腎マクラデンサ細胞におけるシグナル伝達の分子機構解明

• 研究課題/領域番号: 19790169
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 生理学一般
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 安岡 有紀子 北里大学, 医学部, 助教 (50348504)
• 研究期間 (年度): 2007 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 3,790千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 690千円); 2009年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円); 2008年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2007年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
• キーワード: マクラデンサ / NKCC2 / nNOS / TGF / レニン / アルドステロン / バソプレッシン / V1aR / アシドーシス / TGFシグナル / Na^<+->K^<+->2Cl-輸送体 / フロセミド / 尿細管糸球体フィードバック機構 / Na^+-K^+-2Cl^-輸送体

研究概要

腎マクラデンサ(MD)は糸球体濾液中の塩濃度変化を感知し、糸球体濾過量を調節する液性シグナルを、傍糸球体装置間質に放出する。MD管腔内液[Cl^-]変化を感知するのは、MD細胞管腔膜に発現するNa^+-K^+-2Cl^-輸送体(NKCC2)を介するNaCl流入量変化と考えられている。マウス不死化MD細胞株(NE-MD)は、NKCC2阻害薬であるフロセミド添加により、時間・Ca^<2+>依存的にnNOS蛋白の発現量およびNO産生量を増加させた。しかし、フロセミド投与により発現誘導された蛋白(約60 kDa)は、脳や骨格筋のnNOS蛋白(約160 kDa)と比べて小さかった。このnNOS蛋白(候補)の同定と分子構造を調べるために二次元電気泳動を行い、発現増加したnNOS蛋白(候補)を質量分析(MALDI-TOF-MS)し、ペプチド断片のMS解析からnNOS蛋白と同定し、還元ドメインの欠失を明らかにした。

研究成果

• [雑誌論文] Low [NaCl]-induced neuronal nitric oxide synthase (nNOS) expression and NO generation are regulated by intracellular pH in a mouse macula densa cell line (NE-MD). (2009)
  • 著者名/発表者名: Kawada H, Yasuoka Y, Fukuda H, Kawahara K
  • 雑誌名: J Physiol Sci. 59(3) ページ: 165-73
  • NAID: 10025218598
  • 査読あり
• [雑誌論文] Low [NaCl]-induced neuronal nitric oxide synthase (nNOS) expression and NO generation are regulated by intracellular pH in a mouse macula densa cell line (NE-MD). (2009)
  • 著者名/発表者名: Hideaki Kawada, Yukiko Yasuoka, Hidekazu Fukuda, Katsumasa Kawahara
  • 雑誌名: Journal of physiological sciences. 59 ページ: 165-73
  • NAID: 10025218598
  • 査読あり
• [雑誌論文] Low [NaCl]-induced neuronal nitric oxide synthase (nNOS) expression and NO generation are regulated by intracellular pH in a mouse macula densa cell line (NE-MD) (2009)
  • 著者名/発表者名: Kawada H, Yasuoka Y, ets
  • 雑誌名: The Journal of Physiological Science (In press)
  • NAID: 10025218598
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vasopressin regulates the renin- angiotensin- aldosterone system via V1a receptors in macula densa cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: Aoyagi T, Izumi Y, Hiroyama M, Matsuzaki T, Yasuoka Y, Sanbe A, Miyazaki H, Fujiwara Y, Nakayama Y, Kohda Y, Yamauchi J, Inoue T, Kawahara K, Saito H, Tomita K, Nonoguchi H, Tanoue A
  • 雑誌名: Am J Physiol Renal Physiol 295
  • 査読あり
• [雑誌論文] Vasopressin regulates the renin-angiotensin-aldosterone system via Vla receptors in macula densa cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Aoyagi T, Yasuoka Y, ets
  • 雑誌名: Am J Physiol Renal PhysioL 295
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regulation of cyclooxygenase-2 (COX-2) expression in cultured mouse macula densa cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Akiba L, Fukuda H, Yasuoka Y, Kawahara K
  • 雑誌名: Kitasato Med J. 37 ページ: 16-21
  • 査読あり
• [雑誌論文] Regiilation of cyclooxygenase-2 (COX-2)expression in culturedmouse macula densa cells. (2007)
  • 著者名/発表者名: Lisa Akiba
  • 雑誌名: Kitasato Med J 37 ページ: 16-21
  • 査読あり
• [学会発表] Upregulation of V1a receptor mRNA by acidosis in TAL and intercalated cells of OMCD in mouse kidney. (2009)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子、小林瑞佳、佐藤雄一、河原克雅
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-08
• [学会発表] Upregulation of Vla receptor mRNA by acidosis in TAL and intercalated cells of OMCD in mouse kidney. (2009)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子、小林瑞佳、佐藤雄一、河原克雅
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
  • 年月日: 2009-12-08
• [学会発表] Acidosis-Induced expressuion of V1a receptor mRNA in mouse kidney distal nephron. (2009)
  • 著者名/発表者名: Yasuoka Y, Kobayashi M, Sato Y, Okamoto H, Kawahara k
  • 学会等名: アメリカ腎臓学会
  • 発表場所: サンディエゴ
  • 年月日: 2009-10-30
• [学会発表] Acidosis-Induced Expression of Vla Receptor mRNA in Mouse Kidney Distal Nephron. (2009)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子、小林瑞佳、佐藤雄一、河原克雅
  • 学会等名: アメリカ腎臟学会
  • 発表場所: 国際会議場サンディゴ(USA)
  • 年月日: 2009-10-30
• [学会発表] Localization and expression of V1aR along the mouse nephron during metabolic acidosis. (2009)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子、小林瑞佳、佐藤雄一、河原克雅
  • 学会等名: 第36回国際生理学会
  • 発表場所: 京都
  • 年月日: 2009-07-30
• [学会発表] localization and expression of VlaR along the mouse nephron during metabolic acidosis. (2009)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子、小林瑞佳、佐藤雄一、河原克雅
  • 学会等名: 第59回国際生理学会
  • 発表場所: 国際会議場(京都)
  • 年月日: 2009-07-30
• [学会発表] A role of Vla receptor (VlaR) in renal H+ excretion : Acid-base balance in mice lacking VlaR. (2009)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子、小林瑞佳、田上昭人、河原克雅
  • 学会等名: 第59回国際生理学会
  • 発表場所: 国際会議場(京都)
  • 年月日: 2009-07-30
• [学会発表] A role of Vla receptor (VlaR) in water/electolyes metabolism : Electrolytes balance in Mice lacking VlaR Mice lacking VlaR. (2009)
  • 著者名/発表者名: 小林瑞佳、安岡有紀子、田上昭人、河原克雅、岡本浩嗣
  • 学会等名: 第59回国際生理学会
  • 発表場所: 国際会議場(京都)
  • 年月日: 2009-07-30
• [学会発表] V1a受容体(V1aR)のマウス腎ネフロン内局在とアシドーシスにおける発現誘導 (2009)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子、小林瑞佳、佐藤雄一、河原克雅
  • 学会等名: 第52回日本腎臓学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-06-15
• [学会発表] 受容体(VlaR)のマウス腎ネフロン内局在とアシドーシスにおける発現誘導 (2009)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子、小林瑞佳、佐藤雄一、河原克雅
  • 学会等名: 第51回日本腎臓学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
  • 年月日: 2009-05-29
• [学会発表] バソプレシンVlaR KOマウスの水電解質調節 (2009)
  • 著者名/発表者名: 小林瑞佳、安岡有紀子、田上昭人、河原克雅、岡本浩嗣
  • 学会等名: 第51回日本腎臓学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜(神奈川)
  • 年月日: 2009-05-29
• [学会発表] マウス腎Na+/H+交換輸送体のネフロン内局在とアシドーシスの影響 (2008)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子、小林瑞佳、川田英明、河原克雅
  • 学会等名: 第50回日本腎臓学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2008-06-01
• [学会発表] 腎マクラデンサ細胞内バソプレッシンVla受容体を介したレニン-アンギオテンシン-アルドステロン系の調節 (2008)
  • 著者名/発表者名: 泉裕一郎、安岡有紀子, 他
  • 学会等名: 第51回日本腎臓学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2008-06-01
• [学会発表] マウス腎マクラデンサ細胞の水チャネル (2008)
  • 著者名/発表者名: 川田英明、安岡有紀子, 他
  • 学会等名: 第51回日本腎臓学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2008-05-31
• [学会発表] 尿細管糸球体フィードバック機構におけるマクラデンサの役割 (2008)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子
  • 学会等名: 第50回日本腎臓学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2008-05-30
• [学会発表] 尿細管糸球体フィードバック機構におけるマクラデンサの役割 (2008)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子
  • 学会等名: 第51回日本腎臓学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2008-05-30
• [学会発表] Acidosis increased expression of NHE3 mRNA at the thick ascending limb of Henles loop but NOT at the proximal convoluted tubule in mouse kidney. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yasuoka Y, Kawada H, Sato Y, Kawahara K
  • 学会等名: 第84回日本生理学会
  • 発表場所: 新宿
  • 年月日: 2008-03-25
• [学会発表] Faint expression of aquaporin (AQP)-1 may explain low water permeability at the luminal membrane of a mouse macula densacells. (2008)
  • 著者名/発表者名: 川田 英明
  • 学会等名: 第84回日本生理学会
  • 発表場所: 新宿
• [学会発表] Regulation of cyclooxygeiiase-2 (COX-2)expression in mousemacula densa cells. (2008)
  • 著者名/発表者名: 福田 英一
  • 学会等名: 第84回日本生理学会
  • 発表場所: 新宿
• [学会発表] Furosemide -inducible expression and activity of neuronal nitricoxide synthase (nNOS)of the mouse macula densa cell line. (2008)
  • 著者名/発表者名: 河原 克雅
  • 学会等名: 第84回日本生理学会
  • 発表場所: 新宿
• [学会発表] マクラデンサと尿糸球体フィードバック機構 (2007)
  • 著者名/発表者名: 河原克雅、安岡有紀子、川田英明、福田英一
  • 学会等名: 第50回日本腎臓学会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2007-05-26
• [学会発表] NEMD細胞におけるNa+輸送関連分子の発現解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 安岡有紀子、川田英明、河原克雅
  • 学会等名: 第50回日本腎臓学会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2007-05-26
• [学会発表] ME-MD細胞におけるNa^+輸送関連分子の発現解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 安岡 有紀子
  • 学会等名: 第50回日本腎臓学会
  • 発表場所: 浜松
• [学会発表] 細胞外(NaCl)低下によるマクラデンサ細胞nNOSの発現と活性調節 (2007)
  • 著者名/発表者名: 川田 英明
  • 学会等名: 第50回日本腎臓学会
  • 発表場所: 浜松
• [学会発表] 腎マクラデンサ細胞におけるシクロオキシゲナーゼ2(COX-2)発現調節機構 (2007)
  • 著者名/発表者名: 福田 英一
  • 学会等名: 第50回日本腎臓学会
  • 発表場所: 浜松
• [学会発表] Expression of aquaporin-1 in a newly established cell line of mouse maculadensa. (2007)
  • 著者名/発表者名: 川田 英明
  • 学会等名: 第5回アクアポリン国際会議
  • 発表場所: 奈良
• [学会発表] Furosemide induced neuronal nitric oxide synthase of the mouse maculadensa cell line lacks a C-tenninal reductase domain, but generates nitricoxide. (2007)
  • 著者名/発表者名: 川田 英明
  • 学会等名: アメリカ腎臓学会
  • 発表場所: サンフランシスコ
• [学会発表] A unique molecular structure of neuronal nitric oxide synthase (nNOS)ofthe mouse macula densa ceU line (NE-MD) may explain distalflow-dependent expression. (2007)
  • 著者名/発表者名: 河原 克雅
  • 学会等名: 国際腎臓学会
  • 発表場所: ウィーン
• [図書] 特集:尿からさぐる病態と疾患、尿量, 比重, 浸透圧腎と透析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 河原克雅、安岡有紀子、小林瑞佳
  • 出版者: 東京医学社
• [図書] 増刊レジデントノート、輸液療法パーフェクト、第3章輸液治療の考え方1. 体液の分布、組成、その評価法 (2009)
  • 著者名/発表者名: 河原克雅、安岡有紀子、川田英明
  • 出版者: 羊土社
• [図書] 増刊レジデントノート輸液療法パーフェクト第3章輸液治療の考え方1.体液の分布、組成、その評価法 (2009)
  • 著者名/発表者名: 河原克雅、安岡有紀子、川田英明
  • 総ページ数: 4
  • 出版者: 羊土社
• [図書] 腎と透析特集:尿からさぐる病態と疾患尿量,比重,浸透圧 (2009)
  • 著者名/発表者名: 河原克雅、安岡有紀子、小林瑞佳
  • 総ページ数: 3
  • 出版者: 東京医学社
• [図書] マクラデンサ細胞とTGF機構、Annual Review腎臓 (2008)
  • 著者名/発表者名: 河原克雅、安岡有紀子
  • 出版者: 中外医学社
• [図書] Annual Review 2008 腎臓-マクラデンサ細胞とTGF機構 (2008)
  • 著者名/発表者名: 河原克雅
  • 出版者: 中外医学社