ナノスーツ法を用いた血中循環HPV感染細胞のリアルタイムモニタリング法の確立

• 研究課題/領域番号: 20K18249
• 研究種目: 若手研究
• 配分区分: 基金
• 審査区分: 小区分56050:耳鼻咽喉科学関連
• 研究機関: 浜松医科大学
• 研究代表者: 喜夛 淳哉 浜松医科大学, 医学部, 助教 (70868893)
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2024-03-31
• 研究課題ステータス: 完了 (2023年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2022年度: 650千円 (直接経費: 500千円、間接経費: 150千円); 2021年度: 390千円 (直接経費: 300千円、間接経費: 90千円); 2020年度: 3,250千円 (直接経費: 2,500千円、間接経費: 750千円)
• キーワード: ナノスーツ法 / 腫瘍循環細胞(CTC) / リキッドバイオプシー / 中咽頭癌 / HPV

研究開始時の研究の概要

ナノスーツ法は短時間で簡便に試料周辺にナノ薄膜を形成させ、電子顕微鏡で濡れた試料を立体構造が保たれたまま高倍率・高分解能で観察できる革新的な技術である。
循環腫瘍細胞(CTC)は、血液腫瘍マーカーよりも病勢や治療効果を反映する可能性が示唆され注目されている。しかし頭頸部癌での報告は少なく、CTCの微細構造に着目した報告やウイルスが感染したCTCを直接観察した報告は存在しない。
CTCをナノスーツ法で観察する新手法を確立し、HPVに感染したCTCを微細構造が保たれた状態で観察及びリアルタイムでモニタリングを行い、HPV陽性中咽頭癌の病勢や予後判定を行う。さらに早期癌スクリーニングへの応用も目指す。

研究成果の概要

HPV(Human papillomavirus)関連中咽頭癌の早期発見のためのバイオマーカー確立のため、ナノスーツ法を用いた組織解析法の確立及び血液中のCTC(circulating tumor cells)やcfDNA(cell free DNA)解析を行った。ナノスーツ法を用いた解析ではHPV粒子観察技術を確立することができた。血液の解析ではCTCでは有望な結果は得られなかったものの、cfDNA解析でHPV遺伝子の検出の有無や3遺伝子(CALML5、DNAJC5G、LY6D)のメチル化解析が早期発見に有用であると示唆された。

研究成果の学術的意義や社会的意義

HPV(Human papillomavirus)関連中咽頭癌の前癌病変は未発見であり、早期発見が難しい癌である。子宮頸癌の知識から組織異型度が高まるとHPV粒子は減少し、癌ではHPV粒子が観察されないことが判明している。このことから、ナノスーツ法によるHPV粒子観察技術を応用することで、HPV関連中咽頭癌の前癌病変を同定できる可能性がある。また、cfDNA解析で3遺伝子(CALML5、DNAJC5G、LY6D)のメチル化解析が早期発見に有望な結果が得られている。HPV粒子解析とcfDNAメチル化解析を組合わせ、より精度の高い、早期発見のための検査法が確立できる可能性がある。

研究成果

• [雑誌論文] 長期間の抗菌薬経静脈投与を要した頭蓋底骨髄炎例 (2023)
  • 著者名/発表者名: 別所佑樹, 中西啓, 喜夛淳哉, 新村大地, 細川久美子, 三澤清
  • 雑誌名: 耳鼻咽喉科臨床 巻: 116 号: 6 ページ: 559-565
  • DOI: 10.5631/jibirin.116.559
  • ISSN: 0032-6313, 1884-4545
  • 査読あり
• [雑誌論文] 外耳道狭窄により診断が遅れた先天性真珠腫例 (2023)
  • 著者名/発表者名: 新村大地，中西啓，喜夛淳也，細川久美子，三澤清
  • 雑誌名: 耳鼻咽喉科臨床 巻: 116 号: 7 ページ: 653-657
  • DOI: 10.5631/jibirin.116.653
  • ISSN: 0032-6313, 1884-4545
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association between human papillomavirus particle production and the severity of recurrent respiratory papillomatosis (2023)
  • 著者名/発表者名: Yamada Satoshi、Itoh Toshiya、Ikegami Taro、Imai Atsushi、Mochizuki Daiki、Nakanishi Hiroshi、Ishikawa Ryuji、Kita Junya、Nakamura Yuki、Takizawa Yoshinori、Okamura Jun、Noda Yoshihiro、Iwashita Toshihide、Hariyama Takahiko、Suzuki Mikio、Misawa Kiyoshi、Kawasaki Hideya
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 13 号: 1 ページ: 5514-5514
  • DOI: 10.1038/s41598-023-32486-8
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Zona pellucidaドメインの <i>TECTA</i> 遺伝子変異により発症した非症候群性常染色体優性遺伝性難聴家系における聴力像の解析 : 特徴的な皿型オージオグラムの加齢性変化 (2022)
  • 著者名/発表者名: 中西啓，喜夛淳哉，西尾信哉，宇佐美真一，三澤清．
  • 雑誌名: ＡＵＤＩＯＬＯＧＹ ＪＡＰＡＮ 巻: 65 号: 2 ページ: 145-151
  • DOI: 10.4295/audiology.65.145
  • ISSN: 0303-8106, 1883-7301
  • 年月日: 2022-04-28
  • 査読あり
• [雑誌論文] 特集 CT典型所見アトラス-まずはここを診る! 《咽喉頭･頭頸部領域》 囊胞性腫瘤-正中頸囊胞/側頸囊胞/血管腫/脈管奇形 (2022)
  • 著者名/発表者名: 大石 宏虎、喜夛 淳哉、三澤 清
  • 雑誌名: 耳鼻咽喉科・頭頸部外科 巻: 94 号: 4 ページ: 364-368
  • DOI: 10.11477/mf.1411202967
  • ISSN: 0914-3491, 1882-1316
  • 年月日: 2022-04-20
  • 査読あり
• [雑誌論文] Auditory and Vestibular Characteristics of NLRP3 Inflammasome Related Autoinflammatory Disorders: Monogenic Hearing Loss can be Improved by Anti-Interleukin-1 Therapy. (2022)
  • 著者名/発表者名: Nakanishi H, Yamada S, Kita J, Shinmura D, Hosokawa K, Sahara S, Misawa K.
  • 雑誌名: Front Neurol 巻: 13 ページ: 865763-865763
  • DOI: 10.3389/fneur.2022.865763
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Update on findings about sudden sensorineural hearing loss and insight into its pathogenesis. (2022)
  • 著者名/発表者名: Yamada S, Kita J, Shinmura D, Nakamura Y, Sahara S, Misawa K, Nakanishi H.
  • 雑誌名: J Clin Med 巻: 11 号: 21 ページ: 6387-6387
  • DOI: 10.3390/jcm11216387
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Novel prognostic value and potential utility of opioid receptor gene methylation in liquid biopsy for oral cavity cancer (2022)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa Ryuji、Imai Atsushi、Mima Masato、Yamada Satoshi、Takeuchi Kazutaka、Mochizuki Daiki、Shinmura Daichi、Kita Jun-ya、Nakagawa Takuya、Kurokawa Tomoya、Misawa Yuki、Nakanishi Hiroshi、Takizawa Yoshinori、Misawa Kiyoshi
  • 雑誌名: Current Problems in Cancer 巻: 46 号: 2 ページ: 100834-100834
  • DOI: 10.1016/j.currproblcancer.2021.100834
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 鼻すすり型耳管開放症の2例 (2021)
  • 著者名/発表者名: Endo Shiori、Mizuta Kunihiro、Oishi Hiroto、Ikeba Hiroshi、Kita Junya、Ban Akihiro、Nakanishi Hiroshi、Takizawa Yoshinori、Arai Maki、Morita Sho、Hosokawa Kumiko、Misawa Kiyoshi、Hosokawa Seiji、Takebayashi Satoru、Mineta Hiroyuki
  • 雑誌名: 耳鼻咽喉科臨床 補冊 巻: 156 号: 0 ページ: 217-222
  • DOI: 10.5631/jibirinsuppl.156.217
  • NAID: 130007996832
  • ISSN: 0912-1870, 2185-1557
  • 査読あり
• [雑誌論文] 頭蓋内感染を繰り返した側頭骨内脳瘤例 (2021)
  • 著者名/発表者名: 中西啓, 喜夛淳哉, 新村和也, 馬場聡, 峯田周幸
  • 雑誌名: 耳鼻咽喉科臨床 巻: 114 号: 5 ページ: 347-352
  • DOI: 10.5631/jibirin.114.347
  • NAID: 130008032805
  • ISSN: 0032-6313, 1884-4545
  • 査読あり
• [雑誌論文] 頭頸部領域に発生したspindle cell carcinomaの8例 (2021)
  • 著者名/発表者名: Yamaguchi Yuki、Hosokawa Seiji、Kita Junya、Mochizuki Daiki、Imai Atushi、Takizawa Yoshinori、Misawa Kiyoshi、Mineta Hiroyuki
  • 雑誌名: 耳鼻咽喉科臨床 補冊 巻: 156 号: 0 ページ: 61-65
  • DOI: 10.5631/jibirinsuppl.156.61
  • NAID: 130007996850
  • ISSN: 0912-1870, 2185-1557
  • 査読あり
• [雑誌論文] ティンパノグラムと真珠腫性中耳炎の術後鼓膜再陥凹 (2021)
  • 著者名/発表者名: 遠藤志織, 水田邦博, 喜夛淳哉, 中西啓, 瀧澤義徳, 荒井真木, 細川久美子, 細川誠二, 峯田周幸
  • 雑誌名: Ｏｔｏｌｏｇｙ Ｊａｐａｎ 巻: 31 号: 3 ページ: 322-326
  • DOI: 10.11289/otoljpn.31.322
  • ISSN: 0917-2025, 1884-1457
  • 査読あり
• [雑誌論文] 上顎洞内で広範に癒着した再発性副鼻腔乳頭腫に対してDirect approach to the anterior and lateral part of the maxillary sinus with an endoscope法を用いて摘出した1例 (2021)
  • 著者名/発表者名: Kano Kotaro、Hayashi Akitoshi、Masuda Mamoru、Matsuda Shigeru、Matsushita Arika、Kita Junya、Morita Kotaro、Okamura Jun
  • 雑誌名: 耳鼻咽喉科臨床 補冊 巻: 156 号: 0 ページ: 186-191
  • DOI: 10.5631/jibirinsuppl.156.186
  • NAID: 130007996836
  • ISSN: 0912-1870, 2185-1557
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prolonged activation of cytomegalovirus early gene e1-promoter exclusively in neurons during infection of the developing cerebrum (2021)
  • 著者名/発表者名: Kosugi Isao、Arai Yoshifumi、Baba Satoshi、Kawasaki Hideya、Iwashita Toshihide、Tsutsui Yoshihiro
  • 雑誌名: Acta Neuropathologica Communications 巻: 9 号: 8 ページ: 2165-2172
  • DOI: 10.7150/jca.54760
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 軟骨伝導補聴器の使用経験 (2021)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉, 中西啓, 峯田周幸
  • 雑誌名: 耳鼻咽喉科臨床 補冊 巻: 156 号: 0 ページ: 56-60
  • DOI: 10.5631/jibirinsuppl.156.56
  • NAID: 130007996849
  • ISSN: 0912-1870, 2185-1557
  • 査読あり
• [雑誌論文] 外耳炎・鼓膜炎の診断と処置 (2021)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉, 中西啓, 細川誠二
  • 雑誌名: ENTONI 巻: 257
  • 査読あり
• [雑誌論文] G protein-coupled receptor genes, PTGDR1, PTGDR2, and PTGIR, are candidate epigenetic biomarkers and predictors for treated patients with HPV-associated oropharyngeal cancer. (2020)
  • 著者名/発表者名: Misawa K, Imai A, Kanazawa T, Mima M, Yamada S, Misawa Y, Mochizuki D, Yamada T, Shinmura D, Ishikawa R, Kita J, Yamaguchi Y, Misawa Y and Mineta H
  • 雑誌名: Microorganisms 巻: 8(10) 号: 10 ページ: 1504-1504
  • DOI: 10.3390/microorganisms8101504
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Long interspersed nuclear element 1 hypomethylation has novel prognostic value and potential utility in liquid biopsy for oral cavity cancer. (2020)
  • 著者名/発表者名: Misawa K, Yamada S, Mima M, Nakagawa T, Kurokawa T, Imai A, Mochizuki D, Shinmura D, Yamada T, Kita J, Ishikawa R, Yamaguchi Y, Misawa Y, Kanazawa T, Kawasaki H and Mineta H
  • 雑誌名: Biomarker Research 巻: 8 号: 1 ページ: 53-53
  • DOI: 10.1186/s40364-020-00235-y
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 頸部の腫瘤 (2020)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉, 中西啓, 峯田周幸
  • 雑誌名: JOHNS 巻: 36 ページ: 1425-1429
  • 査読あり
• [学会発表] 両側感音難聴を呈した小児サルコイドーシス例 (2023)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉、佐原聡甫、中西啓、三澤清
  • 学会等名: 第128回日耳鼻静岡県地方部会学術講演会
• [学会発表] 両側感音難聴を呈した小児サルコイドーシス例 (2023)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉、佐原聡甫、新村大地、中西啓、三澤清
  • 学会等名: 第33回日本耳科学会総会・学術講演会
• [学会発表] 上咽頭生検が有効であったサルコイドーシスの 2 症例 (2023)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉
  • 学会等名: 第18回日本小児耳鼻咽喉科学会
• [学会発表] 隠蔽性耳管開放症を伴う耳小骨形態異常例 (2022)
  • 著者名/発表者名: 喜夛 淳哉, 南條 菜央, 新村 大地, 中西 啓, 三澤 清
  • 学会等名: 第32回日本耳科学会総会・学術講演会
• [学会発表] 伝音難聴を伴う前庭裂隙症例の神経耳科的検討 (2022)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉，中西 啓，三澤 清
  • 学会等名: 第81回日本めまい平衡医学会総会・学術講演会
• [学会発表] 当院におけるCDH23遺伝子バリアント例における聴力像の検討 (2022)
  • 著者名/発表者名: 中西 啓, 喜夛 淳哉, 新村 大地, 西尾 信哉, 宇佐美 真一, 三澤 清
  • 学会等名: 第67回日本聴覚医学会総会・学術講演会
• [学会発表] 当院における若年発症型両側性感音難聴例の検討 (2022)
  • 著者名/発表者名: 中西 啓, 喜夛 淳哉, 新村 大地, 南條 茉央, 西尾 信哉, 宇佐美 真一, 三澤 清
  • 学会等名: 第32回日本耳科学会総会・学術講演会
• [学会発表] 前庭における NLRP 3 インフラマソーム活性化の検討 (2022)
  • 著者名/発表者名: 中西 啓，喜夛淳哉，三澤 清
  • 学会等名: 第81回日本めまい平衡医学会総会・学術講演会
• [学会発表] 中耳サルコイドーシスと診断された難治性中耳炎例 (2021)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉、新村大地、中西 啓、細川久美子、三澤 清
  • 学会等名: 第122回日本耳鼻咽喉科頭頸部外科学会静岡県地方部会
• [学会発表] 中耳サルコイドーシスと診断された小児難治性中耳炎例 (2021)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉、新村大地、中西 啓、細川久美子、三澤 清
  • 学会等名: 第31回日本耳科学会総会・学術講演会
• [学会発表] 当院耳硬化症例における術前CT所見と聴力像の検討 (2021)
  • 著者名/発表者名: 中西啓、喜夛淳哉、新村大地、別所佑樹、細川久美子、水田邦博、三澤清
  • 学会等名: 第31回日本耳科学会総会・学術講演会
• [学会発表] 外耳道狭窄により発見が遅れた先天性真珠腫例 (2021)
  • 著者名/発表者名: 新村大地、中西啓、喜夛淳哉、細川久美子、別所佑樹、三澤清
  • 学会等名: 第31回日本耳科学会総会・学術講演会
• [学会発表] 当院における軟骨伝導補聴器外来の現状 (2020)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉，中西啓，峯田周幸
  • 学会等名: 第65 回日本聴覚医学会総会・学術講演会
• [学会発表] 耳管内に進展する上咽頭アミロイドーシスの１例 (2020)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉，中西啓，細川久美子，細川誠二，峯田周幸
  • 学会等名: 第30回日本耳科学会総会・学術講演会
• [学会発表] 第一鰓裂性瘻孔の２例 (2020)
  • 著者名/発表者名: 喜夛淳哉，中西啓，峯田周幸
  • 学会等名: 第14回小児耳鼻咽喉科学会総会・学術講演会