口腔癌におけるケモカインの相互作用を応用した新規抗腫瘍ペプチドの開発

• 研究課題/領域番号: 21791816
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 機能系基礎歯科学
• 研究機関: 神奈川歯科大学
• 研究代表者: 前畑 洋次郎 神奈川歯科大学, 歯学部, 講師 (80410009)
• 研究期間 (年度): 2009 – 2010
• 研究課題ステータス: 完了 (2010年度)
• 配分額: 4,290千円 (直接経費: 3,300千円、間接経費: 990千円); 2010年度: 2,080千円 (直接経費: 1,600千円、間接経費: 480千円); 2009年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
• キーワード: 歯科薬理学 / 口腔癌 / CXCL14/BRAK / CXCL8/IL-8 / 血管新生抑制 / Drug Delivery System / 癌 / CXCL14 / BRAK / CXCL8 / IL-8

研究概要

BRAK/CXCL14は抗腫瘍作用を示すケモカインであるが,その受容体を含め作用機序は完全に解明されていない。本研究課題では,BRAK は細胞外で血管新生促進性因子であるIL-8やVEGFと直接結合し2量体形成を阻害するという仮説の基,BRAKのIL-8およびVEGFと結合領域を同定しBRAKと他のケモカインの相互作用を解明し新規抗腫瘍療法を構築することを最終目的としている。平成22年度は、BRAKおよびIL-8,VEGFの結合を確認するためにFLAG発現システムを用いてFLAG-BRAKベクターの作成後,口腔扁平上皮癌細胞(HSC-3)に遺伝子導入しFLAG-BRAK安定発現細胞株を作成した。平成23年度は、FLAG-BRAK安定発現細胞株にIL-8,VEGF添加後回収し,培養上清を免疫沈降法にて精製してIL-8,VEGFとの結合について検討した。その結果,本実験条件において細胞外に分泌されたBRAKはIL-8との結合することが確認された。また,BRAKは血管内皮細胞の遊走を抑制することが報告されていることからBRAKはIL-8の2量体形成を抑制し血管新生抑制作用をことが示唆される。これらの結果から,BRAKとIL-8の結合様式を詳細に検討し,結合配列に相同性のあるペプチドを用いた血管新生阻害剤に応用することが可能になると考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Reactive Oxygen Species (ROS) Reduce the Expression of BRAK/CXCL14in Human Head and Neck Squamous Cell Carcinoma Cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Maehata Y, Ozawa S, Kobayashi K, Kato Y, Yoshino F, Miyamoto C, Izukuri K, Kubota E, Hata R-I, Lee M-C.
  • 雑誌名: Free Radical Res. 44(8) ページ: 913-924
• [雑誌論文] Reactive Oxygen Species (ROS) Reduce the Expression of BRAK/CXCL14in Human Head and Neck Squamous Cell Carcinoma Cells. (2010)
  • 著者名/発表者名: Y MAEHATA, et al.
  • 雑誌名: Free Radical Research 巻: 44 ページ: 913-924
  • 査読あり
• [雑誌論文] Restoration of BRAK / CXCL14 gene expression by gefitinib is associated with antitumor efficacy of the drug in head and neck squamous cell carcinoma. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ozawa S, Kato Y, Ito S, Komori R, Shiiki N, Tsukinoki K, Ozono S, Maehata Y, Taguchi T, Imagawa-Ishiguro Y, Tsukuda M, Kubota E, Hata R.
  • 雑誌名: Cancer Sci. Nov.100(11) ページ: 2002-2009
  • NAID: 10027197383
• [雑誌論文] Restoration of BRAK/CXCL14 gene expression by gefitinib is associated with antitumor efficacy of the drug in head and neck sauamous cell carcinoma. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ozawa S, Maehata Y, et al.
  • 雑誌名: Cancer Science 100 ページ: 2202-2209
  • 査読あり
• [雑誌論文] Roles of Collagen Molecules in Growth and Differentiation of Human Osteoblasts. (2009)
  • 著者名/発表者名: Maehata Y, et al.
  • 雑誌名: Journal of Oral Bioscience 51 ページ: 72-80
  • NAID: 10027104531
  • 査読あり
• [学会発表] OXIDATIVE STRESS REDUCE EXPRESSION OF CXCL14/BRAK IN HUMAN SCC CELLS (2011)
  • 著者名/発表者名: Y MAEHATA, et al.
  • 学会等名: 89^<th> IADR/AADR General Session & Exhibition
  • 発表場所: San Diego Convention Center
  • 年月日: 2011-03-16
• [学会発表] Oxidative stress reduce expression of CXCL14/BRAK in human cells. (2011)
  • 著者名/発表者名: MAEHATA Y.,OZAWA S., MIYAMOTO C.,KOBAYASHI K.,KOMORI R.,HATA R.-I.,LEE M.C.-I.
  • 学会等名: IADR Gereral Session
  • 発表場所: San Diego, Calif., USA.
• [学会発表] Fasdil, an inhibitor of ROCK, suppresses tumor grouwth in vivo. (2011)
  • 著者名/発表者名: MIYAMOTO C., MAEHATA Y., KOMORI R., KOBAYASHI K., HATA R.-I., LEE M.C.-I.
  • 学会等名: IADR Gereral Session
  • 発表場所: San Diego, Calif., USA.
• [学会発表] 新規抗腫〓性ケモカインBRAK/CXCL14の発現および分泌制御機構の解明～酸化ストレスはBRAKの発現と細胞外分泌を抑制する～ (2010)
  • 著者名/発表者名: 前畑洋次郎, 宮本千央, 小澤重幸, 吉野文彦, 小林杏, 高橋聡子, 高橋俊介, 畑隆一郎, 李昌一
  • 学会等名: 第25回日本酸化ストレス学会関東支部会
  • 発表場所: 江戸川, 東京
  • 年月日: 2010-12-11
• [学会発表] 新規抗腫〓性ケモカインBRAK/CXCL14の発現および分泌制御機構の解明～酸化ストレスはBRAKの発現と細胞外分泌を抑制する～. (2010)
  • 著者名/発表者名: 前畑洋次郎
  • 学会等名: 第25回日本酸化ストレス学会関東支部会
  • 発表場所: タワーホール船堀(シンポジウム)
  • 年月日: 2010-12-11
• [学会発表] 選択的ROCK阻害剤による抗腫〓性ケモカインBRAK/CXCL14を介した腫〓進展抑制の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮本千央, 前畑洋次郎, 小澤重幸, 生駒丈晴, 居作和人, 小林杏, 高橋聡子, 高橋俊介, 吉野文彦, 杉山秀太, 吉田彩佳, 畑隆一郎, 李昌一
  • 学会等名: 神奈川歯科大学学会第45回総会
  • 発表場所: 横須賀, 神奈川
  • 年月日: 2010-12-04
• [学会発表] ROCK阻害剤Fasudil による抗腫〓性ケモカインBRAK/CXCL14の細胞外分泌促進と腫〓進展抑制の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮本千央, 前畑洋次郎, 小澤重幸, 生駒丈晴, 小森令賀, 居作和人, 加藤靖正, 畑隆一郎, 李昌一
  • 学会等名: 第123回日本薬理学会関東部会
  • 発表場所: 自治医大、栃木
  • 年月日: 2010-10-23
• [学会発表] 選択的ROCK阻害剤による抗腫〓性ケモカインBRAK/CXCL14の腫〓進展抑制の検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮本千央、前畑洋次郎、小澤重幸, 生駒丈晴, 居作和人, 畑隆一郎, 李昌一
  • 学会等名: 神奈川歯科大学学会第133回例会
  • 発表場所: 横須賀、神奈川
  • 年月日: 2010-10-14
• [学会発表] 骨芽細胞の増殖と分化におけるコラーゲン分子の機能;骨コラーゲン代謝を標的とした骨粗鬆症治療の基礎的検討 (2010)
  • 著者名/発表者名: 前畑洋次郎
  • 学会等名: 第42回日本結合組織学会・第57回マトリックス研究会合同学術集会
  • 発表場所: 秋田市民交流プラザ(特別講演)
  • 年月日: 2010-08-20
• [学会発表] ROCK阻害剤はケモカインBRAK/CXCL14の細胞外分泌を促進し抗腫〓効果を発揮する (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮本千央, 前畑洋次郎, 高橋聡子, 高橋俊介, 杉山秀太, 徳富文彬, 加藤靖正, 畑隆一郎, 李昌一
  • 学会等名: 第52回歯科基礎医学会学術大会・総会
  • 発表場所: 江戸川,東京
• [学会発表] ROCK阻害剤FasudilはケモカインBRAK/CXCL14の細胞外分泌を促進し抗腫〓効果を発揮する (2010)
  • 著者名/発表者名: 宮本千央, 前畑洋次郎, 小澤重幸, 加藤靖正, 畑隆一郎, 李昌一
  • 学会等名: 第42回日本結合組織学会・第57回マトリックス研究会合同学術集会
  • 発表場所: 秋田, 秋田
• [学会発表] 口腔扁平上皮癌細胞においてGefitinib (Iressa)は酸化ストレスに誘導される抗腫瘍性ケモカインBRAK/CXCL14の発現低下を抑制する (2009)
  • 著者名/発表者名: 前畑洋次郎, 小澤重幸, 小林杏, 吉野文彦, 宮本千央, 加藤靖正, 畑隆一郎, 李昌一
  • 学会等名: 第121回日本薬理学会関東部会
  • 発表場所: 新宿区,東京
  • 年月日: 2009-10-10
• [学会発表] 口腔扁平上皮癌細胞においてGefitinib(Iressa)は酸化ストレスに誘導される抗腫瘍性ケモカインBRAK/CXCL 14の発現低下を抑制する (2009)
  • 著者名/発表者名: 前畑洋次郎
  • 学会等名: 第121回日本薬理学会関東部会
  • 発表場所: 新宿区,東京
  • 年月日: 2009-10-10
• [学会発表] Reactive oxygen species reduce the expression of BRAK/CXCL 14 in human head and neck sauamous cell carcinoma cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: Maehata Y., et al.
  • 学会等名: 41st Annual Meeting of the Japanese Society of Connective Tissue Research (JSCTR) 56th Annual Meeting of the Japan Matricx Club (JMC)
  • 発表場所: Yokosuka, Kanagawa, Japan.
  • 年月日: 2009-06-06
• [学会発表] 頭頚部扁平上皮癌細胞種における酸化ストレスによる腫瘍抑制ケモカインBRAKICXCL14の発現抑制制御機構の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮本千央, 前畑洋次郎
  • 学会等名: 第9回日本抗加齢医学会総会
  • 発表場所: 港区,東京
  • 年月日: 2009-05-29
• [学会発表] Reactive oxygen species reduce the production of BRAK/CXCL14 in human head and neck squamous cell carcinoma cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: MIYAMOTO C., MAEHATA Y., YOSHINO F., KOBAYASHI K., LEE M.C.-I.
  • 学会等名: SFRBM's 16th Annual Meeting
  • 発表場所: San Francisco,California USA.
• [学会発表] Reactive oxygen species reduce the expression of BRAK/CXCL14 in human head and neck squamous cell carcinoma cells. (2009)
  • 著者名/発表者名: MAEHATA Y., OZAWA S., MIYAMOTO C., KOBAYASHI K., KATO Y., YOSHINO F., LEE M.C.-I., HATA R.
  • 学会等名: 41st Annual Meeting of the Japanese Society of Connective Tissue Research (JSCTR) 56th Annual Meeting of the Japan Matricx Club (JMC)
  • 発表場所: Yokosuka, Kanagawa, Japan.
• [学会発表] 頭頚部扁平上皮癌細胞種における酸化ストレスによる腫瘍抑制ケモカインBRAK/CXCL14の発現抑制制御機構の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 宮本千央, 前畑洋次郎, 吉野文彦, 小林杏, 吉田彩佳, 杉山秀太, 高橋聡子, 高橋俊介, 前谷崇志, 川村陽介, 小松知子, 岡田永三, 岡田康江, 辻村傑, 大野晃教, 李昌一
  • 学会等名: 第9回日本抗加齢医学会総会
  • 発表場所: 港区,東京