| 研究課題/領域番号 |
19K18738
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| 研究種目 |
若手研究
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| 配分区分 | 基金 |
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| 審査区分 |
小区分56050:耳鼻咽喉科学関連
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| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
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研究代表者 |
南方 寿哉 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (10770612)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円)
2020年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
2019年度: 2,340千円 (直接経費: 1,800千円、間接経費: 540千円)
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| キーワード | カルシウム感知受容体 / 内耳特異的ノックアウトマウス / ノックアウトマウス / ダブルノックアウトマウス |
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| 研究開始時の研究の概要 |
CaSRの内耳における役割は現在までほとんど知られていない。我々はこれまでCaSRの内耳における発現を検討し、ウエスタンブロット及び免疫染色にて蝸牛のラセン軸動脈、ラセン靭帯への発現を発見した。
本研究では内耳における薬理学的な機能解析として、内耳への局所的な薬剤投与の行い聴覚への寄与を検討する。
またノックアウトマウスを用い、CaSRが内外リンパ液におけるCa2+ホメオスタシスでどのような位置づけを有するのか、Ca2+ホメオスタシスに寄与しているとして、治療起点として有望かといった、生体内での生理的・病理的な条件下でのCaSRの機能を解析する。
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| 研究実績の概要 |
我々は内耳ラセン靭帯へのカルシウム感知受容体（CaSR）の発現を免疫染色、ウェスタンブロッティング法にて確認した。またカルシウムイメージング法を使用し同部位での発現が機能的な発現であることを確認した。そこでラットを使用し、蝸牛内に正円窓経由にて直接薬剤を投与する方法を開拓し、同法にて蝸牛内に直接CaSR阻害薬であるNPS-2143及び作動薬のR-568を投与し、その際の聴力の変化をABRにてリアルタイムにて測定し投与直ちに聴力が低下することを見出した。
そこでノックアウトマウスを作製しCaSRの内耳での働き、聴力への関与についての検討を行う方針としノックアウトマウスの作製に着手した。しかし、CaSRを単独でノックアウトすると高カルシウム血症にて生後数時間で死亡するため、CASR/PTHダブルノックアウトマウスを作製する方針とした。しかし、ダブルノックアウトマウスも一部を除き大部分は生後数時間で死亡したため内耳特異的にCaSR/PTHをノックアウトさせたマウスの作製を行う方針と、現在他の内耳特異的なノックアウトマウスを参考に作成中である。また同時に一部の生存したCaSR/PTHダブルノックアウトマウスを使用し解析を進めている。
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