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分裂酵母の接合型変換組換え反応の試験管内再構築系による機能解析

研究課題

研究課題/領域番号 21770007
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 遺伝・ゲノム動態
研究機関東京工業大学

研究代表者

村山 泰斗  東京工業大学, 大学院・生命理工学研究科・グローバルCOE, 研究員 (60531663)

研究期間 (年度) 2009 – 2010
研究課題ステータス 完了 (2010年度)
配分額 *注記
4,550千円 (直接経費: 3,500千円、間接経費: 1,050千円)
2010年度: 1,950千円 (直接経費: 1,500千円、間接経費: 450千円)
2009年度: 2,600千円 (直接経費: 2,000千円、間接経費: 600千円)
キーワード接合型変換 / 相同組換え / 遺伝子変換 / Swi2-Swi5複合体 / 分裂酵母 / 試験管内 / 再構成 / D-loop形成 / 生化学 / 試験管内再構成 / 接合 / ヘテロクロマチン / Rad51 / mat座位 / 非対称分裂
研究概要

接合型変換は、ゲノム上の mat 領域で起こる相同組換えに起因するが、その反応機構は不明である。分裂酵母 Swi2-Sw5複合体は、この相同組換え反応に関与することが知られていた。そこで、本研究は、Swi2-Swi5複合体を精製し、その生化学的機能をあきらかにし、接合型変換の試験管内再構成系を構築して解析することによって、その反応メカニズムを解明することを目的とした。その結果、Swi2-Swi5複合体は、それ自体単体でD-loop形成活性を有することを発見した。Swi2には、ATフックドメインを含むN末端部位と、この配列を含まないC末端側の2つのDNA結合ドメインがあるが、実際に2つのドメインのそれぞれがDNA結合能を有することを証明し、さらに、C末端側のドメインにD-loop形成活性があることを示した。これらの結果はSwi2-Swi5複合体が接合型変換時の組換えに直接関与することを強く示唆するものである。

報告書

(3件)
  • 2010 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2009 実績報告書
  • 研究成果

    (7件)

すべて 2009 その他

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (5件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] The fission yeast meiosis-specific Dmc1 recombinase mediates formation and branch migration of Holliday junction by preferentially promoting strand exchange in a direction opposite to that of Rad51

    • 著者名/発表者名
      Yasuto Murayama, Yasuhiro Tsutsui, Hiroshi Iwasaki.
    • 雑誌名

      GENES and DEVELOPMENT誌 in press

    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
    • 査読あり
  • [学会発表] Regulation of Dmc1 recombinase by recombination mediator proteins.2009

    • 著者名/発表者名
      Yasuto Murayama, Yumiko Kurokawa, Hiroshi Iwasaki
    • 学会等名
      International Symposium on " Chromosome cycle and genome dynamics"
    • 発表場所
      ホテルサンバレー那須(栃木)
    • 年月日
      2009-11-10
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] Regulation of Dmc1 recombinase by recombination mediator proteins2009

    • 著者名/発表者名
      村山泰斗(発表者)、黒川裕美子、岩崎博史
    • 学会等名
      International Symposium on "Chromosome cycle and genome dynamics"
    • 発表場所
      ホテルサンバレー那須(栃木)
    • 年月日
      2009-11-10
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [学会発表] 相同組換えメディエーターによるDmc1リコンビナーゼの正と負の制御2009

    • 著者名/発表者名
      村山泰斗、黒川裕美子、岩崎博史
    • 学会等名
      第20回DNA複製・組換え・修復ワークショップ
    • 発表場所
      琵琶湖コンファレンスセンター(滋賀)
    • 年月日
      2009-11-03
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書 2009 実績報告書
  • [学会発表] Biochemical characterization of regulation of Dmc1 recombinase by recombination mediator proteins.2009

    • 著者名/発表者名
      Yasuto Murayama, Yumiko Kurokawa, Hiroshi Iwasaki
    • 学会等名
      The Fifth International Fission Yeast Meeting Pombe 2009.
    • 発表場所
      国立オリンピック記念青少年総合センター(東京)
    • 年月日
      2009-10-27
    • 関連する報告書
      2010 研究成果報告書
  • [学会発表] Biochemical characterization of regulation of Dmc1 recombinase by recombination mediator proteins2009

    • 著者名/発表者名
      村山泰斗(発表者)、黒川裕美子、岩崎博史
    • 学会等名
      The Fifth International Fission Yeast Meeting Pombe 2009
    • 発表場所
      国立オリンピック記念青少年総合センター(東京)
    • 年月日
      2009-10-27
    • 関連する報告書
      2009 実績報告書
  • [備考]

    • URL

      http://www.iwasakilab.bio.titech.ac.jp/

    • 関連する報告書
      2009 実績報告書

URL: 

公開日: 2009-04-01   更新日: 2016-04-21  

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