| 研究課題/領域番号 |
19K10332
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分57060:外科系歯学関連
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
新谷 智章 広島大学, 病院(歯), 講師 (90403518)
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| 研究分担者 |
岡本 哲治 東亜大学, その他の研究科, 教授 (00169153)
林堂 安貴 広島大学, 病院(歯), 講師 (70243251)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
交付 (2022年度)
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| 配分額 *注記 |
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2021年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2020年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
2019年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
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| キーワード | 活性化ビタミンD3 / NF kappa b / micro RNA / MicroRNA / miR-6887-5p / HBp17/FGFBP-1 / エクソソーム / microRNA |
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| 研究開始時の研究の概要 |
活性型ビタミンD3の異性体であるED-71が、転写因子NF-κBシグナル伝達経路を抑制することにより，扁平上皮癌(SCC)/細胞口腔扁平上皮癌(OSCC)細胞のHBp17/FGFBP 発現が抑制された。さらに、in vitroおよびin vivoにおけるSCC/OSCC細胞の増殖抑制効果が認められた。
ED-71添加群および非添加群のA431細胞の培養上清より、exosomeを分離した。miRNAマイクロアレイ法を用いて、exosomal miRNAs発現の網羅的解析を行った結果、ED-71により発現量が2倍以上増加する12種類のexosomal miRNAsを同定した。
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| 研究実績の概要 |
SCC/OSCC細胞において、活性化ビタミンD3(活性化VD3)がNF-κBシグナル経路を抑制することにより、HBp17/FGFBPの発現を抑制することや、SCC/OSCC細胞の培養上清中へのFGF-2の遊離を抑制することを明らかにした。さらに、エルデカルシトール(以下ED-71)は、活性化VD3の2β位にヒドロキシプロポキシル基が導入された活性化VD3の誘導体であり、代謝酵素CYP24A1による代謝を受けにくい特徴を有している。ED-71がVD3と同様にSCC/OSCC細胞の増殖を抑制すること（図4）、ED-71のIC50は活性化VD3の約1/100の低濃度であることを明らかにし、ED-71はA431細胞由来マウス背部皮下腫瘍に対し、増殖抑制効果を示すことを明らかにしたED-71もしくはエタノールを添加したA431細胞の培養上清中のexosomeに含まれるmicroRNA (miRNA)をそれぞれ抽出後、miRNAマイクロアレイ解析にてmiRNA発現の網羅的解析を行なった。HBp17/FGFBP mRNAを標的とするmiR候補を検索した結果、ED-71により発現が上昇するexosomal miRNAとして、miR-6887-5pを同定した。miR-6887-5p mimicを用いてmiR-6887-5pを過剰発現させたSCC/OSCC細胞では、コントロールと比較してHBp17/FGFBP-1の発現抑制を認めた。miR-6887-5p mimicを導入したSCC/OSCC細胞ではコントロールに比べin vitro/in vivoにおける有意な増殖抑制効果を認めた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
新型コロナウイルスの影響で国際学会等で発表およびディスカッションをする機会を得ることができなかったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後、ヌードマウスに腫瘍を移植し、核酸医薬としての臨床応用を目標に抗腫瘍効果を調べる。また、国内・国際学会で発表を行う。
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