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進化分子工学技術を用いたアプタマーの作製とその臨床検査法への応用

研究課題

研究課題/領域番号 19590571
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 病態検査学
研究機関昭和大学

研究代表者

荒川 秀俊  昭和大学, 薬学部・薬品分析化学, 教授 (70129807)

研究分担者 大野 賢一  昭和大学, 薬学部, 助教 (20347272)
研究期間 (年度) 2007 – 2009
研究課題ステータス 完了 (2009年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2009年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2008年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2007年度: 1,690千円 (直接経費: 1,300千円、間接経費: 390千円)
キーワード臨床化学 / アプタマー / SELEX / キャピラリー電気泳動 / βアミロイド / アルツハイマー / β-アミロイド / マイクロチップ電気泳動 / RNA / DNA / 人工核酸抗体
研究概要

アプタマーとは、SELEX(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment)法により得られるRNA又は1本鎖DNAで、抗体のように特定の物質に結合することができる核酸分子からできた人工核酸抗体である。アプタマーの特徴は、in vitroでの作製が可能である、免疫寛容などの必要がない、また、アプタマーの塩基配列を一度確定できれば化学合成や酵素核酸増幅法で多量に作製することができる点にある。本研究では、(1)アプタマーを用いた新規分析法の開発、(2)新規アプタマーの創製、(3)アプタマーを用いた臨床診断法の確立を行い、アプタマーを用いた新たな診断試薬の開発を行った。
最初に、トロンビンの高感度アッセイを検出にマイクロチップ電気泳動を用いて開発した。この実験では、トロンビン1 pmolが検出できた。次に、臨床上重要なホルモンであるHMGに対するアプタマーをSELEX法により調製し、そして得られたアプタマーを用いてHMGの分析法を開発した。同様にamyloid-β peptideとoxytocinについても検討した。

報告書

(4件)
  • 2009 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2008 実績報告書
  • 2007 実績報告書
  • 研究成果

    (10件)

すべて 2010 2009 2008 2007 2006 その他

すべて 雑誌論文 (8件) (うち査読あり 5件) 学会発表 (1件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] 生物発光を用いる生体成分の分析2010

    • 著者名/発表者名
      荒川秀俊
    • 雑誌名

      臨床化学 39

      ページ: 30-37

    • NAID

      10026446087

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Development of ultra-high sensitivity bioluminescent enzyme immunoassay for hepatitis B virus surface antigen using firefly luciferase2009

    • 著者名/発表者名
      荒川秀俊
    • 雑誌名

      LUMINESCENCE 24

      ページ: 294-399

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Development of bioluminescent pyrophosphate assay using pyruvate phosphate dikinase and its application to single-nucleotide2008

    • 著者名/発表者名
      Hidetoshi Arakawa
    • 雑誌名

      Analytical Biochemistry 379

      ページ: 86-90

    • 関連する報告書
      2008 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] アプタマーを活用した分析化学(特集)2007

    • 著者名/発表者名
      荒川秀俊
    • 雑誌名

      臨床化学 36(4)

      ページ: 108-115

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [雑誌論文] 〓 generation of hydrogen peroxide using isoluminol-microperoxidase in &2007

    • 著者名/発表者名
      Hidetoshi Arakawa
    • 雑誌名

      Luminescence 22

      ページ: 245-250

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] アプタマーを活用した分析化学2007

    • 著者名/発表者名
      荒川 秀俊
    • 雑誌名

      臨床化学 36

      ページ: 108-115

    • NAID

      10021186279

    • 関連する報告書
      2007 実績報告書
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Application of microchip electrophoresis in the analysis of RNA aptamer-protein interactions2006

    • 著者名/発表者名
      F. Nishikawa, H. Arakawa, S. Nishikawa
    • 雑誌名

      Nucleic Acids Research 25

      ページ: 369-382

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [雑誌論文] Development of novel RNA aptamer and its ligand binding assay on microchip electrophoresis

    • 著者名/発表者名
      K. Ohno, T. Nakata, F. Nishikawa, S. Nishikawa, H. Arakawa
    • 雑誌名

      Nucleic Acids Research, in submit.

    • 関連する報告書
      2009 研究成果報告書
  • [学会発表] The development of ultra-high sensitive bioluminescence enzyme immunoassay for hepatitis B virus antigen using firefly luciferase as2009

    • 著者名/発表者名
      荒川秀俊
    • 学会等名
      2009AACC annyual meeting
    • 発表場所
      米国、シカゴ
    • 年月日
      2009-07-21
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [図書] 現代界面コロイド化学の基礎2009

    • 著者名/発表者名
      荒川秀俊
    • 総ページ数
      4
    • 出版者
      丸善株式会社
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書

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公開日: 2007-04-01   更新日: 2016-04-21  

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