| 研究課題/領域番号 |
21H01861
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分31010:原子力工学関連
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| 研究機関 | 福井大学 |
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研究代表者 |
清水 喜久雄 福井大学, 附属国際原子力工学研究所, 特命教授 (20162696)
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| 研究分担者 |
久米 恭 公益財団法人若狭湾エネルギー研究センター, 研究開発部, 室長 (50359238)
泉 佳伸 福井大学, 附属国際原子力工学研究所, 教授 (60252582)
松尾 陽一郎 福井大学, 学術研究院工学系部門, 准教授 (90568883)
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| 研究期間 (年度) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| 研究課題ステータス |
完了 (2023年度)
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| 配分額 *注記 |
17,940千円 (直接経費: 13,800千円、間接経費: 4,140千円)
2023年度: 3,640千円 (直接経費: 2,800千円、間接経費: 840千円)
2022年度: 3,120千円 (直接経費: 2,400千円、間接経費: 720千円)
2021年度: 11,180千円 (直接経費: 8,600千円、間接経費: 2,580千円)
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| キーワード | DNA線量計 / バイオアッセイ / リアルタイムPCR法 / DNA損傷 / DNA損傷評価 / バイオドシメトリー / qPCR法 / 緊急被ばく / 放射線加重係数 / 線量評価 / LET / 生物学的効果比 |
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| 研究開始時の研究の概要 |
本研究はポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を用いて、放射線によるDNA損傷を指標として、緊急被ばく時の吸収線量の評価を行うものである。従来の物理・化学反応を用いた被ばく線量測定手法と原理的に異なり、生体影響の要因となるDNA損傷に基づく評価手法である。線質の異なる放射線が混在した状況であっても、DNA損傷に基づいて被ばく量の評価を可能にする、これまでになく新しい手法の確立を目指す。この目的のためにガンマ線や炭素粒子などの荷電粒子線に加えて研究例の少ない中性子線についても対象とする。
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| 研究実績の概要 |
本研究はポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を用いて、放射線によるDNA損傷を指標として、緊急被ばく時の吸収線量の評価を行うものである。
これまでの研究により、ウシ血液に放射線を照射した場合の血球中のDNAを対象とした評価が可能であることを示してきた。しかしながら、被ばく線量測定手法として適用する場合、細胞中に生じ たDNA鎖切断と、PCRによって評価されたDNA切断量の関係を明らかにする必要がある。そこで2024年度は、哺乳動物細胞であるCHO-K1 (チャイニーズハムスター卵巣単上皮細胞)にγ線を照射した場合のDNA二本鎖切断について、γH2AX蛍光免疫染色法を用いて評価した。ガンマ線照射は大阪大学産業科学研究所のコバルト-60線源を用い、吸収線量は0～5Gyである。蛍光免疫染色にはDNA Damage Detection Kit-γH2AX-Green（同仁化学研究所）を用いた。DSB部位に集積したγH2AXに一次抗体を添加し、その後に染色溶液を及び二次抗体を添加し、その後、蛍光顕微鏡により細胞核あたりのγH2AXのfoci数を計測した。
照射を行わない場合、吸収線量の増加とともにfoci数、すなわちDNA二本鎖切断の頻度が上昇した。一方で、3Gy以上の照射では、DNA二本鎖切断の頻度は一定となる傾向が観測された。PCRにより得られたDNA損傷量と吸収線量の関係においても、一定の吸収線量以上によるDNA損傷量の飽和の傾向がみられている。PCRによるDNA鎖切断頻度について、PCRによる評価と類似していることが示された。
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| 現在までの達成度 (段落) |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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