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牛白血病ウイルスの血中プロウイルス量と感染細胞数に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 20K06413
研究種目

基盤研究(C)

配分区分基金
応募区分一般
審査区分 小区分42020:獣医学関連
研究機関宮崎大学

研究代表者

関口 敏  宮崎大学, 産業動物防疫リサーチセンター, 教授 (10462780)

研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2024-03-31
研究課題ステータス 完了 (2023年度)
配分額 *注記
4,420千円 (直接経費: 3,400千円、間接経費: 1,020千円)
2023年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2020年度: 910千円 (直接経費: 700千円、間接経費: 210千円)
キーワード牛伝染性リンパ腫 / デジタルPCR / 検査 / 診断 / プロウイルス / 絶対定量 / マルチプロウイルス / 牛白血病 / 疫学 / 防疫 / リスク分析
研究開始時の研究の概要

本研究はBLVの感染力を説明する「第2の関連因子」を同定することを目的とする。まず,感染力には感染細胞あたりのプロウイルスの挿入個数が影響しているという仮説の下,プロウイルスを高精度に測定する絶対定量法を確立する。次に,臨床検体を用いて血中プロウイルス量とプロウイルスの挿入個数の関係を明らかにする。最後に,プロウイルスの挿入個数が感染力に及ぼす影響をフィールド調査で分析する。本研究によって新たな関連因子が同定されれば,より正確に感染リスクを評価することが可能となる。

研究成果の概要

牛伝染性リンパ腫ウイルス(BLV)は牛のリンパ球(B細胞)に感染し、宿主のDNA中にプロウイルスとして組み込まれる。そのため血中プロウイルス量は、感染細胞数に比例するといわれ、感染力を評価する指標として知られている。しかし、血中のプロウイルス量だけでは感染力を説明できない個体も少なくない。その理由の一つが、複数のプロウイルスが一つの細胞に感染するマルチプロウイルスである。そこで本研究では、感染力には感染細胞あたりのプロウイルスの挿入個数が影響しているという仮説に基づき、デジタルPCR技術を用いてプロウイルスを高精度に測定する絶対定量法を確立した。さらに、この技術を診断検査法として社会実装した。

研究成果の学術的意義や社会的意義

本研究では、デジタルPCR技術を用いて牛伝染性リンパ腫ウイルスの血中プロウイルスを絶対定量する技術を確立した。これにより、極微量の血中プロウイルスを検出できるようになったほか、検量線への依存性を取り除くことで、エラーを減らし、精度を上げることが可能となった。この技術はBLVだけでなく、様々な病原微生物の解析にも応用可能である。食料の安定供給に対する懸念や人獣共通感染症の発生が増加していることに加え、アニマルウェルフェアに対する取り組みが活発化している影響から、動物用検査の需要が増加している。動物感染症に対する検査技術の発展は、動物の健康障害の診断を支援し、感染症の流行の監視と制御に役立つ。

報告書

(5件)
  • 2023 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2022 実施状況報告書
  • 2021 実施状況報告書
  • 2020 実施状況報告書
  • 研究成果

    (15件)

すべて 2023 2022 2021 2020 その他

すべて 国際共同研究 (4件) 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 4件、 査読あり 4件、 オープンアクセス 4件) 学会発表 (3件) 産業財産権 (4件)

  • [国際共同研究] ベンハー大学(エジプト)

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書
  • [国際共同研究] ベンハー大学(エジプト)

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [国際共同研究] Mahidol University(タイ)

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [国際共同研究] Benha University(エジプト)

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [雑誌論文] Development of droplet digital PCR for quantification of bovine leukemia virus proviral load using unpurified genomic DNA2023

    • 著者名/発表者名
      Wu Xinyue、Notsu Kousuke、Matsuura Yuichi、Mitoma Shuya、El Daous Hala、Norimine Junzo、Sekiguchi Satoshi
    • 雑誌名

      Journal of Virological Methods

      巻: 315 ページ: 114706-114706

    • DOI

      10.1016/j.jviromet.2023.114706

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書 2022 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Identifying Pathogen and Allele Type Simultaneously in a Single Well Using Droplet Digital PCR2023

    • 著者名/発表者名
      Notsu Kosuke、El Daous Hala、Mitoma Shuya、Wu Xinyue、Norimine Junzo、Sekiguchi Satoshi
    • 雑誌名

      mSphere

      巻: 8 号: 1 ページ: 1-13

    • DOI

      10.1128/msphere.00493-22

    • 関連する報告書
      2023 実績報告書 2022 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] A pooled testing system to rapidly identify cattle carrying the elite controller BoLA-DRB3*009:02 haplotype against bovine leukemia virus infection.2022

    • 著者名/発表者名
      Notsu K, El Daous H, Mitoma S, Norimine J, Sekiguchi S
    • 雑誌名

      HLA

      巻: 99 号: 1 ページ: 12-24

    • DOI

      10.1111/tan.14502

    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書 2021 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Quantitative Risk Assessment for the Introduction of Bovine Leukemia Virus-Infected Cattle Using a Cattle Movement Network Analysis2020

    • 著者名/発表者名
      Kosuke Notsu, Anuwat Wiratsudakul, Shuya Mitoma, Hala El Daous, Chiho Kaneko, Heba M El-Khaiat, Junzo Norimine, Satoshi Sekiguchi
    • 雑誌名

      Pathogens

      巻: 9(11) 号: 11 ページ: 903-903

    • DOI

      10.3390/pathogens9110903

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [学会発表] リアルタイムPCRを用いた牛伝染性リンパ腫抵抗性遺伝子の新規簡易同定法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      野津 昂亮,Hala El Daous1,、三苫 修也,乗峰 潤三、関口 敏
    • 学会等名
      第164回日本獣医学会学術集会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] 確率論的手法を用いた肉用牛の外部導入における牛伝染性リンパ腫ウイルス感染のリスク評価2021

    • 著者名/発表者名
      藤原 未歩、牛谷 雄一,野津 昂亮,Hala El Daous,芹田 光玲,三苫 修也,乗峰 潤三、関口 敏
    • 学会等名
      第164回日本獣医学会学術集会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [学会発表] ドロップレットデジタルPCRを用いた牛伝染性リンパ腫ウイルス感染細胞数の絶対定量法の開発2021

    • 著者名/発表者名
      芹田 光玲,野津 昂亮,El Daou Hala,三苫 修也,乗峰 潤三、関口 敏
    • 学会等名
      第164回日本獣医学会学術集会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [産業財産権] 抗病性及び病原体遺伝子の同時検査法並びに抗病性及び病原体遺伝子の同時検査キット2022

    • 発明者名
      関口敏、野津昂亮
    • 権利者名
      関口敏、野津昂亮
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      2022-140503
    • 出願年月日
      2022
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [産業財産権] 対立遺伝子の検出方法及び対立遺伝子の検出キット2021

    • 発明者名
      関口敏、野津昂亮
    • 権利者名
      関口敏、野津昂亮
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      2021-066098
    • 出願年月日
      2021
    • 関連する報告書
      2022 実施状況報告書
  • [産業財産権] 対立遺伝子の検出方法及び対立遺伝子の検出キット2021

    • 発明者名
      関口敏,野津昂亮
    • 権利者名
      関口敏,野津昂亮
    • 産業財産権種類
      特許
    • 出願年月日
      2021
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [産業財産権] 防疫支援装置,防疫支援方法及びプログラム2020

    • 発明者名
      関口敏
    • 権利者名
      関口敏
    • 産業財産権種類
      特許
    • 出願年月日
      2020
    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書

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公開日: 2020-04-28   更新日: 2025-01-30  

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