープンアクセス
• [雑誌論文] Efficacy of Valganciclovir Treatment Depends on the Severity of Hearing Dysfunction in Symptomatic Infants with Congenital Cytomegalovirus Infection (2019)
  • 著者名/発表者名: Ohyama Shohei、Morioka Ichiro、Fukushima Sachiyo、Yamana Keiji、Nishida Kosuke、Iwatani Sota、Fujioka Kazumichi、Matsumoto Hisayuki、Imanishi Takamitsu、Nakamachi Yuji、Deguchi Masashi、Tanimura Kenji、Iijima Kazumoto、Yamada Hideto
  • 雑誌名: International Journal of Molecular Sciences 巻: 20 号: 6 ページ: 1388-1388
  • DOI: 10.3390/ijms20061388
  • NAID: 120006624227
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] DNA methylation of the Rtl1 promoter in the placentas with fetal growth restriction (2019)
  • 著者名/発表者名: Fujioka Kazumichi、Nishida Kosuke、Ashina Mariko、Abe Shinya、Fukushima Sachiyo、Ikuta Toshihiko、Ohyama Shohei、Morioka Ichiro、Iijima Kazumoto
  • 雑誌名: Pediatrics & Neonatology 巻: S1875-9572(18) 号: 5 ページ: 30550-3
  • DOI: 10.1016/j.pedneo.2019.01.001
  • NAID: 120006733142
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 生体侵襲とショックの基礎病態学、今 Cecal Slurry法を用いた早産児マウス敗血症モデルの利点と課題 (2019)
  • 著者名/発表者名: 藤岡 一路
  • 雑誌名: Shock: 日本Shock学会雑誌 巻: 33巻2号 ページ: 28-33
• [雑誌論文] Hydrogen ventilation combined with mild hypothermia improves short-term neurological outcomes in a 5-day neonatal hypoxia-ischaemia piglet model (2019)
  • 著者名/発表者名: Htun Yinmon、Nakamura Shinji、Nakao Yasuhiro、Mitsuie Tsutomu、Nakamura Makoto、Yamato Satoshi、Jinnai Wataru、Koyano Kosuke、Ohta Kenichi、Morimoto Aya、Wakabayashi Takayuki、Sugino Masashiro、Fujioka Kazumichi、Kato Ikuko、Kondo Sonoko、Yasuda Saneyuki、Miki Takanori、Ueno Masaki、Kusaka Takashi
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 9 号: 1 ページ: 4088-4088
  • DOI: 10.1038/s41598-019-40674-8
  • NAID: 120006599245
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Isolation and Characterization of Human Umbilical Cord-derived Mesenchymal Stem Cells from Preterm and Term Infants (2019)
  • 著者名/発表者名: Iwatani Sota、Yoshida Makiko、Yamana Keiji、Kurokawa Daisuke、Kuroda Jumpei、Thwin Khin Kyae Mon、Uemura Suguru、Takafuji Satoru、Nino Nanako、Koda Tsubasa、Mizobuchi Masami、Nishiyama Masahiro、Fujioka Kazumichi、Nagase Hiroaki、Morioka Ichiro、Iijima Kazumoto、Nishimura Noriyuki
  • 雑誌名: Journal of Visualized Experiments 巻: 143 号: 143 ページ: 1-1
  • DOI: 10.3791/58806
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Neonatal vitamin K deficiency in the son of a mother with short bowel syndrome (2018)
  • 著者名/発表者名: Ashina Mariko、Fujioka Kazumichi、Nishida Kosuke、Iijima Kazumoto
  • 雑誌名: Pediatrics International 巻: 60 号: 10 ページ: 991-992
  • DOI: 10.1111/ped.13684
  • 査読あり
• [雑誌論文] Feeding interval and use of donor breast milk for very low birthweight infants: A?nationwide survey in Japan (2018)
  • 著者名/発表者名: Ashina Mariko、Fujioka Kazumichi、Totsu Satsuki、Shoji Hiromichi、Miyazawa Tokuo、Wada Kazuko、Iijima Kazumoto、Morioka Ichiro
  • 雑誌名: Pediatrics & Neonatology 巻: S1875-9572(18) 号: 3 ページ: 30235-3
  • DOI: 10.1016/j.pedneo.2018.07.006
  • NAID: 120006647361
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Evaluation index for asymmetric ventricular size on brain magnetic resonance images in very low birth weight infants (2018)
  • 著者名/発表者名: Ikuta Toshihiko、Mizobuchi Masami、Katayama Yoshinori、Yoshimoto Seiji、Ioroi Tomoaki、Yamane Masayuki、Morisawa Takeshi、Takatera Akihiro、Ueda Masaaki、Shibata Akio、Maeyama Kaori、Mandai Tsurue、Fujioka Kazumichi、Nishimura Noriyuki、Iijima Kazumoto、Morioka Ichiro
  • 雑誌名: Brain and Development 巻: 40 号: 9 ページ: 753-759
  • DOI: 10.1016/j.braindev.2018.05.007
  • NAID: 120006873025
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hepatitis B vaccine: Immunogenicity in an extremely low-birthweight infant (2018)
  • 著者名/発表者名: Yamana Keiji、Iwatani Sota、Fujioka Kazumichi、Iijima Kazumoto、Morioka Ichiro
  • 雑誌名: Pediatrics International 巻: 60 号: 5 ページ: 489-490
  • DOI: 10.1111/ped.13547
  • NAID: 120006873024
  • 査読あり
• [雑誌論文] A genome-wide association study identifies only two ancestry specific variants associated with spontaneous preterm birth. (2018)
  • 著者名/発表者名: Rappoport N, Toung J, Hadley D, Wong RJ, Fujioka K, Jelliffe-Pawlowski LL, Gould JB, Darmstadt GL, Wang X, Bustamante CD, Snyder MP, Ziv E, Patsopoulos NA, Muglia LJ, Burchard E, Shaw GM, O'Brodovich HM, Stevenson DK, Butte AJ, Sirota M, et al.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 8(1) 号: 1 ページ: 226-226
  • DOI: 10.1038/s41598-017-18246-5
  • NAID: 120006599244
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] ヒト胎便懸濁液の腹腔内投与による胎便性腹膜炎モデルマウスと早産児マウス敗血症モデルの比較 (2019)
  • 著者名/発表者名: 芦名 満理子, 藤岡 一路, 仲宗根 瑠花, 永井 貞之, 菅 秀太郎, 阿部 真也, 福嶋 祥代, 大山 正平, 生田 寿彦, 西田 浩輔, 飯島 一誠
  • 学会等名: 日本新生児成育医学会
• [学会発表] ヒト胎便懸濁液の腹腔内投与による胎便性腹膜炎モデルマウスの作成 (2019)
  • 著者名/発表者名: 芦名 満理子, 宮内 玄徳, 西田 浩輔, 藤岡 一路
  • 学会等名: 日本Shock学会
• [学会発表] モデルマウス及び患者検体を用いた胎便性腹膜炎の病態解明と新規治療法の開発 (2019)
  • 著者名/発表者名: 藤岡 一路, 芦名 満理子, 宮内 玄徳
  • 学会等名: 日本小児科学会
• [学会発表] ヒト胎便懸濁液の腹腔内投与による胎便性腹膜炎モデルマウス作成の試み (2019)
  • 著者名/発表者名: 藤岡 一路, 芦名 満理子, 宮内 玄徳, 阿部 真也, 福嶋 祥代, 大山 正平, 生田 寿彦, 西田 浩輔, 飯島 一誠
  • 学会等名: 日本周産期・新生児医学会
• [学会発表] Cecal Slurry法を用いて作成した新生児腹膜炎性敗血症モデルマウスに対するインスリン療法の保護効果の検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 宮内 玄徳, 藤岡 一路, 大片 祐一, 尾藤 祐子, 會田 洋輔, 冨岡 雄一郎, 中谷 太一, 橘木 由美子, 中井 優美子
  • 学会等名: 日本小児外科学会
• [学会発表] 新生児分野で臨床応用が期待される基礎研究 Cecal slurry法を用いた早産児マウス敗血症モデルの作成と臨床応用 (2018)
  • 著者名/発表者名: 藤岡 一路
  • 学会等名: 第121回日本小児科学会学術集会
• [学会発表] Cacel Slury法を用いた早産児マウス敗血症モデルの利点と課題 (2018)
  • 著者名/発表者名: 藤岡 一路
  • 学会等名: 第33回日本Shock学会総会
• [学会発表] 早産児マウス敗血症モデルにおける酸化ストレスの検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 宮内 玄徳、芦名 満理子、西田 浩輔、藤岡 一路
  • 学会等名: 第33回日本Shock学会総会
• [学会発表] 早産児マウス敗血症モデルにおける肝臓脂質メディエーター動態の検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 芦名 満理子、西田 浩輔、藤岡 一路
  • 学会等名: 第33回日本Shock学会総会
• [学会発表] 早産児マウス敗血症モデルを用いたストレス誘導性高血糖に対するインスリン療法の検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 藤岡 一路、大久保 沙紀、芦名 満理子、生田 寿彦、宮内 玄徳、福嶋 祥代、大山 正平、山名 啓司、飯島 一誠、森岡 一朗
  • 学会等名: 第 54 回日本周産期・新生児医学会学術集会
• [学会発表] 早産児マウス敗血症モデルにおける肝臓脂質メディエーター動態の検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 芦名 満理子、大山 正平、宮内 玄徳、生田 寿彦、福嶋 祥代、大久保 沙紀、山名 啓司、藤岡 一路、飯島 一誠、森岡 一朗、篠原 正和
  • 学会等名: 第 54 回日本周産期・新生児医学会学術集会
• [学会発表] 早産児マウス敗血症モデルにおける肝臓脂質メディエーター動態およびヒトリコンビナントトロンボモジュリンの保護効果の検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 芦名 満理子、藤岡 一路、阿部 真也、福嶋 祥代、大山 正平、生田 寿彦、西田 浩輔、篠原 正和、飯島 一誠
  • 学会等名: 第50回日本小児感染症学会総会・学術集会
• [学会発表] 早産児マウス敗血症モデルにおけるヒト免疫グロブリンおよび生理食塩水を用いた容量負荷の検 討 " (2018)
  • 著者名/発表者名: 阿部 真也、藤岡 一路、芦名 満理子、福嶋 祥代、生田 寿彦、大山 正平、西田 浩輔、飯島 一誠
  • 学会等名: 第63回日本新生児成育医学会・学術集会
• [学会発表] 早産児マウス敗血症モデルにおけるストレス誘導性高血糖と酸化ストレス動態の検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 西田 浩輔、藤岡 一路、芦名 満理子、阿部 真也、福嶋 祥代、生田 寿彦、大山 正平、飯島 一誠
  • 学会等名: 第63回日本新生児成育医学会・学術集会
• [学会発表] The protective role of trained immunity against lethal sepsis in neonatal mice (2018)
  • 著者名/発表者名: Kazumichi Fujioka, Mariko Ashina, Shinya Abe, Sachiyo Fukushima, Toshihiko Ikuta, Shohei Ohyama, Kosuke Nishida, Kazumoto Iijima
  • 学会等名: 第63回日本新生児成育医学会・学術集会
• [学会発表] 後方視的研究の手法（裏技！仮説無きデータ蓄積から始まる研究デザイン） (2018)
  • 著者名/発表者名: 藤岡 一路
  • 学会等名: 第63回日本新生児成育医学会・学術集会
• [学会発表] Insulin Therapy for Stress-Induced Hyperglycemia in Neonatal Sepsis Using A Preterm Mouse Model (2018)
  • 著者名/発表者名: Kazumichi Fujioka, Saki Okubo, Kosuke Nishida, Mariko Ashina, Toshihiko Ikuta, Sachiyo Fukushima, Shohei Ohyama, Keiji Yamana, Ronald J. Wong, Kazumoto Iijima, Ichiro Morioka
  • 学会等名: Pediatric Academic Society Annual Meeting
• [学会発表] The Effect of Recombinant Human Thrombomodulin (rh-TM) in Neonatal Sepsis Using a Preterm Mouse Model (2018)
  • 著者名/発表者名: Kazumichi Fujioka, Kosuke Nishida, Saki Okubo, Mariko Ashina, Toshihiko Ikuta, Sachiyo Fukushima, Shohei Ohyama, Keiji Yamana, Ronald J. Wong, Kazumoto Iijima, Ichiro Morioka
  • 学会等名: Pediatric Academic Society Annual Meeting
• [学会発表] Inhibition of heme oxygenase activity using a microparticle formulation of zinc protoporphyrin in an acute hemolytic newborn mouse model (2018)
  • 著者名/発表者名: Kazumichi Fujioka, Kalish F, Zhao H, Wong RJ, Stevenson DK.
  • 学会等名: The 2nd Korea-Japan-Taiwan Joint Congress on Neonatology
• [学会発表] The Protective Role of Trained Immunity against Lethal Sepsis in Neonatal Mice (2018)
  • 著者名/発表者名: Kazumichi Fujioka, Mariko Ashina, Shinya Abe, Sachiyo Fukushima, Toshihiko Ikuta, Shohei Ohyama, Kosuke Nishida, Kazumoto Iijima
  • 学会等名: The Federations of Asia and Oceania Perinatal Societies 2018
• [学会発表] Abnormal DNA methylation of Retrotransposon-like protein 1 gene in the placenta of severely small for gestational age infants (2018)
  • 著者名/発表者名: Kazumichi Fujioka, Kosuke Nishida, Shinya Abe, Mariko Ashina, Sachiyo Fukushima, Toshihiko Ikuta, Shohei Ohyama, Kazumoto Iijima, Ichiro Morioka
  • 学会等名: The 7th Congress of the European Academy of Paediatric Societies
• [学会発表] The protective role of trained immunity against lethal sepsis in neonatal mice (2018)
  • 著者名/発表者名: Kazumichi Fujioka, Mariko Ashina, Shinya Abe, Sachiyo Fukushima, Toshihiko Ikuta, Shohei Ohyama, Kosuke Nishida, Kazumoto Iijima
  • 学会等名: The 9th Asian Congress of Pediatric Infectious Diseases