マイクロビーズ法によるマウス・ラット感染症の微量検査法の開発

• 研究課題/領域番号: 19200033
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 実験動物学
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 八神 健一 筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 教授 (40166476)
• 研究分担者: 國田 智 筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 講師 (10195472) ; 有川 二郎 北海道大学, 大学院・医学研究科, 教授 (10142704) ; 大沢 一貴 長崎大学, 学内共同利用施設, 教授 (90244756) ; 後藤 一雄 帝京大学, 医療技術学部, 准教授 (00205593) ; 池 郁生 (独)理化学研究所, バイオリソースセンター, 研究員 (40183157) ; 高倉 彰 (財)実験動物中央研究所, ICLASモニタリングセンター, 部長 (60167484)
• 研究協力者: 加藤 花名子 筑波大学, 生命科学動物資源センター, 研究員 ; 亀田 周子 (財)実験動物中央研究所, 研究員 ; 石田 智子 (財)実験動物中央研究所, 研究員
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 48,490千円 (直接経費: 37,300千円、間接経費: 11,190千円); 2009年度: 13,260千円 (直接経費: 10,200千円、間接経費: 3,060千円); 2008年度: 14,300千円 (直接経費: 11,000千円、間接経費: 3,300千円); 2007年度: 20,930千円 (直接経費: 16,100千円、間接経費: 4,830千円)
• キーワード: 実験動物 / 微生物検査 / 血清診断 / マイクロビーズ法 / マウス / ラット / 微生物モニタリング / 微量検査法 / 組換え抗原

研究概要

蛍光マイクロビーズを用いるMFI法は、微量血清で多項目の抗体検査が可能なため、小型実験動物の感染症診断への応用が期待できる。本研究では、MFI法による抗体検査システムを構築するため、マウス・ラットの主要感染症の病原体9種の抗原を作製し、それらの抗原の特異性や検出感度の評価を行った。その結果、MFI法は特異性や検出感度が優れ、同時に多数項目の検査においても特異性や感度の低下が見られなかった。MFI法は実験用マウス・ラットの感染症診断法として優れた方法である。

研究成果

• [雑誌論文] Indirect ELISA and indirect immunofluorescent antibody assay for detecting the antibody against murine norovirus S7 in mice (2010)
  • 著者名/発表者名: Kitagawa Y, Tohya Y, Ike F, Kajita A, Park SJ, Ishii Y, Kyuwa S, Yoshikawa Y.
  • 雑誌名: Exp Anim. 59(1) ページ: 47-55
  • NAID: 10027852595
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification and characterization of hemolysin-like proteins similar to RTX toxin in Pasteurella pneumotropica (2009)
  • 著者名/発表者名: Sasaki H, Kawamoto E, Tanaka Y, Sawada T, Kunita S, Yagami K.
  • 雑誌名: J Bacteriol 191 ページ: 3698-705
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular detection of murine norovirus from experimentally and spontaneously infected mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Goto K, Hayashimoto N, Yasuda M, Ishida T, Kameda S, Takakura A, Itoh T.
  • 雑誌名: Exp Anim. 58(2) ページ: 135-40
  • NAID: 10024838273
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular epidemiological and serological studies of hantavirus infection in northern Vietnam (2009)
  • 著者名/発表者名: Truong TT, Yoshimatsu K, Araki K, Lee BH, Nakamura I, Endo R, Truong UN, Arikawa J.
  • 雑誌名: J Vet Med Sci. 71(10) ページ: 1357-63
  • NAID: 130000134301
  • 査読あり
• [雑誌論文] わが国の実験用マウスにおけるマウスノロウイルスの汚染状況 (2009)
  • 著者名/発表者名: 後藤一雄
  • 雑誌名: LABIO 21 38 ページ: 9-13
• [雑誌論文] Identification and characterization of hemolysin-like proteins similar to RTX toxin in Pasteurella pneumotropica (2009)
  • 著者名/発表者名: Sasaki H., et al.
  • 雑誌名: Journal of Bacteriology 191 ページ: 3698-3705
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative analysis of Pasteurella pneumotropica isolates from laboratory mice and rats (2009)
  • 著者名/発表者名: Sasaki H., et al.
  • 雑誌名: Antonie Van Leewenhoek 95 ページ: 311-317
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular detection of murine norovirus from experimentally and spontaneously infected mice (2009)
  • 著者名/発表者名: 後藤一雄, et al.
  • 雑誌名: Experimental Animals 58 ページ: 135-140
  • NAID: 10024838273
  • 査読あり
• [雑誌論文] First trial in the developmental phase of the "Performance Evaluation Program based on the ICLAS animal quality network program : self-assessment of microbiological monitoring methods using test samples supplied by ICLAS. (2009)
  • 著者名/発表者名: 後藤一雄, et al.
  • 雑誌名: Experimental Animals 58 ページ: 47-52
  • NAID: 10024837980
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation and identification procedure for Staphylococcus aureus in laboratory mice and rats by combined use of chromogenic X-SA agar and specific polymerase chain reaction. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hayashimoto, N., et al.
  • 雑誌名: Journal of Veterinary Medical Sciences 71 ページ: 27-32
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular epidemiological and serological studies of hantavirus infection in Northern Vietnam (2009)
  • 著者名/発表者名: Thang T.T., et al.
  • 雑誌名: Journal of Veterinary Medical Science. 71 ページ: 1357-1363
  • 査読あり
• [雑誌論文] マウス導入時検疫におけるHelicobacter診断の問題点 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大沢牧子, ほか
  • 雑誌名: 九州実験動物雑誌 25 ページ: 43-48
  • 査読あり
• [雑誌論文] 国内分離リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)2株におけるマウス病原性比較 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高木利一, ほか
  • 雑誌名: 九州実験動物雑誌 25 ページ: 37-42
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation and identification procedure for Staphylococcus aureus in laboratory mice and rats by combined use of chromogenic X-SA agar and specific polymerase chain reaction. (2009)
  • 著者名/発表者名: Hayashimoto, N., Goto, K., Takak ura, A. and Itoh, T.
  • 雑誌名: J. Vet. Med. Sci. 71 ページ: 27-32
  • NAID: 110007055381
  • 査読あり
• [雑誌論文] First trial in the developmental phase of the "Performance Evaluation Program" based on the ICLAS animal quality network program: self-asses sment of microbiological monitoring methods using test samples supplied by ICLAS (2009)
  • 著者名/発表者名: Goto, K., Hayashimoto, N., Ishida, T., Takakura, A. and Kagiyama. N.
  • 雑誌名: Exp. Anim. 58 ページ: 47-52
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of the antibody to lymphocytic choriomeningitis virus in sera of laboratory rodents infected with viruses of laboratory and newly isolated strains,by ELISA using purified recombinant nucleoprotein (2009)
  • 著者名/発表者名: Takimoto K, Taharaguchi M, Morik awa S, Ike F, Yamada YK.
  • 雑誌名: Exp. Anim. 57 ページ: 357-365
  • NAID: 10024166444
  • 査読あり
• [雑誌論文] わが国のマウス・ラット動物実験施設の微生物汚染の現状 (2008)
  • 著者名/発表者名: 高倉彰
  • 雑誌名: LABIO 21 31 ページ: 26-28
  • NAID: 40015821939
• [雑誌論文] Study of a Bordetella hiniii isolate froM a laboratory mouse (2008)
  • 著者名/発表者名: Hayashimoto, N., Yasuda, M., Got o, K., Takakura, A. and Ifoh, T
  • 雑誌名: Comp. Med. 58 ページ: 440-446
  • 査読あり
• [雑誌論文] Experimental infection study of Pasteurella pneumotropica and V-factor dependent Pasteurellaceae for F344-rnu rats (2008)
  • 著者名/発表者名: Hayashimoto, N., Yasuda, M., Uen o, M., Goto, K., and Takakura, A
  • 雑誌名: Exp. Anim. 57 ページ: 57-63
  • NAID: 130000068003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation of Streptobacillus moniliformis from a pet rat. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hayashimoto, N., Yoshida, H., Go to, K., and Takakura, A.
  • 雑誌名: J. Vet. Med. Sci. 70 ページ: 493-495
  • NAID: 110006688956
  • 査読あり
• [雑誌論文] Experimental infection study of Pasteurella pneumotropica and V-factor dependent Pasteurellaceae for F344-rnu rats. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hayashimoto, N., Yasuda, M., Ueno, M., Goto, K., and Takakura, A.
  • 雑誌名: Experimental Animal 57 ページ: 57-63
  • NAID: 130000068003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genes encoded within 8q24 on the amplicon of a large extrachromosomal element are selectively repressed during the terminal differentationof HL-60 cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Hirano T, Ike F, Murata T, Obata Y, Utiyama H, Yokoyama KK
  • 雑誌名: Mutat Res 640 ページ: 97-106
  • 査読あり
• [雑誌論文] Specific and quantitative detection of PCR products from Clostridium piliforme, Helicobacter bilis, H. hepaticus, and mouse hepatitis virus infected mouse samples using a newly developed electrochemical DNA chip (2007)
  • 著者名/発表者名: Goto K, Horiuchi H, Shinohara H, Motegi K, Hashimoto K, Hongo S, Gemma N, Hayashimoto N, Itoh T, Takakura A.
  • 雑誌名: J Microbiol Methods 69(1) ページ: 93-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] マウスにおけるパルボウイルス感染 (2007)
  • 著者名/発表者名: 國田智・八神健一
  • 雑誌名: アニテックス 19 ページ: 53-55
• [雑誌論文] Lymphocytic choriomeningitis infection undetected by dirty-bedding sentinel monitoring and revealed after embryo transfer of an inbred strain derived from wild mice (2007)
  • 著者名/発表者名: Ike F, Bourgade F, Ohsawa K, Sato H, Morikawa S, Saijo M, Kurane I, Takimoto K, Yamada YK, Jaubert J, Berard M, Nakata H, Hiraiwa N, Mekada K, Takakura A, Itoh T, Obata Y, Yoshiki A, Montagutelli X.
  • 雑誌名: Comp Med. 57(3) ページ: 272-81
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of the in vitro susceptibility of rodent isolates of Pseudomonas aeruginosa and Pasteurella pneumotropica to enrofloxacin (2007)
  • 著者名/発表者名: Sasaki H, Kawamoto E, Kunita S, Yagami K.
  • 雑誌名: J Vet Diagn Invest. 19(5) ページ: 557-60
  • 査読あり
• [雑誌論文] Specific and quantitative detection of PCR products from Clostridium piliforme, Helicobacter bilis, H. hepaticus, and mouse hepatitis virus infected mouse samples using a newly developed electro chemical DNA chip. (2007)
  • 著者名/発表者名: Goto, K., Horiuchi, H., Shinohara, H., Motegi, K., Hashimoto, K., Hongo, S., Gemma, N., Hayas himoto, N., Itch, T. and Takakura, A.
  • 雑誌名: J. Microbiol. Methods. 69 ページ: 93-99
  • 査読あり
• [雑誌論文] LCMV infection in a wild-derived inbred strain undetected by dirty bedding sentinel health monitoring and revealed after embryo transfer (2007)
  • 著者名/発表者名: Ike, F., Bourgade, F., Ohsawa, K., Sato, H., Morikawa, S., Takimoto, K., J. Jaubert, Berard, M., Nakata, H., Hiraiwa, N., Takakura, A., Itoh, T., Obata, Y., Yoshiki, A. and X. Montagutelli
  • 雑誌名: Comparative Medicine 57 ページ: 272-281
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of the in vitro susceptibility of rodent isolates of Pseudomonas aerughlosa and Pasteurella pneumotropica to emrofloxacin. (2007)
  • 著者名/発表者名: Sasaki H, Kawamoto E, Kunita S, Yagami K.
  • 雑誌名: J Vet Diang Invest 19 ページ: 557-560
  • 査読あり
• [雑誌論文] 人獣共通感染性のマウスのリンパ球性脈絡髄膜炎ウイルスについて (2007)
  • 著者名/発表者名: 高木利一、大沢一貴、佐藤浩
  • 雑誌名: アニテックス 19 ページ: 37-39
• [雑誌論文] マウスにおけるパルボウイルス感染 (2007)
  • 著者名/発表者名: 國田 智、八神健一
  • 雑誌名: アニテックス 19 ページ: 53-55
• [雑誌論文] Comparative analysis of Pasteurella pneumotropica isolates from laboratory mice and rats
  • 著者名/発表者名: Sasaki H, Kawamoto E, Tanaka Y, Sawada T, Kunita S, Yagami K.
  • 雑誌名: Antonie Van Leeuwenhoek
• [学会発表] 蛍光マイクロビーズ法によるマウス・ラット感染症のマルチプレックス抗体検査 (2010)
  • 著者名/発表者名: 國田智, ほか
  • 学会等名: 第57回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-05-12
• [学会発表] 実験用マウスコロニーからのマウスノロウイルスの分離と分子系統学的解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 酒井宏治, ほか
  • 学会等名: 第149回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-03-28
• [学会発表] 蛍光マイクロビーズ (MFI) 法によるマウス・ラット感染症の多項目血清検査 (2010)
  • 著者名/発表者名: 國田智
  • 学会等名: 日本実験動物協会教育セミナー
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-03-06
• [学会発表] 蛍光マイクロビーズ(MFI)法によるマウス・ラット感染症の多項目血清検査 (2010)
  • 著者名/発表者名: 高倉彰
  • 学会等名: (社)日本実験動物協会教育セミナー2010
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2010-03-06
• [学会発表] 蛍光マイクロビーズ(MFI)法によるマウス・ラット感染症の多項目血清検査 (2010)
  • 著者名/発表者名: 國田智
  • 学会等名: (社)日本実験動物協会教育セミナー2010
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-02-27
• [学会発表] 理研BRCの寄託検査からみるマウス系統の微生物性状 (2009)
  • 著者名/発表者名: 池郁生
  • 学会等名: 第38回筑波実験動物研究会講演会
  • 発表場所: つくば
  • 年月日: 2009-11-20
• [学会発表] 国内分離リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス2株のマウス病原性 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高木利一, ほか
  • 学会等名: 第27回九州実験動物研究会総会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 2009-11-14
• [学会発表] Diagnosis Method Based on Sandwich ELISA Using Helicobacter hepaticus-Specific Monoclonal Antibody (2009)
  • 著者名/発表者名: Fuke A., et al.
  • 学会等名: American Association for Laboratory Animal Science(AALAS) National Meeting
  • 発表場所: Denver (USA)
  • 年月日: 2009-11-10
• [学会発表] Diagnosis Method Based on Sandwich ELISA Using Helicobacter hepaticus-Specific Monoclonal Antibody (2009)
  • 著者名/発表者名: 冨家彰浩, ほか
  • 学会等名: American Association for Laboratory Animal Science(AALAS)National Meeting
  • 発表場所: Denver(USA)
  • 年月日: 2009-11-10
• [学会発表] 輸入マウスに感染していたリンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス (2009)
  • 著者名/発表者名: 池郁生, ほか
  • 学会等名: 第9回人と動物の共通感染症研究会学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-11-07
• [学会発表] ハンタウイルス自然感染ラットと実験感染ラットにおける病態の比較 (2009)
  • 著者名/発表者名: 安田俊平, ほか
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学術集会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-10-27
• [学会発表] 理化学研究所バイオリソースセンターの微生物モニタリングについて (2009)
  • 著者名/発表者名: 池郁生, ほか
  • 学会等名: 第37回静岡実験動物研究会研究発表会
  • 発表場所: 掛川
  • 年月日: 2009-10-16
• [学会発表] リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)のマウス病原性比較 (2009)
  • 著者名/発表者名: 高木利一, ほか
  • 学会等名: 第148回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 鳥取
  • 年月日: 2009-09-27
• [学会発表] Helicobacter hepaticus特異的モノクローナル抗体を用いた抗原診断法の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 冨家彰浩, ほか
  • 学会等名: 第56回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 大宮
  • 年月日: 2009-05-14
• [学会発表] パルボウイルス感染による宿主細胞のエピジェネシス (2009)
  • 著者名/発表者名: 今野裕土, ほか
  • 学会等名: 第56回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 大宮
  • 年月日: 2009-05-14
• [学会発表] リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)のマウス病原性比較 (2008)
  • 著者名/発表者名: 高木利一、大沢牧子、大沢一貴、佐藤浩
  • 学会等名: 第26回九州実験動物研究会総会
  • 発表場所: 佐賀
  • 年月日: 2008-11-15
• [学会発表] リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCW)の日本国内分離株の病原性状解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 高木利一、大沢一貴、大沢牧子、池郁生、森田千春、佐藤浩
  • 学会等名: 第146回日本獣医学会
  • 発表場所: 宮崎
  • 年月日: 2008-09-24
• [学会発表] 組換えS抗原を用いたマウス肝炎ウイルス抗体検査法の開発 (2008)
  • 著者名/発表者名: 山田良美、茶谷みゆき、國田智、石田智子、亀田周子、高倉彰、杉山文博、八神健一
  • 学会等名: 第55回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2008-05-16
• [学会発表] Helicobacter hepaticusウレアーゼBサブユニットに対するモノクローナル抗体の作製と診断への応用 (2008)
  • 著者名/発表者名: 冨家彰浩、國田智、後藤一雄、杉山文博、八神健一
  • 学会等名: 第55回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2008-05-16
• [学会発表] 実験・自然感染マウス糞便からのPCR法によるマウスノロウイルスの検出 (2008)
  • 著者名/発表者名: 後藤一雄、林元展人、保田昌彦、石田智子、亀田周子、高倉彰、伊藤豊志雄
  • 学会等名: 第55回目本実験動物学会総会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2008-05-16
• [学会発表] Pasteurella pneumotropicaのRTX toxinの同定と解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 佐々木啓、川本英丁、田中良和、國田智、八神健一
  • 学会等名: 第55回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2008-05-16
• [学会発表] マウスのハンタウイルスに対する細胞性免疫応答の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 吉松組子、垂石みどり、有川二郎
  • 学会等名: 第55回日本実験動物学会総会
  • 発表場所: 仙台
  • 年月日: 2008-05-16
• [学会発表] Detection of emerging zoonotic infection in mice by high sensitive multiplexed microfluidic immunoassay system (2007)
  • 著者名/発表者名: Ike F., et. al.
  • 学会等名: The 11th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences
  • 発表場所: Paris(France)
  • 年月日: 2007-10-07
• [学会発表] Detection of emerging zoonotic infection in mice by high sensitive multiplexed microfluidic immunoassay system (2007)
  • 著者名/発表者名: Ike F, Kajita A, Aoki H, Kase H, Nagamune T, Morikawa S, Obata Y, Yanagata Y,
  • 学会等名: The llth International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences
  • 発表場所: パリ
  • 年月日: 2007-10-07
• [学会発表] 国動協および公私動協傘下の動物実験施設において動物実験に用いられたサルおよびブタのHEV感染調査 (2007)
  • 著者名/発表者名: 山本 博、李 天成、伊藤 薫、越本知大、宮下信泉、有川二郎、八神健一、浅野雅秀、手塚英夫、鈴木 昇、黒澤 努、柴原壽行、古谷正人、毛利資郎、佐藤 浩、大沢一貴、伊吹健太郎、李 成一、喜多正和、武田直和
  • 学会等名: 第54回日本実験動物学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2007-05-24
• [学会発表] Pneumocystis carinii f. sp. Muris検出用PCRプライマーの検索と評価 (2007)
  • 著者名/発表者名: 梶田亜矢子、吉木 淳、池 郁生、
  • 学会等名: 第54回日本実験動物学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2007-05-24
• [学会発表] 腎症候性出血熱(HFRS)とハンタウイルス肺症候群(HPS)-げっ歯類媒介性の人獣共通感染症- (2007)
  • 著者名/発表者名: 有川二郎
  • 学会等名: 第54回日本実験動物学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2007-05-24
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.md.tsukuba.ac.jp/basic-med/yagami/index.html
• [産業財産権] マウス肝炎ウイルスの組換え抗原 (2010)
  • 発明者名: 國田智・八神健一・高倉彰
  • 権利者名: 国立大学法人 筑波大学 財団法人 実験動物中央研究所
  • 産業財産権番号: 2010-061032
  • 出願年月日: 2010-03-17