スプリットルシフェラーゼを用いた単一神経細胞でのCREB活性化計測

• 研究課題/領域番号: 20700331
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 神経化学・神経薬理学
• 研究機関: 富山大学
• 研究代表者: 石本 哲也 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 助教 (40397170)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 3,900千円 (直接経費: 3,000千円、間接経費: 900千円); 2010年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円); 2009年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円); 2008年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
• キーワード: CREB / リン酸化 / ルシフェラーゼ / イメージング

研究概要

cAMP response element binding protein (CREB)は、リン酸化によって活性化される、転写因子である。そのリン酸化を、生きた細胞内で発光により検知するプローブ蛋白質を作製改良した。当初計画した1分子型プローブに加え、2分子型プローブの作製に成功した。これによりリン酸化検出の特異性が飛躍的に上昇した。

研究成果

• [雑誌論文] Real-time monitoring of actin polymerization in living cells using split luciferase.
  • 著者名/発表者名: Ishimoto T, Ozawa T, Mori H.
  • 雑誌名: Bioconjugate Chemistry in press
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bioluminescence imaging of Arc expression enables detection of activity-dependent and plastic changes in the visual cortex of adult mice.
  • 著者名/発表者名: Izumi H, Ishimoto T, Yamamoto H, Nishijo H, Mori H.
  • 雑誌名: Brain Struct Funct. in press
  • 査読あり
• [学会発表] Actin polymerization and its role in UV-induced HEK293T cell death. (2011)
  • 著者名/発表者名: 石本哲也, 小澤岳昌, 森寿
  • 学会等名: 第84回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2011-03-24
• [学会発表] Actin polymerization and its role in UV-induced HEK293T cell death (2011)
  • 著者名/発表者名: 石本哲也, 小澤岳昌, 森寿
  • 学会等名: 第84回日本薬理学会年会
  • 発表場所: (誌上発表(学会中止のため))
  • 年月日: 2011-03-24
• [学会発表] Bioluminescence imaging of Arc gene expression detects neural activity-dependent changes in vivo. (2010)
  • 著者名/発表者名: 和泉宏謙, 石本哲也, 山本博, 西条寿夫, 森寿
  • 学会等名: 第33回日本神経科学大会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Real-time measurement of actin polymerization in live cells : Transient upregulation in F-actin after UV irradiation and its protective effect on cell death. (2010)
  • 著者名/発表者名: 石本哲也, 小澤岳昌, 森寿
  • 学会等名: 第33回日本神経科学大会
  • 発表場所: 神戸
• [学会発表] Real-time measurement of F-actin content during cell death using a bioluminescence based method. (2009)
  • 著者名/発表者名: 石本哲也, 和泉宏謙, 小澤岳昌, 森寿
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-09
• [学会発表] Real-time measurement of F-actin content during cell death using a bioluminescence based method (2009)
  • 著者名/発表者名: 石本哲也, 和泉宏謙, 小澤岳昌, 森寿
  • 学会等名: 第32回日本分子生物学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-12-09
• [学会発表] Detection of protein-protein interaction in living cells using a bioluminescence based method. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ishimoto T., Izumi H., Ozawa T., Mori H.
  • 学会等名: The 40th Annual Meeting of Society for Neuroscience
  • 発表場所: Chicago, USA.
  • 年月日: 2009-10-19
• [学会発表] Detection of protein-protein interaction in living cells using a bioluminescence based method (2009)
  • 著者名/発表者名: Ishimoto T., Izumi H., Ozawa T., Mori H
  • 学会等名: The 40th Annual Meeting of Society for Neuroscience
  • 発表場所: Chicago, USA
  • 年月日: 2009-10-19
• [学会発表] 生物発光を利用した細胞内アクチン重合の計測 (2009)
  • 著者名/発表者名: 石本哲也, 和泉宏謙, 小澤岳昌, 森寿
  • 学会等名: 第32回日本神経科学大会
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2009-09-17
• [学会発表] スプリットルシフェラーゼを用いたアクチン重合の検出 (2009)
  • 著者名/発表者名: 石本哲也、和泉宏謙、小澤岳昌、森寿
  • 学会等名: 日本薬理学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-03-16
• [学会発表] スプリットルシフェラーゼを用いたアクチン重合の検出 (2008)
  • 著者名/発表者名: 石本哲也, 和泉宏謙, 小澤岳昌, 森寿
  • 学会等名: 第82回日本薬理学会年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2008-03-16
• [産業財産権] 神経活動を可視化するプローブ (2009)
  • 発明者名: 石本哲也, 森寿, 和泉宏謙
  • 権利者名: 富山大学
  • 出願年月日: 2009-08-12
  • 外国
• [産業財産権] 神経活動を可視化するプローブ (2009)
  • 発明者名: 石本哲也、森寿、和泉宏謙
  • 権利者名: 富山大学
  • 出願年月日: 2009-08-12
  • 外国
• [産業財産権] 記憶形成の神経活動を可視化するプローブ (2008)
  • 発明者名: 石本哲也, 森寿, 和泉宏謙
  • 権利者名: 富山大学
  • 産業財産権番号: 2008-207546
  • 出願年月日: 2008-08-12
• [産業財産権] 記憶形成の神経活動を可視化するプローブ (2008)
  • 発明者名: 石本哲也、森寿、和泉宏謙
  • 権利者名: 富山大学
  • 産業財産権番号: 2008-207546
  • 出願年月日: 2008-08-12