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ノックイン法によるミツバチのキノコ体細胞タイプ特異的な遺伝子操作の実現と機能解明

研究課題

研究課題/領域番号 20K15839
研究種目

若手研究

配分区分基金
審査区分 小区分44050:動物生理化学、生理学および行動学関連
研究機関東京大学

研究代表者

河野 大輝  東京大学, 大学院理学系研究科(理学部), 助教 (60846773)

研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2023-03-31
研究課題ステータス 完了 (2022年度)
配分額 *注記
4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円)
2022年度: 1,170千円 (直接経費: 900千円、間接経費: 270千円)
2021年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円)
2020年度: 1,040千円 (直接経費: 800千円、間接経費: 240千円)
キーワードセイヨウミツバチ / 社会性行動 / ゲノム編集 / キノコ体 / ケニヨン細胞 / ノックイン
研究開始時の研究の概要

ミツバチの社会性行動を制御する神経基盤として、脳高次中枢キノコ体に着目した研究が多く行われてきた。ミツバチのキノコ体を構成するケニヨン細胞にはサブタイプが存在し、異なる行動の制御に関わることが示唆されている。本研究では、ミツバチにおいてゲノム編集によるノックイン法を実現することで、各サブタイプ選択的な遺伝子発現操作を行い、各サブタイプの投射パターン、網羅的な遺伝子発現プロファイル、そして行動制御における機能を同定する。ケニヨン細胞サブタイプはハチ目昆虫の行動の複雑化に伴って増加したことが示唆されており、本研究により行動進化に寄与する神経機構の理解に繋がることが期待される。

研究成果の概要

ミツバチの社会性行動制御と関連する脳領域として、昆虫脳の高次中枢であるキノコ体に着目した研究が行われてきた。ミツバチのキノコ体は、異なる遺伝子が発現する複数のケニヨン細胞サブタイプから構成されることが分かっているが、各サブタイプの行動制御における機能は不明である。本研究では、細胞種特異的な遺伝子操作を実現するために、ゲノム編集法を用いたノックイン法の確立を試みた。また、サブタイプ選択的に発現する遺伝子のノックアウト個体の解析、および各サブタイプの投射パターンや網羅的遺伝子発現プロファイルを同定し、各サブタイプの機能・生理特性の一端を明らかにした。

研究成果の学術的意義や社会的意義

ミツバチは社会性行動研究のモデル生物として研究されてきたが、その行動特性から遺伝子操作を行うことが長年難しく、いまだ細胞種特異的な遺伝子発現制御がなされた例は無い。本研究は予備的ながら初めてノックイン法の有効性を示した。加えて、継代によるノックアウト働き蜂の作出に初めて成功しており、ミツバチの行動遺伝学に大きく貢献する成果と考える。また、行動進化と関連することが示唆されているキノコ体の生理特性の一端を解明したことで、今後社会性段階の異なるハチ目昆虫との比較解析により、社会性と関連する脳基盤の発見に繋がる可能性がある。

報告書

(4件)
  • 2022 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2021 実施状況報告書
  • 2020 実施状況報告書
  • 研究成果

    (11件)

すべて 2023 2022 2021 2020 その他

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 3件) 学会発表 (6件) (うち国際学会 2件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Evolutionary dynamics of mushroom body Kenyon cell types in hymenopteran brains from multi-functional type to functionally specialized types.2023

    • 著者名/発表者名
      Takayoshi Kuwabara, Hiroki Kohno, Masatsugu Hatakeyama, Takeo Kubo
    • 雑誌名

      Science Advances

      巻: Add4210 号: 18

    • DOI

      10.1126/sciadv.add4201

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Mblk-1/E93, an ecdysone related-transcription factor, targets synaptic plasticity-related genes in the honey bee mushroom bodies2022

    • 著者名/発表者名
      Matsumura Yasuhiro、To Taiko Kim、Kunieda Takekazu、Kohno Hiroki、Kakutani Tetsuji、Kubo Takeo
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 12 号: 1 ページ: 21367-21367

    • DOI

      10.1038/s41598-022-23329-z

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Developmental stage-specific distribution and phosphorylation of Mblk-1, a transcription factor involved in ecdysteroid-signaling in the honey bee brain2020

    • 著者名/発表者名
      Kumagai Hitomi、Kunieda Takekazu、Nakamura Korefumi、Matsumura Yasuhiro、Namiki Manami、Kohno Hiroki、Kubo Takeo
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 10 号: 1 ページ: 8735-8735

    • DOI

      10.1038/s41598-020-65327-z

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] ミツバチ脳における脱皮ホルモンシグナル関連転写因子Mblk-1の発現解析2020

    • 著者名/発表者名
      松村泰宏、河野大輝、久保健雄
    • 雑誌名

      昆虫と自然

      巻: 56 ページ: 30-33

    • NAID

      40022469603

    • 関連する報告書
      2020 実施状況報告書
  • [学会発表] Identification of the pupal stages at which three Kenyon cell subtypes are generated in the mushroom bodies of the honey bee2022

    • 著者名/発表者名
      Hiroki Kohno, Takeo Kubo
    • 学会等名
      日本発生生物学会第55回大会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] Functional analyses of mKast by producing knocked out worker honey bees using CRISPR/Cas92022

    • 著者名/発表者名
      Hiroki Kohno, Takeo Kubo
    • 学会等名
      IUSSI2022 19th Congress of the International Union for the Study of Social Insects
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] Analysis and exploration of Kenyon cells increased with behavioral evolution in hymenopteran insects2022

    • 著者名/発表者名
      Takayoshi Kuwabara, Hiroki Kohno, Masatsugu Hatakeyama, Takeo Kubo
    • 学会等名
      IUSSI2022 19th Congress of the International Union for the Study of Social Insects
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] ミツバチのダンスコミュニケーションに関わる神経細胞種の探索 ~ミツバチとマルハナバチの脳高次中枢の比較scRNA-seq解析~2022

    • 著者名/発表者名
      桑原嵩佳、河野大輝、久保健雄
    • 学会等名
      シングルセルゲノミクス研究会2022
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] 行動を司る脳進化の謎へ切り込む ~シンプルな脳を持つハチ目昆虫の種間比較解析より~2022

    • 著者名/発表者名
      桑原嵩佳、河野大輝、畠山正統、久保健雄
    • 学会等名
      第7回ユニーク会
    • 関連する報告書
      2022 実績報告書
  • [学会発表] Functional analyses of mKast, which is preferentially expressed in middle-type Kenyon cells in mushroom bodies of the honey bee, by producing knocked-out workers2021

    • 著者名/発表者名
      Hiroki Kohno, Takeo Kubo
    • 学会等名
      日本比較生理生化学会 第43回札幌オンライン大会
    • 関連する報告書
      2021 実施状況報告書
  • [備考] ハチ目における脳神経細胞の進化動態の解明 ――多機能型から機能特化型へ――

    • URL

      https://www.s.u-tokyo.ac.jp/ja/press/2023/8416/

    • 関連する報告書
      2022 実績報告書

URL: 

公開日: 2020-04-28   更新日: 2024-01-30  

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