一塩基変異を認識し神経疾患原因遺伝子だけを特異的に抑制するRNAi技術の確立

• 研究課題/領域番号: 20390251
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 神経内科学
• 研究機関: 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター
• 研究代表者: 北條 浩彦 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター, 神経研究所神経薬理研究部, 室長 (60238722)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 16,510千円 (直接経費: 12,700千円、間接経費: 3,810千円); 2010年度: 4,160千円 (直接経費: 3,200千円、間接経費: 960千円); 2009年度: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2008年度: 8,060千円 (直接経費: 6,200千円、間接経費: 1,860千円)
• キーワード: 臨床神経分子遺伝学 / RNAi / 変異遺伝子 / 神経変性疾患 / 対立遺伝子特異的抑制 / ハンチントン病 / 脳神経疾患

研究概要

本研究は、疾患原因遺伝子上の変異を目印に、正常遺伝子には影響しないで、その変異を持った病因対立遺伝子だけを特異的に発現阻害する次世代の対立遺伝子特異的RNAiノックダウン技術の確立を行った。本研究の成果により、プリオン病に関連する変異型プリオン遺伝子やハンチントン病の原因遺伝子、変異型ハンチンチン遺伝子に対して疾患原因遺伝子特異的なRNAiノックダウンを誘導するsiRNAを設計することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] トリプレット・リピート病原因遺伝子に対するテーラーメイドRNAiノックダウン (2011)
  • 著者名/発表者名: 高橋理貴,北條浩彦
  • 雑誌名: 実験医学 29 ページ: 931-934
• [雑誌論文] トリプレット・リピート病原因遺伝子に対するテーラーメイドRNAiノックダウン (2011)
  • 著者名/発表者名: 高橋理貴, 北條浩彦
  • 雑誌名: 実験医学 巻: 623 ページ: 931-934
• [雑誌論文] Tailor-made RNAi knockdown against triplet repeat disease-causing alleles (2010)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M., Watanabe S., Murata M., Furuya H., Kanazawa I., Wada K., Hohjoh H.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci USA. 107 ページ: 21731-21736
  • 査読あり
• [雑誌論文] Small RNA class transition from siRNA/piRNA to miRNA during pre-implantation mouse development (2010)
  • 著者名/発表者名: Ohnishi Y., Totoki Y., Toyoda A., Watanabe T., Yamamoto Y., Tokunaga K., Sakaki Y., Sasaki H., Hohjoh H.
  • 雑誌名: Nucl.Acids Res. 38 ページ: 5141-5151
  • 査読あり
• [雑誌論文] Allele-specific silencing by RNA interference. In RNA interference (2010)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦
  • 雑誌名: Methods Mol.Biol. 623 ページ: 67-79
• [雑誌論文] Tailor-made RNAi knockdown against triplet repeat disease-causing alleles. (2010)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M., et al.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci USA. 巻: 107 ページ: 21731-21736
  • 査読あり
• [雑誌論文] Small RNA class transition from siRNA/piRNA to miRNA during pre-implantation mouse development. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ohnishi Y., et al.
  • 雑誌名: Nucl.Acids Res. 巻: 38 ページ: 5141-5151
  • 査読あり
• [雑誌論文] Allele specific silencing by RNA interference.In RNA interference. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hohjoh H.
  • 雑誌名: Methods Mol.Biol. 巻: 623 ページ: 67-79
  • 査読あり
• [雑誌論文] Systematic gene regulation involving miRNAs during neuronal differentiation of mouse P19 embryonic carcinoma cell (2009)
  • 著者名/発表者名: Eda A., Tamura Y., Yoshida M., Hohjoh H.
  • 雑誌名: BBRC 388 ページ: 648-653
  • 査読あり
• [雑誌論文] Three human ARX mutations cause the lissencephaly-like and mental retardation with epilepsy-like pleiotropic phenotypes in mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Kitamura K., Itou Y., Yanazawa M., Ohsawa M., Suzuki-Migishima R., Umeki Y., Hohjoh H., Yanagawa Y., Shinba T., Itoh M., Nakamura K., Goto Y.
  • 雑誌名: Hum.Mol.Genet. 18 ページ: 3708-3724
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular cloning and characterization of the common marmoset huntingtin gene (2009)
  • 著者名/発表者名: Hohjoh H., Akari H., Fujiwara Y., Tamura Y., Hirai H., Wada K.
  • 雑誌名: Gene 432 ページ: 60-66
  • 査読あり
• [雑誌論文] Variation of gene silencing involving endogenous microRNA in mammalian cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Tamura Y., Yoshida M., Ohnishi Y., Hohjoh H.
  • 雑誌名: Mol Biol Rep 36 ページ: 1413-1420
  • 査読あり
• [雑誌論文] 機能性小分子RNAの大規模シークエンス (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐々木裕之,北條浩彦
  • 雑誌名: 実験医学 27 ページ: 14-19
• [雑誌論文] Variation of gene silencing involving endogenous microRNA in mammalian cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Tamura Y., et al.
  • 雑誌名: Mol Biol Rep 36 ページ: 1413-1420
  • 査読あり
• [雑誌論文] Three human ARX mutations cause the lissencephaly-like and mental retardation with epilepsy-like pleiotropic phenotypes in mice (2009)
  • 著者名/発表者名: Kitamura K., et al.
  • 雑誌名: Hum.Mol.Genet 18 ページ: 3708-3724
  • 査読あり
• [雑誌論文] Systematic gene regulation involving miRNAs during neuronal differentiation of mouse P19 embryonic carcinoma cell (2009)
  • 著者名/発表者名: Eda A., et al.
  • 雑誌名: BBRC 388 ページ: 648-653
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular cloning and characterization of the common marmoset huntingtin gene (2009)
  • 著者名/発表者名: Hohjoh H., et al.
  • 雑誌名: Gene 432 ページ: 60-66
  • 査読あり
• [雑誌論文] 機能性小分子RNAの大規模シークエンス (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐々木裕之, 北條浩彦
  • 雑誌名: 実験医学 27 ページ: 14-19
• [雑誌論文] Orphan nuclear receptor NR4A2 expressed in T cells from multiple sclerosis mediates production of inflammatory cytokines (2008)
  • 著者名/発表者名: Doi Y., Oki S., Ozawa T., Hohjoh H., Miyake S., Yamamura T.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci USA. 105 ページ: 8381-8386
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhancement of allele discrimination by introduction of nucleotide mismatches into siRNA in allele-specific gene silencing by RNAi (2008)
  • 著者名/発表者名: Ohnishi Y., Tamura Y., Yoshida M., Tokunaga K., Hohjoh H.
  • 雑誌名: PLoS ONE 3(5)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Variation of gene silencing involving endogenous microRNA in mammalian cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Tamura Y., et al.
  • 雑誌名: Mol Biol Rep (Epub ahead of print)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Enhancement of allele discrimination by introduction of nucleotide mismatches into siRNA in allele-specific gene silencing by RNAi (2008)
  • 著者名/発表者名: Ohnishi Y., et al.
  • 雑誌名: PLoS ONE 3
  • 査読あり
• [雑誌論文] Orphan nuclear receptor NR4A2 expressed in T cells from multiple sclerosis mediates production of inflammatory cytokines (2008)
  • 著者名/発表者名: Doi Y., et al.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci USA 105 ページ: 8381-8386
  • 査読あり
• [学会発表] Detection system for microRNAs using a fibrous DNA chip (2011)
  • 著者名/発表者名: Eda A., Fukushima T., Hohjoh H.
  • 学会等名: 3^<rd> Annual Biomarker Assay Development
  • 発表場所: San Diego, California, USA.
• [学会発表] Detection system for microRNAs using a fibrous DNA chip (2011)
  • 著者名/発表者名: Eda A., et al.
  • 学会等名: 3^<rd> Annual Biomarker Assay Development
  • 発表場所: ヒルトンホテル、サンディエゴ市、USA
• [学会発表] Identification of triplet repeat disease-causing alleles by a novel pull-down method and disease-causing allele-specific silencing by RNAi (2010)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M., Watanabe S., Murata M., Furuya H., Kanazawa I., Wada K., Hohjoh H.
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] Identification of triplet repeat disease causing alleles by a novel pull-down method and disease causing allele-specific silencing by RNAi (2010)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M., et al.
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド、神戸市
  • 年月日: 2010-12-10
• [学会発表] 加齢に伴うマウス脳組織で発現するマイクロRNA(miRNA)の発現プロファイル解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 枝亜希子、福島達伸、北條浩彦
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2010-12-09
• [学会発表] 加齢に伴うマウス脳組織で発現するマイクロRNA(miRNA)の発現プロファイル解析 (2010)
  • 著者名/発表者名: 枝亜希子, その他2名
  • 学会等名: 第33回日本分子生物学会大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド、神戸市
  • 年月日: 2010-12-09
• [学会発表] 疾患原因遺伝子特異的RNAiノックダウン技術の基礎と応用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦
  • 学会等名: H22年度ALSネットワーク研究ミーティング
  • 発表場所: 九州大学大学院生体防御医学研究所
  • 年月日: 2010-11-20
• [学会発表] Identification of triplet repeat disease causing alleles by a novel pull down method and disease causing allele-specific silencing by RNAi (2010)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M., et al.
  • 学会等名: the American Society of Human Genetics
  • 発表場所: コンベンションセンター・ワシントンDC、 USA
  • 年月日: 2010-11-03
• [学会発表] 哺乳動物細胞における機能性小分子RNAの働き:その作用機序と応用研究 (2010)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦
  • 学会等名: 卒後教育委員会後援学術集会
  • 発表場所: 埼玉医科大学ゲノム医学研究センター
  • 年月日: 2010-04-16
• [学会発表] Identification of triplet repeat disease-causing alleles by a novel pull-down method and disease-causing allele-specific silencing by RNAi (2010)
  • 著者名/発表者名: Takahashi M., Watanabe S., Murata M., Furuya H., Kanazawa I., Wada K., Hohjoh H.
  • 学会等名: 60^<th> Annual Meeting of the American Society of Human Genetics
  • 発表場所: Washington DC, DC, USA.
• [学会発表] Systematic gene regulation involving miRNAs during neuronal differentiation of mouse P19 embryonic carcinoma cell (2009)
  • 著者名/発表者名: 枝亜希子、田村美子、吉田満史子、北條浩彦
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会大会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-12
• [学会発表] Systematic gene regulation involving miRNAs during neuronal differentiation of mouse P19 embryonic carcinoma cell (2009)
  • 著者名/発表者名: 枝亜希子, 他3名
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会
  • 発表場所: パシフィコ横浜、横浜市
  • 年月日: 2009-12-12
• [学会発表] MicroRNA modulation of neuronal differentiation (2009)
  • 著者名/発表者名: Hohjoh H
  • 学会等名: Joint Symposium of the 5^<th> Annual Meeting of the Oligonucleotide Therapeutics Society and the 19^<th> Antisense Symposium
  • 発表場所: 九州大学医学部百年講堂、福岡市、日本
  • 年月日: 2009-11-06
• [学会発表] マウス初期胚に存在する機能性small RNAの解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大西悠亮、十時泰、豊田敦、渡部聡朗、山本耕裕、徳永勝士、榊佳之、佐々木裕之、北條浩彦
  • 学会等名: 第82回日本生化学学会大会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] Systematic gene regulation pathway involving functional small RNAs during neuronal differentiation of mouse embryonic carcinoma cell (2009)
  • 著者名/発表者名: Eda A., et al.
  • 学会等名: 第59回アメリカ人類遺伝学会年会
  • 発表場所: ハワイコンベンションセンター、ホノルル市、ハワイ州、USA
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] マウス初期胚に存在する機能性 smal RNAの解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大西悠亮, 他8名
  • 学会等名: 第82回日本生化学学会大会
  • 発表場所: 神戸ポートアイランド、神戸市
  • 年月日: 2009-10-23
• [学会発表] RNAiを用いたアリル特異的発現抑制の評価方法の確立と応用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大西悠亮、徳永勝士、北條浩彦
  • 学会等名: 第54回日本人類遺伝学会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2009-09-23
• [学会発表] RNAiを用いたアリル特異的発現抑制の評価方法の確立と応用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大西悠亮, 他3名
  • 学会等名: 第54回日本人類遺伝学会
  • 発表場所: グランドプリンスホテル高輪、品川、 東京
  • 年月日: 2009-09-23
• [学会発表] Systematic gene regulation pathway involving functional small RNAs during neuronal differentiation of mouse embryonic carcinoma cell (2009)
  • 著者名/発表者名: Eda A., Tamura Y., Yoshida M., Hohjoh H.
  • 学会等名: 59^<th> Annual Meeting of the American Society of Human Genetics
  • 発表場所: Honolulu, Hawaii, USA.
• [学会発表] Gene regulation involving functional small RNAs during neuronal differentiation of mouse P19 embryonic carcinoma cell (2009)
  • 著者名/発表者名: Eda A., Tamura Y., Yoshida M., Hohjoh H.
  • 学会等名: RNAi Europe
  • 発表場所: Berlin, Germany
• [学会発表] Gene regulation involving functional small RNAs during neuronal differentiation of mouse P19 embryonic carcinoma cell (2009)
  • 著者名/発表者名: Eda A., et al.
  • 学会等名: RNAiヨーロッパ
  • 発表場所: Free University、ベルリン市、ドイツ
• [学会発表] マイクロRNAとターゲット遺伝子が関わる遺伝子発現の多様化 (2008)
  • 著者名/発表者名: 田村美子、北條浩彦
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-10
• [学会発表] マウス初期胚に存在する機能性small RNAの解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 大西悠亮、十時泰、豊田敦、渡部聡朗、佐々木裕之、徳永勝士、榊佳之、北條浩彦
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 2008-12-09
• [学会発表] マイクロRNAとターゲット遺伝子が関わる遺伝子発現の多様化 (2008)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦、田村美子
  • 学会等名: 第53回日本人類遺伝学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2008-09-28
• [学会発表] コモン・マーモセットハンチンチン遺伝子のクローニングと解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦、藤原優子、明里宏文、田村美子、和田圭司
  • 学会等名: 第31回日本神経科学大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2008-07-10
• [学会発表] Variation of gene silencing contributes in a variety of gene expression in mammalian cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Hohjoh H., Tamura Y.
  • 学会等名: 58^<th> Annual Meeting of the American Society of Human Genetics
  • 発表場所: Philadelphia, Pennsylvania, USA.
• [学会発表] Sequence analysis of small RNAs present in preimplantation mouse embryos (2008)
  • 著者名/発表者名: Ohnishi Y., Toyoda A., Totoki Y., Watanabe T., Sasaki H., Tokunaga K., Sakaki Y., Hohjoh H.
  • 学会等名: 58^<th> Annual Meeting of the American Society of Human Genetics
  • 発表場所: Philadelphia, Pennsylvania, USA.
• [学会発表] Gene silencing involving endogenous miRNAs contributes in a variety of mammalian cells' gene expression (2008)
  • 著者名/発表者名: Tamura Y., Yoshida M., Ohnishi Y., Hohjoh H.
  • 学会等名: 13^<th> Annual Meeting of the RNA Society
  • 発表場所: Berlin, Germany
• [学会発表] Variation of gene silencing contributes in a variety of gene expression in mammalian cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Hohjoh H., Tamura Y.
  • 学会等名: 第58回アメリカ人類遺伝学会年会
  • 発表場所: フラデルフィア市、ペンシルベニア州
• [学会発表] Sequence analysis of small RNAs present in preimplantaion mouse embryos (2008)
  • 著者名/発表者名: Ohnishi Y., et al.
  • 学会等名: 第58回アメリカ人類遺伝学会年会
  • 発表場所: フラデルフィア市、ペンシルベニア州
• [学会発表] Gene silencing involving endogenous miRNAs contributes in a variety of mammalian cells' gene expression (2008)
  • 著者名/発表者名: Tamura Y., et al
  • 学会等名: 第13回RNA学会
  • 発表場所: ベルリン市、ドイツ
• [学会発表] マウス初期胚に存在する機能性 small RNAの解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 大西悠亮, 他7名
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸市
• [学会発表] マイクロRNAとターゲット遺伝子が関わる遺伝子発現の多様化 (2008)
  • 著者名/発表者名: 田村美子, 北條浩彦
  • 学会等名: 第31回日本分子生物学会
  • 発表場所: 神戸市
• [学会発表] マイクロRNAとターゲット遺伝子が関わる遺伝子発現の多様化 (2008)
  • 著者名/発表者名: 田村美子, 北條浩彦
  • 学会等名: 第53回日本人類遺伝学会
  • 発表場所: 横浜市
• [図書] フォーカストアレイによるマイクロRNA発現解析(監修:金子周一、堀池靖浩、エヌ・ティー・エス)(バイオチップ実用化ハンドブック) (2010)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦
  • 出版者: 羊土社
• [図書] 「フォーカストアレイによるマイクロRNA発現解析」バイオチップ実用化ハンドブック (2010)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦
  • 出版者: エヌ・ティー・エス
• [図書] リアルタイムPCR実験ガイド(編集:北條浩彦) (2008)
  • 著者名/発表者名: 北條浩彦
• [備考] ホームページ等
• [産業財産権] 優性アレル発現抑制剤 (2010)
  • 発明者名: 北條浩彦、高橋理貴
  • 権利者名: 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター
  • 出願年月日: 2010-06-18
• [産業財産権] 優性変異遺伝子発現抑制剤 (2010)
  • 発明者名: 北條浩彦、高橋理貴
  • 権利者名: 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター
  • 出願年月日: 2010-09-30
• [産業財産権] 改良されたsiRNA分子およびこれを用いた遺伝子発現の抑制法 (2010)
  • 発明者名: 北條浩彦
  • 権利者名: 財団法人ヒューマンサイエンス振興財団
  • 取得年月日: 2010-03-25
  • 外国
• [産業財産権] 改良されたsiRNA分子およびこれを用いた遺伝子発現の抑制法 (2010)
  • 発明者名: 北條浩彦
  • 権利者名: 財団法人ヒューマンサイエンス振興財団
  • 取得年月日: 2010-08-27
• [産業財産権] 優性アレル発現抑制剤 (2010)
  • 発明者名: 北條浩彦、高橋理貴
  • 権利者名: 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター
  • 産業財産権番号: 2010-139925
  • 出願年月日: 2010-06-18
• [産業財産権] 優性変異遺伝子発現抑制剤 (2010)
  • 発明者名: 北條浩彦、高橋理貴
  • 権利者名: 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター
  • 産業財産権番号: 2010-222847
  • 出願年月日: 2010-09-30
• [産業財産権] 長鎖繰返し配列を含有する遺伝子又は遺伝子産物の選択的又は優先的回収方法 (2009)
  • 発明者名: 北條浩彦、高橋理貴
  • 権利者名: 財団法人ヒューマンサイエンス振興財団
  • 出願年月日: 2009-12-15
• [産業財産権] 長鎖繰返し配列を含有する遺伝子又は遺伝子産物の選択的又は優先的回収方法 (2009)
  • 発明者名: 北條浩彦, 高橋理貴
  • 権利者名: ヒューマンサイエンス振興財団
  • 産業財産権番号: 2009-283653
  • 出願年月日: 2009-12-15