研究課題
若手研究(B)
野生型p53発現プラスミドをHIS、URA3を利用してα接合型出芽酵母株に導入した。一方、網羅的p53ミスセンス変異ライブラリーは、a接合型出芽酵母株にEGFPレポータープラスミドと2314種類の変異p53発現プラスミドをそれぞれTRP1、LEU2を利用して導入した。Α接合型出芽酵母株と2314種類のa接合型出芽酵母株をYPDプレート上で接合したコロニーをSC-trp-leu-his-uraプレートと5-FOA含有SC-trp-leu-hisプレートそれぞれに移しコロニー形成能を観察し、ドミナント・ネガティブ変異体のスクリーニングを行った。