海産無脊椎動物グミ由来溶血性レクチンの膜孔形成複合体構造解析

• 研究課題/領域番号: 20770088
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 構造生物化学
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 海野 英昭 長崎大学, 工学部, 助教 (10452872)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2009
• 研究課題ステータス: 完了 (2009年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2009年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2008年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: CEL-III / 結晶構造解析 / PFT / Cucumaria echinata / 膜蛋白質

研究概要

海産無脊椎動物グミ(Cucumaria.echinata)由来溶血性レクチンCEL-III膜孔形成複合体の構造解析を行うため,CEL-III膜孔形成複合体の結晶化条件の検討を行い,板状結晶を得る事に成功した.放射光測定の結結果,本結晶から分解能約7Åの回折データを得た.更なる分解能の向上を行うため,各種界面活性剤を用いた結晶化条件の検討の結果,新規の結晶化条件を得る事に成功した.

研究成果

• [雑誌論文] The role and structure of the carboxyl-terminal domain of the human voltage-gated proton channel Hv1. (2010)
  • 著者名/発表者名: Shu Jie Li, Qing Zhao, Qiangjun Zhou, Hideaki Unno, Yujia Zhai, Fei Sun
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. (In press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of endogenous LRP6 expressed on human cells by monoclonal antibodies specific for the native conformation (2010)
  • 著者名/発表者名: Norihisa Yasui, Emiko Mihara, Maiko Nampo, Keiko Tamura-Kawakami, Hideaki Unno, Kyoichi Matsumoto, Junichi Takagi
  • 雑誌名: Journal of Immunological Methods 352 ページ: 153-160
  • 査読あり
• [雑誌論文] Detection of endogenous LRP6 expressed on human cells by monoclonal antibodies specific for the native conformation (2010)
  • 著者名/発表者名: Norihisa Yasui, et al.
  • 雑誌名: Journal of Immunological Methods 352 ページ: 153-160
  • 査読あり
• [雑誌論文] The role and structure of the carboxyl-terminal domain of the human voltage-gated proton channel Hv1. (2010)
  • 著者名/発表者名: Shu Jie Li, et al.
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry (In press)(掲載確定)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Biological and immunological characteristics of hepatitis E virus-like particles based on the crystal structure. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tetsuo Yamashita, Yoshio Moria, Naoyuki Miyazaki, R. Holl, Cheng, Masato Yoshimura, Hideaki Unno, Ryoichi Shima, Kohji Moriishi, Tomitake Tsukihara, Tian Cheng Li, Naokazu Takeda, Tatsuo Miyamura, Yoshiharu Matsuura
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci U S A. 106(31) ページ: 12986-12991
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of Ca2+ on Refolding of the Recombinant Hemolytic Lectin CEL-III in its Oligomerization and Hemolytic Abilities. (2009)
  • 著者名/発表者名: Keigo Hisamatsu, Hideaki Unno, Shuichiro Goda, Tomomitsu Hatakeyama
  • 雑誌名: Biosci. Biotechnol. Biochem. 73(5) ページ: 1203-1205
  • 査読あり
• [雑誌論文] New Role of Flavin as a General Acid-Base Catalyst with No Redox Function in Type 2 Isopentenyl Diphosphate Isomerase (2009)
  • 著者名/発表者名: Hideaki Unno, Satoshi Yamashita, Yosuke Ikeda, Shin-ya Sekiguchi, Norie Yoshida, Tohru Yoshimura, Masami Kusunoki, Toru Nakayama, Tokuzo Nishino, Hisashi Hemmi
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 284(14) ページ: 9160-9167
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of the Valine Clusters in Domain 3 of the Hemolytic Lectin CEL-III in Its Oligomerization and Hemolytic Abilities (2009)
  • 著者名/発表者名: Keigo Hisamatsu, Hideaki Unno, Shuichiro Goda, Tomomitsu Hatakeyama
  • 雑誌名: Protein Pept. Lett. 16(4) ページ: 411-414
  • NAID: 120006984476
  • 査読あり
• [雑誌論文] Biological and immunological characteristics of hepatitis E virus-like particies based on the crystal structure. (2009)
  • 著者名/発表者名: Tetsuo Yamashita, et al.
  • 雑誌名: Proc Nafi Acad Sci U S A. 106(31) ページ: 12986-12991
  • 査読あり
• [雑誌論文] New Role of Flavin as a General Acid-Base Catalyst with No Redox Function in Type 2 Isopentenyl Diphosphate Isomerase (2009)
  • 著者名/発表者名: Hideaki Unno, et al.
  • 雑誌名: The Journal of Biological Chemistry 284(14) ページ: 9160-9167
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of the Valine Clusters in Domain 3 of the Hemolytic Lectin CEL-III in Its Oligomerization and Hemolytic Abilities (2009)
  • 著者名/発表者名: Keigo Hisamatsu, et al.
  • 雑誌名: Protein Pept.Lett. 16(4) ページ: 411-414
  • 査読あり
• [雑誌論文] Flavin's new role as a general acid-base catalyst with no redox function in type 2 isonentenvl dinhosnhate isomerase (2009)
  • 著者名/発表者名: Hideaki Unno
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. (掲載確定)(in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of the Valine Clusters in Domain 3 of the Hemolytic Lectin CEL-III in Its Olieomerization and Hemolytic Abilities (2009)
  • 著者名/発表者名: Keigo Hisamatsu
  • 雑誌名: Protein Pept. Lett. 16(in press)(掲載確定)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of Ca2+on Refolding of the Recombinant Hemolytic Lectin CEL-III (2009)
  • 著者名/発表者名: Keigo Iiisamatsu
  • 雑誌名: Biosci. Biotechnol. Biochem (掲載確定)(in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural basis for substrate recognition and hydrolysis by mouse carnosinase CN2. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hideaki Unno, Tetsuo Yamashita, Sayuri Ujita, Nobuaki Okumura, Hiroto Otani, Akiko Okumura, Katsuya Nagai, Masami Kusunoki
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 283(40) ページ: 27289-27299
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystal structure of the catalytic domain of Japanese encephalitis virus NS3 helicase/nucleoside triphosphatase at a resolution of 1. 8 A. (2008)
  • 著者名/発表者名: Tetsuo Yamashita, Hideaki Unno, Yoshio Mori, Hideki Tani, Kohji Moriishi, Akihisa Takamizawa, Masanobu Agoh, Tomitake Tsukihara, Yoshiharu Matsuura
  • 雑誌名: Virology 373(2) ページ: 426-436
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural basis for substrate recognition and hydrolysis by mouse carnosinase CN2 (2008)
  • 著者名/発表者名: Hideaki Unno
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 283(40) ページ: 27289-27299
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystal structure of the catalytic domain of Japanese encephalitis virus NS3 hplicase/nueleoside triphosohatase at a resolution of 1.8A (2008)
  • 著者名/発表者名: Tetsuo Yamashita
  • 雑誌名: Virology 373(2) ページ: 426-436
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of Ca2+ on Refolding of the Recombinant Hemolytic Lectin CEL -III in its Oligomerization and Hemolytic Abilities
  • 著者名/発表者名: Keigo Hisamatsu, et al.
  • 雑誌名: Biosci.Biotechnol.Biochem. 73(5)2009 ページ: 1203-1205
  • 査読あり
• [学会発表] タイプ2イソペンテニル二リン酸イソメラーゼの反応機構:一般酸塩基触媒としてのフラビンの機能 (2009)
  • 著者名/発表者名: 邊見久
  • 学会等名: 日本農芸化学会2009年度大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-03-29
• [学会発表] 樹状細胞表面受容体BDCA-2のC型レクチンドメインの大腸菌による発現 (2009)
  • 著者名/発表者名: 佐知望美
  • 学会等名: 日本農芸化学会2009年度大会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2009-03-28
• [学会発表] 光散乱法を用いたレクチン/糖含有ポリマー間相互作用の解析 (2009)
  • 著者名/発表者名: 寺井康了
  • 学会等名: 蛋白質と酵素の構造と機能に関する九州シンポジウム
  • 発表場所: 佐賀
• [学会発表] 溶血性レクチンCEL-IIIの自己会合ドメイン中のアミノ酸残基の役割 (2009)
  • 著者名/発表者名: 久松啓伍
  • 学会等名: 第9回日本蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 熊本
• [学会発表] Structural and mutational studies of anthocyanin malonyltransferases establish the features of BAHD enzyme catalysis. (2008)
  • 著者名/発表者名: Hideaki Unno
  • 学会等名: Americal Crystallographic Association Meeting
  • 発表場所: アメリカ
  • 年月日: 2008-06-03
• [学会発表] Structural and mutational studies of anthocyanin malonyltransferases stablish the features of BAHD enisTme catalysis (2008)
  • 著者名/発表者名: Hideaki Unno
  • 学会等名: Americal Crystallographie Association Meeting
  • 発表場所: アメリカテネシー州ノックスビル
  • 年月日: 2008-06-03
• [学会発表] アントシアニンマロニルトランスフェラーゼのX線結晶構造解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 海野英昭
  • 学会等名: 日本生化学会九州支部例会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 2008-05-17
• [学会発表] 光散乱法によるレクチン-糖鎖間相互作用解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 畠山智充
  • 学会等名: 平成20年度日本農芸化学会西日本支部大会
  • 発表場所: 長崎
• [学会発表] 溶血性レクチンCEL-III会合ドメインの部位特異的変異体作製とその性質 (2008)
  • 著者名/発表者名: 久松啓伍
  • 学会等名: 平成20年度日本農芸化学会西日本支部大会
  • 発表場所: 長崎
• [学会発表] グミ由来CEL-III膜貫通型複合体のX線結晶構造解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 松本尚樹
  • 学会等名: 平成20年度日本農芸化学会西日本支部大会
  • 発表場所: 長崎
• [学会発表] α-ガラクトシド特異的C型レクチンCEL-IVと糖との相互作用解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 畠山智充
  • 学会等名: 日本生化学会大会九州支部例会
  • 発表場所: 福岡