| 研究課題/領域番号 |
20K09886
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分57010:常態系口腔科学関連
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| 研究機関 | 愛知学院大学 |
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研究代表者 |
鈴木 崇弘 愛知学院大学, 歯学部, 教授 (70298545)
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| 研究分担者 |
横川 慧 愛知学院大学, 薬学部, 講師 (40804406)
古野 忠秀 愛知学院大学, 薬学部, 教授 (80254308)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2022年度: 1,300千円 (直接経費: 1,000千円、間接経費: 300千円)
2021年度: 1,430千円 (直接経費: 1,100千円、間接経費: 330千円)
2020年度: 1,560千円 (直接経費: 1,200千円、間接経費: 360千円)
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| キーワード | 生物発光イメージング / インスリン分泌 / ガウシアルシフェラーゼ / 開口分泌 / エキソサイトーシス / 膵β細胞 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究では、糖尿病発症の鍵となる周期性インスリン分泌の破綻を解明するための有用な解析手法の確立を目的として、新たなインスリン分泌の可視化法と定量解析系を開発する。独自の技術として、インスリンをガウシアルシフェラーゼ（発光酵素）標識したタンパク質を用いた、「生物発光イメージング法」によりインスリン分泌を可視化する。これと合わせて、簡便な「ルミノメーターを用いた発光検出法」を駆使することで、従来よりも生理的な実験条件でのインスリン分泌解析系を確立する。
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| 研究成果の概要 |
血糖値抑制ホルモンであるインスリンとガウシアルシフェラーゼ（発光酵素GLase）の融合タンパク質を定常発現する膵β細胞株（iGL細胞）を用いて新たなインスリン分泌解析法の研究を行った。生物発光イメージング解析により、細胞外基質マトリゲルへのiGL細胞の接着が周期性インスリン分泌の可視化解析に有用であることを示した。また、希釈マトリゲルでコーティングしたプレートを用いることで、ルミノメーターによる発光測定系でグルコース応答性インスリン分泌を解析する最適な実験条件を確立した。また、GLaseを用いてインスリン分泌を促進するオステオカルシンの分泌動態を可視化した。
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
マトリゲルコートしたマルチウェルプレートに播種したiGL細胞を用いることで、生物発光イメージング法により細胞間で同調する周期性インスリン分泌動態を安定して解析することが可能となり、糖尿病の発症機構を研究する有用な解析系を提供することができた。また、ルミノメーターによる高感度な発光測定法では、インスリン分泌量を簡便かつ安定して解析することが可能となった。本研究成果は、糖尿病関連の創薬研究において特に有用と考えられる。
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